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几种不同鱼内脏脂肪素基因的克隆、表达丰度与基因全序列研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-14页
第一章 文献综述第14-34页
   ·Visfatin的结构第15-18页
     ·Visfatin基因的分子特征第15-16页
     ·Visfatin蛋白的基本结构第16-18页
   ·Visfatin的分布第18-19页
   ·Visfatin的表达调控第19-22页
     ·细胞因子对visfatin表达的调节第19-20页
     ·激素对visfatin表达的调节第20页
     ·药物对visfatin表达的调节第20-21页
     ·其他因素对visfatin表达的调节第21-22页
   ·Visfatin的生理学功能第22-30页
     ·Visfatin的类胰岛素作用第22-23页
     ·Visfatin的Nampt酶活性第23-27页
     ·Visfatin的细胞因子特性第27-30页
   ·Visfatin与疾病第30-33页
     ·Visfatin与代谢综合征第30-31页
     ·Visfatin与动脉粥样硬化第31-32页
     ·Visfatin与恶性肿瘤第32-33页
   ·实验动物简介第33-34页
第二章 研究的目的与意义第34-35页
第三章 材料与方法第35-48页
   ·实验材料第35-38页
     ·实验动物第35页
     ·试剂盒第35-36页
     ·工具酶第36页
     ·其他试剂第36页
     ·培养基及宿主菌第36页
     ·主要溶液的配制第36-37页
     ·主要仪器设备第37-38页
     ·主要引物第38页
   ·实验方法第38-48页
     ·样品采集第38页
     ·总RNA提取第38-40页
     ·逆转录合成cDNA第一链第40-41页
     ·PCR扩增visfatin DNA片段第41-42页
     ·目的片段的回收、连接、转化与鉴定第42-44页
       ·目的片段的回收第42页
       ·目的片段与pMD-18T载体连接第42页
       ·DH5α感受态细胞的制备第42页
       ·连接产物转化DH5α感受态细胞第42-43页
       ·转化子的鉴定第43页
       ·质粒DNA提取第43-44页
     ·3’-RACE快速扩增银鲫visfatin cDNA 3’末端第44页
     ·半定量PCR检测visfatin在不同组织中的表达第44-45页
     ·荧光定量PCR检测银鲫visfatin在不同组织中的表达第45页
     ·visfatin基因全序列分析第45-46页
       ·基因组DNA的提取第45-46页
       ·Visfatin非编码序列的PCR扩增第46页
       ·非编码序列的回收、连接、转化与鉴定第46页
       ·Visfatin基因全序列的拼接第46页
     ·数据分析第46-48页
第四章 结果与分析第48-77页
   ·不同组织总RNA提取与检测第48页
   ·18S内参PCR扩增检测不同组织cDNA质量第48-49页
   ·银鲫visfatin cDNA序列、基因全序列及组织表达第49-56页
     ·银鲫visfatin cDNA序列PCR扩增第49页
     ·银鲫visfatin cDNA序列及visfatin蛋白预测第49-52页
     ·银鲫visfatin编码序列及氨基酸序列同源性分析第52-55页
     ·半定量PCR测定银鲫visfatin在不同组织中的表达第55页
     ·荧光定量PCR测定银鲫visfatin在不同组织中的表达第55页
     ·银鲫visfatin基因全序列第55-56页
   ·白鲢visfatin cDNA序列、基因序列及组织表达第56-63页
     ·白鲢visfatin基因cDNA序列第56-60页
     ·半定量PCR测定白鲢visfatin基因在不同组织中的表达第60-62页
     ·白鲢visfatin基因序列第62-63页
   ·草鱼visfatin cDNA序列、基因序列及组织表达第63-66页
     ·草鱼visfatin基因cDNA序列第63-65页
     ·半定量PCR测定草鱼visfatin基因在不同组织中的表达第65页
     ·草鱼visfatin基因序列第65-66页
   ·团头鲂visfatin cDNA序列、基因序列及组织表达第66-69页
     ·团头鲂visfatin基因cDNA序列第66-68页
     ·半定量PCR测定团头鲂visfatin基因在不同组织中的表达第68-69页
     ·团头鲂visfatin基因序列第69页
   ·银鲫、白鲢、草鱼和团头鲂visfatin基因序列与蛋白序列比对第69-77页
     ·银鲫、白鲢、草鱼和团头鲂visfatin cDNA序列比对第69-74页
     ·银鲫、白鲢、草鱼和团头鲂visfatin内含子序列对比第74页
     ·银鲫、白鲢、草鱼和团头鲂visfatin氨基酸序列比对第74-75页
     ·银鲫、白鲢、草鱼和团头鲂visfatin蛋白系统进化分析第75-77页
第五章 讨论第77-81页
   ·保守氨基酸对四种硬骨鱼visfatin蛋白空间结构的影响第77-78页
   ·Visfatin在不同物种间高度保守第78页
   ·四种硬骨鱼visfatin基因内含子序列高度变异第78-79页
   ·Visfatin在四种硬骨鱼体内呈广谱表达第79页
   ·四种硬骨鱼visfatin基因无可变剪接第79-81页
第六章 结语第81-83页
   ·结论第81-82页
   ·本研究的创新之处第82页
   ·本研究的不足之处第82-83页
参考文献第83-94页
附录第94-102页
研究生期间发表论文第102-103页
致谢第103页

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