论文中用到的缩写词 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
第一部分 ΦC31整合酶的酶学性质与蛋白构象的研究 | 第10-44页 |
前言 | 第10-13页 |
材料和方法 | 第13-25页 |
结果 | 第25-37页 |
1Φ.FC31整合酶的表达与纯化 | 第25-27页 |
2.ΦC31整合酶的活性分析 | 第27-30页 |
3.ΦC31整合酶的酶活与各种离子,pH值,温度的关系 | 第30-34页 |
4.ΦC31整合酶的蛋白二级结构分析 | 第34-37页 |
讨论 | 第37-40页 |
小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
第二部分 利用F C31整合酶的蛋白转导介导定点整合的研究 | 第44-78页 |
前言 | 第44-46页 |
材料和方法 | 第46-58页 |
结果 | 第58-72页 |
1.建立定量检测ΦC31整合酶功能的哺乳动物细胞系统 | 第58-61页 |
2.ΦC31整合酶在哺乳动物细胞中的功能和定位的关系 | 第61-65页 |
3.制备TAT和NLS修饰的ΦC31整合酶蛋白 | 第65-68页 |
4.ΦC31整合酶蛋白转导介导细胞染色体水平上的位点特异性重组 | 第68-72页 |
讨论 | 第72-74页 |
小结 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第三部分 应用ΦC31整合酶的蛋白转导介导人凝血因子Ⅸ在细胞基因组中的位点特异性整合的研究 | 第78-93页 |
前言 | 第78-80页 |
材料和方法 | 第80-83页 |
结果 | 第83-88页 |
1.表达人凝血因子Ⅸ的293细胞系的克隆 | 第83页 |
2.PCR检测TAT-ΦC31-NLS蛋白介导at tB-EF-hFⅨ在psiA位点的整合 | 第83-84页 |
3.ELISA检测筛选后整合的细胞克隆表达的hFⅨ | 第84页 |
4.TAT-ΦC31-NLS蛋白转导对COS-1细胞周期的影响 | 第84-86页 |
5.TAT-ΦC31-NLS蛋白转导对COS-1细胞早期凋亡的影响 | 第86页 |
6.功能性TAT-ΦC31-NLS蛋白在细胞中的快速降解 | 第86-88页 |
讨论 | 第88-90页 |
小结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-93页 |
综述:噬茵体重组酶-ΦC31整合酶的生物学性质研究进展 | 第93-104页 |
论文与专利情况 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |