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高品位壳聚糖介导基因载体制备的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-32页
 1.1 引言第11页
 1.2 几丁质和壳聚糖的概况及应用第11-16页
  1.2.1 几丁质和壳聚糖第11-12页
  1.2.2 壳聚糖在各领域的应用第12-16页
   1.2.2.1 基因载体第12-14页
   1.2.2.2 抗菌抑菌第14-15页
   1.2.2.3 食品方面的用途第15-16页
 1.3 壳低聚糖的制备第16-21页
  1.3.1 酸解法第16-17页
  1.3.2 氧化法第17-18页
   1.3.2.1 H_2O_2水解法第17页
   1.3.2.2 H_2O_2-NaClO_2法第17页
   1.3.2.3 NaBO_3氧化法第17-18页
  1.3.3 超声波法第18页
  1.3.4 酶解法第18-21页
   1.3.4.1 非专一性酶法第19-20页
   1.3.4.2 专一性酶法第20-21页
 1.4 壳聚糖的质量检测第21-26页
  1.4.1 壳聚糖含量的测定第21-22页
  1.4.2 壳聚糖相对分子量的测定第22-24页
  1.4.3 壳聚糖脱乙酰度(DDA)的测定第24-25页
  1.4.4 水分及灰分的测定第25-26页
   1.4.4.1 水分的测定第25页
   1.4.4.2 灰分的测定第25-26页
 1.5 固定化酶的研究第26-31页
  1.5.1 固定化方法的分类第26-29页
   1.5.1.1 包埋法第26-27页
   1.5.1.2 吸附法第27-28页
   1.5.1.3 共价法第28页
   1.5.1.4 交联法第28-29页
  1.5.2 固定化载体第29-31页
 1.6 展望第31-32页
第二章 实验材料、仪器和方法第32-37页
 2.1 材料第32页
  2.1.1 实验材料第32页
  2.1.2 菌种及保藏第32页
  2.1.3 培养基第32页
 2.2 主要仪器设备及其用途第32页
 2.3 分析方法第32-37页
  2.2.1 还原糖浓度的测定第33-34页
  2.2.2 酶活力的测定第34-35页
  2.2.3 蛋白质浓度的测定第35-36页
  2.2.4 壳聚糖特性粘度的测定第36-37页
第三章 青霉菌产壳聚糖酶制备低聚糖的研究第37-47页
 3.1 前言第37页
 3.2 实验材料与方法第37-39页
  3.2.1 实验设备第37页
  3.2.2 实验材料第37页
  3.2.3 实验方法第37-39页
   3.2.3.1 特性黏度测定 采用乌氏粘度法第37页
   3.2.3.2 还原糖浓度测定 采用 DNS法第37页
   3.2.3.3 酶活力测定第37-38页
   3.2.3.4 纸色谱方法第38页
   3.2.3.5 分子量和特性黏度关系测定第38页
   3.2.3.6 壳聚糖酶的制备及分离第38页
   3.2.3.7 发酵法及内切酶法制备低分子量壳聚糖第38-39页
 3.3 结果与讨论第39-45页
  3.3.1 壳聚糖酶的制备及分离第39页
  3.3.2 壳聚糖酶的稳定性及米氏常数测定第39-40页
   3.3.2.1 壳聚糖酶的保存稳定性第39-40页
   3.3.2.2 壳聚糖酶米氏常数的测定第40页
  3.3.3 壳聚糖酶的降解特性第40-43页
   3.3.3.1 酶切方式的确定第40-42页
   3.3.3.2 加酶量对反应过程的影响第42页
   3.3.3.3 底物浓度对降解过程的影响第42-43页
  3.3.4 酶法制备低分子量壳聚糖第43-45页
   3.3.4.1 MHS方程中常数 K、a的确定第43页
   3.3.4.2 加热前后粘度变化第43-44页
   3.3.4.3 不同分子量壳聚糖的制备第44-45页
  3.3.5 发酵液中低分子量壳聚糖的分离第45页
 3.4 结论第45-47页
第四章 壳聚糖内切酶的固定化及其降解特性第47-61页
 4.1 前言第47页
 4.2 材料和方法第47-49页
  4.2.1 实验材料第47页
  4.2.2 实验方法第47-49页
   4.1.2.1 载体的前处理第47-48页
   4.1.2.2 壳聚糖内切酶的制备第48页
   4.1.2.3 载体的交联第48页
   4.1.2.4 酶的固定化第48-49页
   4.1.2.5 壳聚糖固定化壳聚糖酶的可行性第49页
   4.1.2.6 酶活力测定第49页
 4.3 结果与讨论第49-60页
  4.3.1 壳聚糖胶板固定壳聚糖酶的可行性第49-50页
  4.3.2 壳聚糖内切酶的制备第50-51页
  4.3.3 壳聚糖酶固定化载体的选择第51-52页
   4.3.3.1 5种载体固定化壳聚糖酶效果比较第51-52页
   4.2.2.2 不同载体固定化所得固定化壳聚糖酶储存稳定性比较第52页
  4.3.4 DEAE纤维素固定化壳聚糖内切酶的条件研究第52-55页
   4.3.4.1 戊二醛浓度的影响第52-53页
   4.3.4.2 加酶量的影响第53-54页
   4.3.4.3 pH值的影响第54页
   4.3.4.4 固定化时间的影响第54-55页
   4.3.4.5 最优条件下壳聚糖内切酶的固定化第55页
  4.3.5 固定化酶的性质研究第55-58页
   4.3.5.1 温度对固定化酶活力的影响第55-56页
   4.3.5.2 pH对固定化酶活力的影响第56-57页
   4.3.5.3 固定化酶操作稳定性第57页
   4.3.5.4 固定化酶的保存稳定性第57-58页
  4.3.6 反应器中固定化酶降解壳聚糖的研究第58-60页
   4.3.6.1 反应装置第58-59页
   4.3.6.2 不同流速下产物中还原糖的变化第59页
   4.3.6.3 反应器中固定化酶的失活情况第59-60页
 4.4 结论第60-61页
第五章 壳聚糖溶液脱盐、喷雾干燥及质量检测第61-71页
 5.1 前言第61页
 5.2 材料和方法第61-64页
  5.2.1 实验材料和试剂第61页
  5.2.2 实验方法第61-64页
   5.2.2.1 阴离子树脂的预处理、保存及再生第61-62页
   5.2.2.2 脱盐树脂的选择第62页
   5.2.2.3 壳低聚糖溶液的脱盐第62页
   5.2.2.4 喷雾干燥条件的确定第62-63页
   5.2.2.5 分子量测定第63页
   5.2.2.6 脱乙酰度测定第63页
   5.2.2.7 水分的测定第63-64页
   5.2.2.8 灰分的测定第64页
 5.3 结果与讨论第64-70页
  5.3.1 4种阴离子树脂的质量指标第64页
  5.3.2 4种树脂吸附乳酸根效果比较第64-65页
  5.3.3 离子交换法去除乳酸根第65-66页
   5.3.3.1 离子交换装置第65页
   5.3.3.2 电导率和pH值的变化第65-66页
  5.3.4 喷雾干燥法制备壳聚糖第66-67页
  5.3.5 低聚糖产品分子量的测定第67-69页
  5.3.6 产品脱乙酰度的测定第69-70页
  5.3.7 产品水分的测定第70页
 5.4 结论第70-71页
结论与建议第71-73页
攻读硕士学位期间发表录用的论文第73-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-79页

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