| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-13页 |
| 材料与方法 | 第13-25页 |
| 1 实验菌株 | 第13页 |
| 2 培养基 | 第13-14页 |
| 3 试剂 | 第14-16页 |
| 4 仪器设备 | 第16页 |
| 5 几丁质／壳聚糖酶产生菌株的复选 | 第16页 |
| 6 几丁质／壳聚糖酶产生菌株的部分16S rDNA序列的测定 | 第16-17页 |
| ·模板DNA的提取 | 第16页 |
| ·引物的合成 | 第16-17页 |
| ·16S rDNA PCR扩增反应条件的优化 | 第17页 |
| ·产物的序列测定与结果分析 | 第17页 |
| 7 壳聚糖酶产生菌C-28的形态特征与理化特性鉴定 | 第17页 |
| ·形态特征鉴定 | 第17页 |
| ·生理生化特性鉴定 | 第17页 |
| 8 摇瓶中C-28发酵液酶活力的测定与发酵条件的优化 | 第17-20页 |
| ·发酵液酶活力的测定 | 第17-19页 |
| ·发酵条件的优化 | 第19-20页 |
| ·四因素三水平正交实验 | 第20页 |
| ·C-28在最适产酶条件下，发酵液中pH、还原糖和酶活变化 | 第20页 |
| 9 C-28壳聚糖酶理化性质的初步研究 | 第20-23页 |
| ·C-28壳聚糖酶的初步纯化 | 第20-21页 |
| ·C-28壳聚糖酶反应的最适温度和酶的热稳定性 | 第21-22页 |
| ·C-28壳聚糖酶反应的最适pH和酶的酸碱稳定性 | 第22页 |
| ·C-28壳聚糖酶的底物特异性 | 第22页 |
| ·金属离子对C-28壳聚糖酶活力的影响 | 第22页 |
| ·C-28壳聚糖酶分子量的测定 | 第22-23页 |
| 10 C-28壳聚糖酶降解产物的初步分析 | 第23页 |
| 11 C-28壳聚糖酶基因的克隆 | 第23页 |
| ·模板DNA的提取及检测 | 第23页 |
| ·壳聚糖酶基因引物的设计 | 第23页 |
| ·PCR扩增C-28壳聚糖酶基因的程序 | 第23页 |
| 12 CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶的分离纯化 | 第23-25页 |
| ·CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶的(NH_4)_2SO_4盐析 | 第23-24页 |
| ·CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶的凝胶柱层析 | 第24页 |
| ·CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶分子量的测定 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-43页 |
| 1 几丁质酶、壳聚糖酶产生菌株的复选 | 第25页 |
| 2 几丁质酶、壳聚糖酶产生菌株的部分16S rDNA序列 | 第25-30页 |
| ·PCR反应条件与反应体系 | 第25页 |
| ·PCR扩增产物序列测定及分析 | 第25-30页 |
| 3 壳聚糖酶产生菌C-28菌株的分类鉴定 | 第30-32页 |
| ·C-28菌株部分16S rDNA序列分析 | 第31页 |
| ·C-28菌株形态特征鉴定 | 第31页 |
| ·C-28菌株生理生化特性鉴定 | 第31-32页 |
| 4 发酵液酶活力的测定 | 第32-33页 |
| ·制作氨基葡萄糖标准曲线 | 第32页 |
| ·测定壳聚糖酶活力 | 第32-33页 |
| 5 摇瓶中C-28产壳聚糖酶发酵条件的优化 | 第33-36页 |
| ·C-28菌株产壳聚糖酶的诱导性 | 第33页 |
| ·C-28产壳聚糖酶的分泌性 | 第33页 |
| ·摇瓶装量对C-28产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·培养温度对C-28产酶的影响 | 第34页 |
| ·培养基中壳聚糖量对C-28产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·C-28产壳聚糖酶发酵条件的正交试验 | 第35-36页 |
| ·C-28在最适产酶条件下，发酵液中pH，还原糖和酶活变化 | 第36页 |
| 6 C-28壳聚糖酶理化性质的初步研究 | 第36-41页 |
| ·C-28壳聚糖酶的初步纯化 | 第36-37页 |
| ·C-28壳聚糖酶反应的最适温度和酶的热稳定性 | 第37-38页 |
| ·C-28壳聚糖酶反应的最适pH和酸碱稳定性 | 第38-39页 |
| ·C-28壳聚糖酶的底物特异性 | 第39页 |
| ·金属离子对C-28壳聚糖酶活力的影响 | 第39页 |
| ·C-28壳聚糖酶的SDS-PAGE | 第39-40页 |
| ·C-28壳聚糖酶分子量的测定 | 第40-41页 |
| ·C-28壳聚糖酶酶产物分析 | 第41页 |
| 7 CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶的分离纯化 | 第41-43页 |
| ·柱层析初步纯化壳聚糖酶蛋白 | 第41-42页 |
| ·CJ-5几丁质酶、壳聚糖酶的SDS-PAGE和分子量测定 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-51页 |
| 1 几丁质、壳聚糖酶产生菌株的分类鉴定 | 第43-44页 |
| 2 C-28壳聚糖酶活力的测定方法 | 第44-45页 |
| 3 C-28产壳聚糖酶发酵条件的研究 | 第45-46页 |
| 4 C-28壳聚糖酶的分离纯化 | 第46-47页 |
| 5 C-28壳聚糖酶性质研究 | 第47-48页 |
| 6 C-28壳聚糖酶酶解产物及作用机理分析 | 第48-49页 |
| 7 C-28壳聚糖酶基因的克隆 | 第49页 |
| 8 CJ-5几丁质酶和壳聚糖酶的研究 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 论文发表 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
