| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩写表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 食品安全性及沙门氏菌危害 | 第10页 |
| 2 沙门氏菌检测技术研究进展 | 第10-12页 |
| 3 沙门氏菌检测常用目的基因和引物 | 第12-14页 |
| 4 荧光PCR检测方法的原理与应用 | 第14-21页 |
| ·荧光PCR原理 | 第14-15页 |
| ·常用的荧光PCR探针 | 第15-20页 |
| ·荧光PCR检测方法的特点 | 第20页 |
| ·荧光PCR检测方法的应用 | 第20-21页 |
| 第二章 沙门氏菌属特异性引物的选定 | 第21-26页 |
| 1 目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-25页 |
| ·实验菌株 | 第22-24页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第24页 |
| ·沙门氏菌PCR引物的设计与选择 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-26页 |
| 第三章 沙门氏菌TAQMAN-MGB方法的建立与评价 | 第26-38页 |
| 1 目的与意义 | 第26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-31页 |
| ·实验菌株 | 第26页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第26-27页 |
| ·样品的前处理 | 第27-28页 |
| ·沙门氏菌TaqMan-MGB检测方法的建立 | 第28-29页 |
| ·沙门氏菌TaqMan-MGB检测方法的评价 | 第29-30页 |
| ·荧光PCR定量分析仪(BIO-RAD，icycle)使用方法 | 第30页 |
| ·细菌DNA抽提方法 | 第30页 |
| ·DNA浓度测定方法 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·适宜增菌液的选择 | 第31页 |
| ·反应模板的简易制备 | 第31-32页 |
| ·TaqMan-MGB方法的建立 | 第32-34页 |
| ·TaqMan-MGB检测方法的特异性 | 第34-35页 |
| ·TaqMan-MGB检测方法的灵敏度 | 第35-37页 |
| ·TaqMan-MGB检测方法的抗干扰性 | 第37页 |
| ·TaqMan-MGB检测方法的可重复性 | 第37-38页 |
| 第四章 沙门氏菌分子信标检测方法的建立与评价 | 第38-49页 |
| 1 目的与意义 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验菌株 | 第38页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第38页 |
| ·样品的前处理 | 第38-39页 |
| ·沙门氏菌分子信标检测方法的建立 | 第39-40页 |
| ·沙门氏菌分子信标检测方法的评价 | 第40-41页 |
| ·荧光PCR定量分析仪(BIO-RAD，icycle)使用方法 | 第41页 |
| ·细菌DNA抽提方法 | 第41页 |
| ·DNA浓度测定方法 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-49页 |
| ·适宜增菌液的选择 | 第41页 |
| ·反应模板的简易制备 | 第41-42页 |
| ·沙门氏菌分子信标检测方法的建立 | 第42-44页 |
| ·分子信标检测方法的特异性 | 第44-45页 |
| ·分子信标检测方法的灵敏度 | 第45-47页 |
| ·分子信标检测方法的抗干扰性 | 第47-48页 |
| ·分子信标检测方法的可重复性 | 第48-49页 |
| 第五章 沙门氏菌荧光PCR方法的应用 | 第49-51页 |
| 1 目的与意义 | 第49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-50页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第49页 |
| ·样品种类 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-51页 |
| ·食品污染调查情况 | 第50页 |
| ·食品从业人员的肛拭子调查 | 第50页 |
| ·细菌性食物中毒的快速诊断 | 第50-51页 |
| 第六章 讨论 | 第51-58页 |
| 1 样品的前处理和增菌液的选择 | 第51页 |
| 2 TAQMAN-MGB反应中两步法与三步法的比较 | 第51-52页 |
| 3 分子信标成功的关键 | 第52页 |
| 4 TAQMAN-MGB方法和分子信标方法的特异性与灵敏度 | 第52-53页 |
| 5 荧光PCR反应的影响因素 | 第53-54页 |
| 6 关于荧光探针的讨论 | 第54-55页 |
| 7 实验室PCR产物的污染问题 | 第55页 |
| 8 荧光PCR反应的优点与不足 | 第55-56页 |
| 9 传统检测方法与荧光PCR方法的比较 | 第56页 |
| 10 两种荧光PCR检测方法的比较 | 第56-57页 |
| 11 沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒的开发构想 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
