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水稻抗白叶枯病候选基因—Xa4的克隆研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 文献综述第9-23页
   ·水稻基因组研究进展第9-14页
     ·水稻是研究单子叶植物的模式植物第9-10页
     ·水稻遗传图谱及物理图谱的构建第10-11页
     ·水稻基因组序列测定及分析第11-12页
     ·水稻基因组的进化第12-13页
     ·水稻功能基因组研究第13-14页
   ·水稻(植物)抗病基因研究进展第14-22页
     ·植物的抗病性第14-18页
     ·植物抗病基因及其克隆第18-20页
     ·水稻主要抗病基因研究第20-22页
   ·开题设想第22-23页
2 材料与方法第23-35页
   ·材料第23-25页
     ·水稻材料第23页
     ·BAC文库第23页
     ·试剂和药品第23-25页
   ·测序亚克隆文库构建及序列测定第25-29页
     ·感受态细胞的的制备第25-26页
     ·BAC DNA的提取第26-27页
     ·大肠杆菌质粒DNA的小量制备(碱法)第27页
     ·构建用于测序的亚克隆文库第27-28页
     ·鸟枪法BAC序列测定第28-29页
     ·序列分析及同源性比较第29页
   ·构建用于序列补空及含候选基因(NBS-LRR)克隆的亚克隆文库的构建第29-33页
     ·BAC DNA提取第29页
     ·BAC DNA的部分消化第29-30页
     ·载体pCAMBIA1301的准备第30-31页
     ·亚克隆文库构建第31页
     ·准备DNA分子杂交膜第31-32页
     ·DNA分子杂交筛选含NBS-LRR序列的克隆第32-33页
     ·进一步分析筛选出的含NBS-LRR序列的克隆第33页
   ·Xa4基因定位第33-34页
     ·材料准备第33页
     ·水稻基因组DNA的微量提取第33-34页
     ·PCR及RFLP第34页
     ·Xa4物理图谱构建第34页
   ·cDNA文库构建及文库筛选第34-35页
3 结果与分析第35-57页
   ·Xa4基因的定位及其共分离标记的获得第35-36页
     ·Xa4的遗传特点第35-36页
     ·Xa4的分子标记定位与共分离标记的获得第36页
   ·Xa4候选BAC的筛选与物理图谱构建第36-39页
     ·Xa4候选BAC的筛选第36-37页
     ·覆盖Xa4的物理图谱构建第37-39页
   ·候选BAC克隆14E19的亚克隆文库构建与序列测定第39-43页
     ·测序亚克隆文库构建第39-40页
     ·Shotgun测序第40页
     ·序列完成图的获得第40-42页
     ·序列完成图的验证第42-43页
   ·序列分析第43-48页
     ·14E19序列概况第43页
     ·对14E19的基因预测第43页
     ·14E19序列中4个NBS-LRR同源序列在水稻基因组中的分布第43-46页
     ·14E19上分布的重复序列第46-48页
   ·遗传定位确定有功能的Xa4拷贝第48-50页
   ·mRNA分析第50-52页
   ·Xa4B表达载体的构建与遗传转化第52-53页
     ·Xa4B表达载体的构建第52-53页
     ·Xa4B的遗传转化第53页
   ·Xa4候选BAC克隆106P13的序列分析第53-56页
     ·106P13上含更多的NBS-LRR序列第53-54页
     ·106P13中的一个重复单位为90bp的重复序列第54-56页
   ·结论第56-57页
4 讨论第57-62页
   ·关于水稻基因组的结构第57-58页
   ·关于基因在转基因植物中不表达第58-59页
   ·关于植物抗病基因和NBS-LRR编码的基因之间的关系第59-61页
   ·关于后基因组时代的研究第61-62页
参考文献第62-71页
附录1 FgeneSH预测的Xa4B的氨基酸序列及结构第71-72页
附录2 FgeneSH预测的Xa4基因家族其它拷贝的氨基酸序列第72-76页
附录3 Fgenesh预测的部分NBS-LRR基因比较第76-80页
附录4 14E19全序列第80-102页
已发表及拟发表论文第102-103页
致谢第103页

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