| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| ·丝状真菌的表达系统 | 第10-14页 |
| ·转化的丝状真菌种类与选择标记 | 第10-12页 |
| ·真菌转化的方法 | 第12-14页 |
| ·RNA 干扰的研究现状及应用 | 第14-24页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第14-17页 |
| ·RNA 干扰的生物学意义及其应用 | 第17-22页 |
| ·RNA 干扰在真菌中的应用研究 | 第22-24页 |
| ·本课题来源、研究内容和意义 | 第24-26页 |
| ·课题来源 | 第24页 |
| ·研究内容 | 第24页 |
| ·研究意义 | 第24-26页 |
| 第二章 米曲霉转化系统的构建 | 第26-38页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第26-27页 |
| ·主要试剂及配方 | 第27-28页 |
| ·主要培养基配方 | 第28页 |
| ·菌种材料及质粒 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·PEG 介导的米曲霉 niaD300 原生质体的转化 | 第29-30页 |
| ·转化子的鉴定 | 第30-32页 |
| ·米曲霉的电击转化法 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-37页 |
| ·米曲霉 niaD300 原生质体转化 | 第33-36页 |
| ·米曲霉的电击转化 | 第36-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 RNA 干扰载体的构建 | 第38-51页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·主要试剂及配方 | 第38-39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·主要培养基 | 第39页 |
| ·主要菌种及质粒 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·pPTRI 基础质粒的改造 | 第40-44页 |
| ·米曲霉 RNA 干扰载体的构建 | 第44-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-50页 |
| ·pPTRI 基础质粒的改造 | 第47-48页 |
| ·米曲霉干扰载体的构建 | 第48-50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 米曲霉转录因子基因 hacA 和 creA 的 RNA 干扰研究 | 第51-66页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验材料与仪器 | 第51-53页 |
| ·主要试剂及配方 | 第51-52页 |
| ·实验仪器 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·RNA 干扰载体的米曲霉原生质体转化 | 第53页 |
| ·米曲霉 hacA 和 creA 的 RNAi 转化子的鉴定 | 第53-54页 |
| ·米曲霉转化子转录水平的检测 | 第54-56页 |
| ·米曲霉 creA 的 RNAi 转化子胞外蛋白提取及 SDS-PAGE 检测 | 第56-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-65页 |
| ·hacA 和 creA 的 RNA 干扰载体转化米曲霉 niaD300 | 第57-58页 |
| ·米曲霉 hacA 和 creA 的 RNAi 转化子的筛选 | 第58-59页 |
| ·米曲霉 hacA 和 creA 的 RNAi 转化子基因组 DNA 的提取与鉴定 | 第59-60页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第60-61页 |
| ·hacA 基因的 RNAi 转化子中靶基因相对表达量的检测 | 第61-62页 |
| ·creA 基因的 RNAi 转化子转录和翻译状况的检测 | 第62-65页 |
| ·creA 基因的 RNAi 转化子中靶基因相对表达量的检测 | 第62-64页 |
| ·转化子胞外蛋白 SDS-PAGE 检测 | 第64-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 附件 | 第77页 |
