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甘氨酸甜菜碱与分子伴侣DnaK对嗜盐四联球菌CICC10469嗜盐特性的影响

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-22页
   ·中度嗜盐菌第11-14页
     ·中度嗜盐菌的介绍第11页
     ·中度嗜盐菌的应用第11-14页
     ·嗜盐四联球菌第14页
   ·中度嗜盐菌嗜盐机制的研究第14-16页
     ·相容性溶质第14-15页
     ·分子伴侣第15-16页
     ·可溶性蛋白第16页
     ·嗜盐四联球菌嗜盐机制的研究现状第16页
   ·相容性溶质的鉴定方法第16-18页
     ·薄层层析法第16-17页
     ·高效液相色谱法第17页
     ·核磁共振第17-18页
   ·实时荧光定量RT-PCR检测基因的表达量第18-20页
     ·实时荧光定量PCR的原理第18页
     ·实时荧光定量PCR技术的类型及特点第18-20页
     ·实时荧光定量的定量方法第20页
     ·实时荧光定量RT-PCR的应用第20页
   ·、本论文的研究意义与主要内容第20-22页
第二章 嗜盐四联球菌CICC10469与乳酸乳球菌MG1363主要相容性溶质的鉴定第22-37页
   ·菌株和培养基第22页
     ·菌株第22页
     ·培养基第22页
   ·试剂和仪器第22-24页
     ·溶液的配制第22-23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器设备第23-24页
   ·实验方法第24-27页
     ·菌株的活化与扩大培养第24页
     ·菌株耐盐情况及生长曲线的测定第24-25页
     ·游离氨基酸和甜菜碱的提取第25页
     ·海藻糖的提取第25页
     ·四氢嘧啶的提取第25-26页
     ·薄层层析法(TLC)对提取物的初步分析第26页
     ·HPLC对粗筛后的提取物进一步分析第26-27页
     ·核磁共振测定第27页
   ·结果与讨论第27-36页
     ·菌株的耐盐性及生长情况第27-28页
     ·薄层层析(TLC)法对提取物的初步分析第28-30页
     ·HPLC对提取物分析的结果第30-33页
     ·核磁共振验证甜菜碱存在第33-36页
   ·小结第36-37页
第三章 嗜盐四联球菌CICC10469与乳酸乳球菌MG1363细胞中甘氨酸甜菜碱的积累与盐浓度的变化关系第37-44页
   ·菌株和培养基第37页
     ·菌株第37页
     ·培养基第37页
   ·试剂和仪器第37-39页
     ·溶液的配制第37-38页
     ·主要试剂第38-39页
     ·主要仪器设备第39页
   ·实验方法第39-40页
     ·菌株的活化及扩大培养第39-40页
     ·甘氨酸甜菜碱的提取第40页
     ·HPLC法测定甘氨酸甜菜碱的含量第40页
   ·结果和讨论第40-43页
     ·甘氨酸甜菜碱标准曲线的绘制第40-41页
     ·提取样品中甜菜碱含量的定量检测第41-43页
   ·小结第43-44页
第四章 RT-PCR检测dnak基因的转录水平与盐浓度变化的关系第44-60页
   ·菌株和试剂第44-47页
     ·菌株第44页
     ·培养基和试剂第44-45页
     ·试剂盒第45页
     ·主要试剂及仪器第45-47页
   ·方法第47-51页
     ·RT-PCR引物的设计第47-48页
     ·RNA提取方法第48页
     ·RNA浓度与纯度的检测第48-49页
     ·反转录反应(cDNA 的合成)第49页
     ·纯化后的 RNA 和 cDNA 质量的验证第49-50页
     ·RT-PCR第50-51页
   ·结果与讨论第51-59页
     ·RT-PCR引物的设计与合成第51页
     ·RNA的提取与检测第51-52页
     ·RNA的纯化(去除基因组DNA污染)与cDNA的合成第52-53页
     ·RT—PCR检测dnak基因在不同NaCl浓度下的相对表达量第53-59页
   ·小结第59-60页
第五章 不同浓度NaCl培养条件下菌株细胞内可溶性蛋白含量的变化第60-65页
   ·材料第60页
     ·菌株第60页
     ·培养基第60页
   ·主要试剂及仪器第60-61页
   ·方法第61-62页
     ·不同NaCl浓度下细菌的培养第61页
     ·菌体可溶性蛋白的提取第61页
     ·可溶性蛋白含量标准曲线的制作第61-62页
     ·可溶性蛋白的定量检测第62页
   ·结果与讨论第62-64页
     ·可溶性蛋白含量标准曲线第62页
     ·可溶性蛋白的定量检测第62-64页
   ·小结第64-65页
结论与展望第65-67页
 一、结论第65-66页
 二、创新点第66页
 三、展望第66-67页
参考文献第67-72页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第72-73页
致谢第73-74页
附件第74页

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