摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
·中度嗜盐菌 | 第11-14页 |
·中度嗜盐菌的介绍 | 第11页 |
·中度嗜盐菌的应用 | 第11-14页 |
·嗜盐四联球菌 | 第14页 |
·中度嗜盐菌嗜盐机制的研究 | 第14-16页 |
·相容性溶质 | 第14-15页 |
·分子伴侣 | 第15-16页 |
·可溶性蛋白 | 第16页 |
·嗜盐四联球菌嗜盐机制的研究现状 | 第16页 |
·相容性溶质的鉴定方法 | 第16-18页 |
·薄层层析法 | 第16-17页 |
·高效液相色谱法 | 第17页 |
·核磁共振 | 第17-18页 |
·实时荧光定量RT-PCR检测基因的表达量 | 第18-20页 |
·实时荧光定量PCR的原理 | 第18页 |
·实时荧光定量PCR技术的类型及特点 | 第18-20页 |
·实时荧光定量的定量方法 | 第20页 |
·实时荧光定量RT-PCR的应用 | 第20页 |
·、本论文的研究意义与主要内容 | 第20-22页 |
第二章 嗜盐四联球菌CICC10469与乳酸乳球菌MG1363主要相容性溶质的鉴定 | 第22-37页 |
·菌株和培养基 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·试剂和仪器 | 第22-24页 |
·溶液的配制 | 第22-23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-27页 |
·菌株的活化与扩大培养 | 第24页 |
·菌株耐盐情况及生长曲线的测定 | 第24-25页 |
·游离氨基酸和甜菜碱的提取 | 第25页 |
·海藻糖的提取 | 第25页 |
·四氢嘧啶的提取 | 第25-26页 |
·薄层层析法(TLC)对提取物的初步分析 | 第26页 |
·HPLC对粗筛后的提取物进一步分析 | 第26-27页 |
·核磁共振测定 | 第27页 |
·结果与讨论 | 第27-36页 |
·菌株的耐盐性及生长情况 | 第27-28页 |
·薄层层析(TLC)法对提取物的初步分析 | 第28-30页 |
·HPLC对提取物分析的结果 | 第30-33页 |
·核磁共振验证甜菜碱存在 | 第33-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第三章 嗜盐四联球菌CICC10469与乳酸乳球菌MG1363细胞中甘氨酸甜菜碱的积累与盐浓度的变化关系 | 第37-44页 |
·菌株和培养基 | 第37页 |
·菌株 | 第37页 |
·培养基 | 第37页 |
·试剂和仪器 | 第37-39页 |
·溶液的配制 | 第37-38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·主要仪器设备 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-40页 |
·菌株的活化及扩大培养 | 第39-40页 |
·甘氨酸甜菜碱的提取 | 第40页 |
·HPLC法测定甘氨酸甜菜碱的含量 | 第40页 |
·结果和讨论 | 第40-43页 |
·甘氨酸甜菜碱标准曲线的绘制 | 第40-41页 |
·提取样品中甜菜碱含量的定量检测 | 第41-43页 |
·小结 | 第43-44页 |
第四章 RT-PCR检测dnak基因的转录水平与盐浓度变化的关系 | 第44-60页 |
·菌株和试剂 | 第44-47页 |
·菌株 | 第44页 |
·培养基和试剂 | 第44-45页 |
·试剂盒 | 第45页 |
·主要试剂及仪器 | 第45-47页 |
·方法 | 第47-51页 |
·RT-PCR引物的设计 | 第47-48页 |
·RNA提取方法 | 第48页 |
·RNA浓度与纯度的检测 | 第48-49页 |
·反转录反应(cDNA 的合成) | 第49页 |
·纯化后的 RNA 和 cDNA 质量的验证 | 第49-50页 |
·RT-PCR | 第50-51页 |
·结果与讨论 | 第51-59页 |
·RT-PCR引物的设计与合成 | 第51页 |
·RNA的提取与检测 | 第51-52页 |
·RNA的纯化(去除基因组DNA污染)与cDNA的合成 | 第52-53页 |
·RT—PCR检测dnak基因在不同NaCl浓度下的相对表达量 | 第53-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第五章 不同浓度NaCl培养条件下菌株细胞内可溶性蛋白含量的变化 | 第60-65页 |
·材料 | 第60页 |
·菌株 | 第60页 |
·培养基 | 第60页 |
·主要试剂及仪器 | 第60-61页 |
·方法 | 第61-62页 |
·不同NaCl浓度下细菌的培养 | 第61页 |
·菌体可溶性蛋白的提取 | 第61页 |
·可溶性蛋白含量标准曲线的制作 | 第61-62页 |
·可溶性蛋白的定量检测 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-64页 |
·可溶性蛋白含量标准曲线 | 第62页 |
·可溶性蛋白的定量检测 | 第62-64页 |
·小结 | 第64-65页 |
结论与展望 | 第65-67页 |
一、结论 | 第65-66页 |
二、创新点 | 第66页 |
三、展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
附件 | 第74页 |