| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 引言 | 第11-14页 |
| 第一部分 可溶性DR5 胞外段分子的表达纯化及鉴定 | 第14-28页 |
| 1 材料 | 第14-17页 |
| ·菌种来源 | 第14页 |
| ·载体，抗体 | 第14页 |
| ·试剂 | 第14-15页 |
| ·主要溶液 | 第15-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-24页 |
| ·分子生物学操作 | 第17-19页 |
| ·重组DR5 的表达及制备 | 第19-20页 |
| ·重组DR5 的鉴定 | 第20-24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| ·重组表达质粒PET30A/SDR5 酶切鉴定 | 第24页 |
| ·重组质粒的测序结果 | 第24-25页 |
| ·诱导表达 | 第25-26页 |
| ·重组DR5 蛋白的鉴定 | 第26-27页 |
| 小结 | 第27-28页 |
| 第二部分 抗人DR5 单克隆抗体的制备及功能鉴定 | 第28-47页 |
| 1 材料 | 第28-31页 |
| ·细胞，载体 | 第28页 |
| ·细胞培养液 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第29-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-37页 |
| ·细胞培养 | 第31页 |
| ·重组人DR5 胞外段蛋白的制备见论文的第一部分 | 第31页 |
| ·抗DR5 单克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
| ·双向免疫扩散法鉴定单抗的亚类 | 第33-34页 |
| ·免疫印迹法分析WD1 的结合位置 | 第34-35页 |
| ·流式细胞术(FCM)鉴定单抗的细胞反应谱系的特异性 | 第35页 |
| ·MTT 法检测单抗对细胞的生长抑制作用 | 第35-36页 |
| ·PI/ANNEXINⅤ染色流式细胞仪分析JURKAT 细胞凋亡 | 第36页 |
| ·吉姆萨染色 | 第36页 |
| ·瞬时转染及间接免疫荧光分析单抗的交叉反应 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| ·抗DR5-MAB 的获得 | 第37页 |
| ·WD1 的亚型 | 第37-38页 |
| ·ELISA 分析单抗与重组DR5 的结合能力 | 第38-39页 |
| ·免疫印迹法分析WD1 的结合位置 | 第39页 |
| ·流式细胞术鉴定单抗的细胞反应谱系的特异性 | 第39-40页 |
| ·瞬时转染及间接免疫荧光分析单抗的交叉反应性 | 第40-41页 |
| ·MTT 法检测单抗对靶细胞的生长抑制作用 | 第41-43页 |
| ·PI/ANNEXINⅤ染色流式细胞仪分析JURKAT 细胞凋亡 | 第43页 |
| ·吉姆萨染色观察细胞形态的变化 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 5 小结 | 第46-47页 |
| 第三部分 抗人DR5 单抗诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究 | 第47-60页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| ·菌种细胞来源 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-54页 |
| ·细胞培养 | 第48-49页 |
| ·分子生物学实验 | 第49-53页 |
| ·免疫沉淀法分析DISC 复合物的形成 | 第53-54页 |
| 3 结果 | 第54-57页 |
| ·RNA 纯度分析及含量测定 | 第54-55页 |
| ·人DR5 分子全长及胞内段CDNA 扩增 | 第55页 |
| ·人 DR5 分子胞内段 CDNA 的序列测定 | 第55-56页 |
| ·免疫沉淀法分析 DISC 复合物的形成 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 5 小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 英文缩略语词表 | 第62-64页 |
| 综述 | 第64-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 附录 | 第80页 |
