摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
引言 | 第9-12页 |
第一部分 异种抗原NEU-FC 联合HGM-CSF 和BCG 的免疫调节效应 | 第12-31页 |
1 前言 | 第12页 |
2 材料 | 第12-17页 |
·主要试剂 | 第12-13页 |
·主要溶液的配制 | 第13-17页 |
·主要仪器设备 | 第17页 |
3 方法 | 第17-24页 |
·细胞培养 | 第17-18页 |
·PBMC 的分离与培养 | 第18-19页 |
·NEU-FC 的构建、表达及纯化 | 第19页 |
·NEU-FC 的鉴定 | 第19-22页 |
·SDS-PAGE 测定Neu-Fc 的分子量 | 第19-20页 |
·Western Blot 鉴定 | 第20-22页 |
·细胞增殖活性测定(MTT) | 第22页 |
·细胞因子检测(ELISA) | 第22-24页 |
·统计学分析 | 第24页 |
4 结果 | 第24-27页 |
·MCF-7 细胞上清抑制PBMC 分泌IL-12 及刺激PBMC 分泌IL-10 | 第24-25页 |
·GM-CSF 和BCG 对PBMC 的刺激作用 | 第25页 |
·NEU-FC 的表达、纯化及促增殖作用分析 | 第25-26页 |
·NEU-FC、GM-CSF、BCG 联合作用对细胞因子分泌的影响 | 第26-27页 |
5 讨论 | 第27-28页 |
6 参考文献 | 第28-31页 |
第二部分 NEU-FC 联合IFN-Γ和BCG 的协同抗肿瘤作用 | 第31-58页 |
1 前言 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-40页 |
·细胞培养 | 第32页 |
·NEU-FC 的构建以及表达、纯化和鉴定 | 第32-33页 |
·PBMC 和单核细胞的分离 | 第33页 |
·流式细胞分析 | 第33-34页 |
·细胞增殖实验( MTT ) | 第34页 |
·细胞因子分析 | 第34-35页 |
·杀伤实验(LDH 法) | 第35-37页 |
·效应细胞的处理 | 第35-36页 |
·靶细胞的处理 | 第36页 |
·效靶作用 | 第36-37页 |
·稳定细胞株的构建 | 第37-38页 |
·动物实验 | 第38-39页 |
·第一批动物实验 | 第38-39页 |
·第二批动物实验 | 第39页 |
·统计学分析 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-51页 |
·MCF-7 上清抑制PBMC 分泌IL-12 及刺激PBMC 分泌IL-10 | 第40页 |
·NEU-FC 和IFN-Γ可逆转肿瘤细胞对免疫细胞的影响 | 第40-41页 |
·BCG 能够显著提高TH1 类反应 | 第41-43页 |
·NEU-FC 和BCG、IFN-Γ联合诱导逆转单核细胞表型变化 | 第43-44页 |
·IFN-Γ上调T47D,、MCF-7 和MCF-7 | 第44-45页 |
·T47D、MCF-7 和MCF-7/HER2 细胞表面HER2 表达水平不同 | 第45页 |
·NEU-FC, IFN-Γ和BCG 诱导的特异性抗肿瘤应答 | 第45-47页 |
·EMT6/HER2 细胞株的建立 | 第47页 |
·NEU-FC、IFN-Γ和BCG 联合应用可抑制肿瘤细胞的体内生长 | 第47-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
5 参考文献 | 第53-58页 |
第三部分 小结 | 第58-59页 |
第四部分 文献综述 | 第59-68页 |
参考文献 | 第65-68页 |
主要缩略语 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
附录 | 第72页 |