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异种抗原neu-Fc联合GM-CSF/IFN-γ和BCG的抗肿瘤免疫效应

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
引言第9-12页
第一部分 异种抗原NEU-FC 联合HGM-CSF 和BCG 的免疫调节效应第12-31页
 1 前言第12页
 2 材料第12-17页
   ·主要试剂第12-13页
   ·主要溶液的配制第13-17页
   ·主要仪器设备第17页
 3 方法第17-24页
   ·细胞培养第17-18页
   ·PBMC 的分离与培养第18-19页
   ·NEU-FC 的构建、表达及纯化第19页
   ·NEU-FC 的鉴定第19-22页
     ·SDS-PAGE 测定Neu-Fc 的分子量第19-20页
     ·Western Blot 鉴定第20-22页
   ·细胞增殖活性测定(MTT)第22页
   ·细胞因子检测(ELISA)第22-24页
   ·统计学分析第24页
 4 结果第24-27页
   ·MCF-7 细胞上清抑制PBMC 分泌IL-12 及刺激PBMC 分泌IL-10第24-25页
   ·GM-CSF 和BCG 对PBMC 的刺激作用第25页
   ·NEU-FC 的表达、纯化及促增殖作用分析第25-26页
   ·NEU-FC、GM-CSF、BCG 联合作用对细胞因子分泌的影响第26-27页
 5 讨论第27-28页
 6 参考文献第28-31页
第二部分 NEU-FC 联合IFN-Γ和BCG 的协同抗肿瘤作用第31-58页
 1 前言第31-32页
 2 材料与方法第32-40页
   ·细胞培养第32页
   ·NEU-FC 的构建以及表达、纯化和鉴定第32-33页
   ·PBMC 和单核细胞的分离第33页
   ·流式细胞分析第33-34页
   ·细胞增殖实验( MTT )第34页
   ·细胞因子分析第34-35页
   ·杀伤实验(LDH 法)第35-37页
     ·效应细胞的处理第35-36页
     ·靶细胞的处理第36页
     ·效靶作用第36-37页
   ·稳定细胞株的构建第37-38页
   ·动物实验第38-39页
     ·第一批动物实验第38-39页
     ·第二批动物实验第39页
   ·统计学分析第39-40页
 3 结果第40-51页
   ·MCF-7 上清抑制PBMC 分泌IL-12 及刺激PBMC 分泌IL-10第40页
   ·NEU-FC 和IFN-Γ可逆转肿瘤细胞对免疫细胞的影响第40-41页
   ·BCG 能够显著提高TH1 类反应第41-43页
   ·NEU-FC 和BCG、IFN-Γ联合诱导逆转单核细胞表型变化第43-44页
   ·IFN-Γ上调T47D,、MCF-7 和MCF-7第44-45页
   ·T47D、MCF-7 和MCF-7/HER2 细胞表面HER2 表达水平不同第45页
   ·NEU-FC, IFN-Γ和BCG 诱导的特异性抗肿瘤应答第45-47页
   ·EMT6/HER2 细胞株的建立第47页
   ·NEU-FC、IFN-Γ和BCG 联合应用可抑制肿瘤细胞的体内生长第47-51页
 4 讨论第51-53页
 5 参考文献第53-58页
第三部分 小结第58-59页
第四部分 文献综述第59-68页
 参考文献第65-68页
主要缩略语第68-70页
致谢第70-72页
附录第72页

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