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蜜蜂、家蚕ADAR基因克隆和在毕赤酵母中表达研究及昆虫钠离子通道基因克隆、选择性剪切及RNA编辑分析

致谢第1-6页
中英文摘要第6-11页
 中文摘要第6-8页
 ABSTRACT第8-11页
缩略语第11-14页
第一章 引言第14-22页
   ·RNA编辑方式第14-18页
     ·锥虫线粒体RNA多个U的添加和去除第15-16页
     ·C至U RNA编辑第16-18页
     ·高等生物中的A至IRNA编辑第18页
   ·ADAR编辑酶研究进展第18-19页
   ·选择性剪接方式第19-20页
   ·钠离子通道研究进展第20-22页
     ·哺乳动物钠离子通道结构第20-21页
     ·昆虫钠离子通道研究现状第21-22页
第二章 实验方案设计第22-26页
   ·实验目的和意义第22-23页
   ·研究内容第23-24页
     ·蜜蜂、家蚕腺嘌呤脱氨酶的克隆及蜜蜂ADAR毕赤酵母表达研究第23页
       ·AmADAR、BmADAR的预测与克隆第23页
       ·AmADAR、BmADAR选择性剪切及发育阶段表达差异研究第23页
       ·AmADAR在毕赤酵母中的表达第23页
     ·昆虫钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑研究第23-24页
       ·家蚕、蜜蜂、赤拟谷盗、果蝇钠离子通道基因预测与克隆第23页
       ·RNA编辑及选择性剪切的研究第23-24页
   ·技术路线与实验方案第24-26页
第三章 蜜蜂、家蚕ADAR基因克隆及在毕赤酵母中表达研究第26-51页
   ·材料与试剂第26-30页
   ·实验方法第30-41页
     ·目的基因的选择第30页
     ·引物的设计与合成第30-31页
     ·蜜蜂、家蚕基因组DNA的提取第31页
     ·提取蜜蜂、家蚕四个发育阶段的总RNA第31-32页
     ·第一链cDNA的合成第32-33页
     ·cDNA为模板进行PCR扩增第33页
     ·PCR产物的回收第33-34页
     ·PCR产物割胶回收第34页
     ·PCR产物直接测序第34页
     ·cDNA扩增产物的T载体连接反应第34-35页
     ·E.coli TG1感受态细胞的制备第35页
     ·连接产物转化感受态细胞第35页
     ·抽提质粒DNA第35页
     ·重组质粒酶切鉴定第35-36页
     ·重组质粒的PCR鉴定第36页
     ·重组质粒插入片段序列测序第36页
     ·阳性克隆载体电转化到毕赤酵母中第36-37页
     ·阳性酵母菌落的筛选与鉴定第37-38页
     ·阳性菌落的诱导表达第38页
     ·表达产物的SDS-PAGE凝胶检测第38页
     ·Western-blot检测表达的蛋白第38-39页
     ·酵母表达产物AmADAR纯化第39-41页
   ·结果与分析第41-50页
     ·AmADAR和BmADAR基因的克隆及序列分析第41-44页
     ·AmADAR基因选择性剪切分析第44-46页
     ·AmADAR和BmADAR基因发育阶段表达差异研究第46-47页
     ·AmADAR酵母表达SDS-PAGE分析第47-50页
   ·讨论第50-51页
第四章 昆虫钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑研究第51-66页
   ·材料与方法第51-56页
     ·实验材料和方法第51页
     ·引物的设计与合成第51-56页
   ·结果与分析第56-65页
     ·昆虫钠离子通道基因的克隆及序列分析第56-62页
     ·昆虫钠离子通道基因的选择性剪切分析第62-63页
     ·昆虫钠离子通道基因RNA编辑分析第63-65页
   ·讨论第65-66页
参考文献第66-71页
攻读硕士学位期间参与发表的学术论文第71页
个人简历第71页

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