致谢 | 第1-6页 |
中英文摘要 | 第6-11页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
缩略语 | 第11-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
·RNA编辑方式 | 第14-18页 |
·锥虫线粒体RNA多个U的添加和去除 | 第15-16页 |
·C至U RNA编辑 | 第16-18页 |
·高等生物中的A至IRNA编辑 | 第18页 |
·ADAR编辑酶研究进展 | 第18-19页 |
·选择性剪接方式 | 第19-20页 |
·钠离子通道研究进展 | 第20-22页 |
·哺乳动物钠离子通道结构 | 第20-21页 |
·昆虫钠离子通道研究现状 | 第21-22页 |
第二章 实验方案设计 | 第22-26页 |
·实验目的和意义 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第23-24页 |
·蜜蜂、家蚕腺嘌呤脱氨酶的克隆及蜜蜂ADAR毕赤酵母表达研究 | 第23页 |
·AmADAR、BmADAR的预测与克隆 | 第23页 |
·AmADAR、BmADAR选择性剪切及发育阶段表达差异研究 | 第23页 |
·AmADAR在毕赤酵母中的表达 | 第23页 |
·昆虫钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑研究 | 第23-24页 |
·家蚕、蜜蜂、赤拟谷盗、果蝇钠离子通道基因预测与克隆 | 第23页 |
·RNA编辑及选择性剪切的研究 | 第23-24页 |
·技术路线与实验方案 | 第24-26页 |
第三章 蜜蜂、家蚕ADAR基因克隆及在毕赤酵母中表达研究 | 第26-51页 |
·材料与试剂 | 第26-30页 |
·实验方法 | 第30-41页 |
·目的基因的选择 | 第30页 |
·引物的设计与合成 | 第30-31页 |
·蜜蜂、家蚕基因组DNA的提取 | 第31页 |
·提取蜜蜂、家蚕四个发育阶段的总RNA | 第31-32页 |
·第一链cDNA的合成 | 第32-33页 |
·cDNA为模板进行PCR扩增 | 第33页 |
·PCR产物的回收 | 第33-34页 |
·PCR产物割胶回收 | 第34页 |
·PCR产物直接测序 | 第34页 |
·cDNA扩增产物的T载体连接反应 | 第34-35页 |
·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第35页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第35页 |
·抽提质粒DNA | 第35页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第35-36页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第36页 |
·重组质粒插入片段序列测序 | 第36页 |
·阳性克隆载体电转化到毕赤酵母中 | 第36-37页 |
·阳性酵母菌落的筛选与鉴定 | 第37-38页 |
·阳性菌落的诱导表达 | 第38页 |
·表达产物的SDS-PAGE凝胶检测 | 第38页 |
·Western-blot检测表达的蛋白 | 第38-39页 |
·酵母表达产物AmADAR纯化 | 第39-41页 |
·结果与分析 | 第41-50页 |
·AmADAR和BmADAR基因的克隆及序列分析 | 第41-44页 |
·AmADAR基因选择性剪切分析 | 第44-46页 |
·AmADAR和BmADAR基因发育阶段表达差异研究 | 第46-47页 |
·AmADAR酵母表达SDS-PAGE分析 | 第47-50页 |
·讨论 | 第50-51页 |
第四章 昆虫钠离子通道基因选择性剪切和RNA编辑研究 | 第51-66页 |
·材料与方法 | 第51-56页 |
·实验材料和方法 | 第51页 |
·引物的设计与合成 | 第51-56页 |
·结果与分析 | 第56-65页 |
·昆虫钠离子通道基因的克隆及序列分析 | 第56-62页 |
·昆虫钠离子通道基因的选择性剪切分析 | 第62-63页 |
·昆虫钠离子通道基因RNA编辑分析 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
攻读硕士学位期间参与发表的学术论文 | 第71页 |
个人简历 | 第71页 |