| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-34页 |
| 1.脂肪氧化酶的生理生化与分子生物学研究进展 | 第14-19页 |
| ·脂肪氧化酶的基础生理生化研究与分子生物学研究 | 第14-16页 |
| ·大豆脂肪氧化酶分析鉴定技术 | 第16-19页 |
| 2.植物RNA干扰作用的研究进展 | 第19-27页 |
| ·RNA干扰的研究简史 | 第19-20页 |
| ·植物中由dsRNA介导的基因沉默作用机制及特点 | 第20-23页 |
| ·植物中RNA干扰的特点 | 第23-24页 |
| ·植物中RNA干扰的诱导方法及比较 | 第24页 |
| ·植物RNA干扰载体 | 第24页 |
| ·RNA干扰在植物中的应用 | 第24-27页 |
| ·RNA干扰技术的展望 | 第27页 |
| 3.重组PCR技术与植物RNA干扰载体的构建 | 第27-29页 |
| ·重组PCR原理 | 第27-28页 |
| ·应用重组PCR技术构建植物RNA干扰载体 | 第28-29页 |
| 4.大豆遗传转化的技术 | 第29-32页 |
| ·农杆菌介导法 | 第29-30页 |
| ·基因枪法 | 第30-31页 |
| ·花粉管通道法 | 第31页 |
| ·电激法 | 第31-32页 |
| ·超声波辅助农杆菌转化法 | 第32页 |
| ·显微注射法 | 第32页 |
| ·聚乙二醇法 | 第32页 |
| 5.本项目研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 6.创新点 | 第33-34页 |
| 第二篇 研究内容 | 第34-76页 |
| 第一章 大豆脂肪氧化酶基因的克隆和高效植物表达载体的构建 | 第34-49页 |
| 1.材料与方法 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-43页 |
| 2.结果与分析 | 第43-47页 |
| ·大豆脂肪氧化酶基因片段及内含子片段的PCR扩增 | 第44页 |
| ·大豆脂肪氧化酶基因片段的克隆和序列测定 | 第44-45页 |
| ·大豆脂肪氧化酶基因hpRNA干扰表达载体及ihpRNA干扰表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.讨论与结论 | 第47-49页 |
| 第二章 重组PCR技术与植物RNA干扰构件的构建 | 第49-56页 |
| 1.实验原理 | 第49-50页 |
| 2.材料与方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·重组PCR引物设计 | 第50-51页 |
| ·模板制备 | 第51页 |
| ·PCR反应体系及扩增程序 | 第51-52页 |
| 3.结果与分析 | 第52-54页 |
| ·大豆脂肪氧化酶基因和玉米淀粉分支酶基因第一轮及第二轮PCR电泳结果 | 第52-53页 |
| ·pMD18-T-S和pMD18-T-M结构及酶切检测鉴定结果 | 第53-54页 |
| 4.讨论 | 第54-55页 |
| 5.结论 | 第55-56页 |
| 第三章 大豆脂肪氧化酶基因RNA干扰载体的遗传转化及结果分析 | 第56-76页 |
| 1.大豆大豆脂肪氧化酶基因RNA干扰载体的遗传转化 | 第56页 |
| ·材料与方法 | 第56页 |
| 2.转基因植株的检测 | 第56-63页 |
| ·材料与方法 | 第56-63页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-63页 |
| ·PCR检测 | 第56-57页 |
| ·转基因植株的Southern杂交 | 第57-60页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第60页 |
| ·转基因植株的脂肪氧化酶活性的检测 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的脂肪氧化酶SDS电泳检测 | 第61-62页 |
| ·转基因植株蛋白质含量测定 | 第62-63页 |
| ·转基因植株脂肪含量测定 | 第63页 |
| ·转基因植株的农艺性状鉴定 | 第63页 |
| ·转基因植株后代的遗传分析 | 第63页 |
| 3.结果与分析 | 第63-72页 |
| ·PCR检测 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的Southern杂交 | 第64-65页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第65-66页 |
| ·大豆脂肪氧化酶活性的检测 | 第66-67页 |
| ·转基因植株的SDS电泳检测 | 第67-68页 |
| ·转基因植株蛋白质及脂肪含量测定 | 第68-70页 |
| ·转基因植株的农艺性状鉴定 | 第70-71页 |
| ·转基因植株后代的遗传分析 | 第71-72页 |
| 4.讨论 | 第72-74页 |
| 5.结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 附录1 英文缩略词表 | 第86-88页 |
| 附录2 常用缓冲溶液及培养基的配制 | 第88-92页 |
| 附录3 博士期间的主要研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
