| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-37页 |
| 1 植物的抗逆机制 | 第13-18页 |
| ·离子平衡与渗透调节 | 第13-14页 |
| ·抗氧化防御系统 | 第14页 |
| ·胁迫相关蛋白和多胺 | 第14-16页 |
| ·LEA蛋白 | 第14-15页 |
| ·水通道蛋白 | 第15页 |
| ·热激蛋白 | 第15页 |
| ·抗冻蛋白 | 第15-16页 |
| ·多胺 | 第16页 |
| ·信号转导与转录因子调控 | 第16-18页 |
| 2 植物抗逆基因工程 | 第18-24页 |
| ·植物抗逆基因工程目的基因的选择 | 第18-22页 |
| ·渗透调节物质合成关键酶基因 | 第18-20页 |
| ·脯氨酸合成酶基因 | 第19页 |
| ·甜菜碱合成酶基因 | 第19-20页 |
| ·多羟基醇和糖合成酶基因 | 第20页 |
| ·活性氧清除酶类基因 | 第20-21页 |
| ·胁迫诱导蛋白基因 | 第21-22页 |
| ·Lea蛋白基因 | 第21页 |
| ·Hsps基因 | 第21-22页 |
| ·afp基因 | 第22页 |
| ·信号转导相关基因 | 第22页 |
| ·植物抗逆基因工程启动子的选择 | 第22-24页 |
| ·hsp启动子 | 第23页 |
| ·rd29启动子 | 第23页 |
| ·adhl启动子 | 第23-24页 |
| ·ABRE | 第24页 |
| ·LTRE | 第24页 |
| 3 逆境相关转录因子及其与植物的抗逆性 | 第24-31页 |
| ·MYB类转录因子 | 第25-26页 |
| ·bZIP类转录因子 | 第26页 |
| ·WRKY类转录因子 | 第26-27页 |
| ·NAC类转录因子 | 第27-28页 |
| ·AP2/EREBP类转录因子 | 第28-31页 |
| 4 玉米抗旱基因工程研究进展 | 第31-35页 |
| ·玉米遗传转化技术的现状 | 第31-34页 |
| ·农杆菌介导法 | 第31-32页 |
| ·电击法 | 第32页 |
| ·花粉管通道法 | 第32-33页 |
| ·子房注射法 | 第33页 |
| ·基因枪法 | 第33-34页 |
| ·玉米抗旱基因工程研究进展 | 第34-35页 |
| 5 本实验的目的、意义和技术路线 | 第35-37页 |
| ·本实验的目的、意义 | 第35-36页 |
| ·本实验的技术路线 | 第36-37页 |
| 第二章 常用溶液配制及基本实验方法 | 第37-43页 |
| ·常用溶液及缓冲液的配制(分子克隆实验指南第二版,1996) | 第37-38页 |
| ·常用培养基的配制 | 第37页 |
| ·常用溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第38页 |
| ·基本方法 | 第38-43页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第39页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第39-41页 |
| ·玉米总DNA的提取 | 第41-42页 |
| ·大量提取方法(CTAB改良法) | 第41页 |
| ·小量提取方法 | 第41-42页 |
| ·DNA的纯度和浓度的检测 | 第42-43页 |
| 第三章 CBF4基因诱导型表达载体的构建 | 第43-51页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-45页 |
| ·rd29A启动子的PCR扩增 | 第44页 |
| ·CBF4基因的PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·基因的测序 | 第45页 |
| ·表达载体的构建 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·rd29A启动子的PCR克隆 | 第45-46页 |
| ·CBF4基因的PCR克隆 | 第46页 |
| ·CBF4基因诱导表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 转基因玉米植株的获得 | 第51-55页 |
| ·基因枪法 | 第51-54页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·各类筛选培养基的配制 | 第51页 |
| ·基因枪转化(卢东长城,2008) | 第51-53页 |
| ·转化载体的制备及纯化 | 第51页 |
| ·金粉制备 | 第51-52页 |
| ·微粒子弹的准备 | 第52页 |
| ·基因枪的轰击 | 第52-53页 |
| ·转化愈伤组织的筛选和植株的再生 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-54页 |
| ·花粉管通道法 | 第54页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54页 |
| ·结果 | 第54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 第五章 转基因玉米植株的分子生物学检测 | 第55-65页 |
| ·材料与方法 | 第55-59页 |
| ·材料与仪器设备 | 第55-56页 |
| ·植物材料 | 第55页 |
| ·试剂制备 | 第55-56页 |
| ·实验仪器设备 | 第56页 |
| ·用于分子生物学鉴定的PCR引物 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·转基因玉米植株的PCR鉴定 | 第56-57页 |
| ·转基因玉米的PCR-Southern验证 | 第57-58页 |
| ·转基因玉米的Southern验证 | 第58-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-62页 |
| ·T_0代转基因植株的DNA小量提取(CTAB法) | 第59页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR结果 | 第59-60页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR结果 | 第60页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR-Southern结果 | 第60-61页 |
| ·T_1代转基因植株的Southern结果 | 第61-62页 |
| ·T_1代转基因植株DNA大量提取 | 第61页 |
| ·T_1代转基因植株酶切电泳 | 第61-62页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交结果 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| 第六章 转基因玉米植株的抗旱生理学检测及草甘膦抗性预实验 | 第65-75页 |
| ·转基因玉米植株的抗旱生理学检测 | 第65-69页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·干旱处理的相关生理指标的测定方法 | 第65-67页 |
| ·叶片相对含水量的测定 | 第66页 |
| ·叶片叶绿素含量的测定 | 第66页 |
| ·叶片游离脯氨酸含量的测定 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-69页 |
| ·转基因玉米植株叶片相对含水量测定结果 | 第67-68页 |
| ·转基因玉米植株叶片脯氨酸含量测定结果 | 第68页 |
| ·转基因玉米植株叶片叶绿素含量测定结果 | 第68-69页 |
| ·玉米草甘膦抗性预实验 | 第69-72页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·方法 | 第69页 |
| ·结果分析 | 第69-72页 |
| ·玉米发芽后两叶期不同浓度草甘膦处理结果 | 第69-70页 |
| ·玉米发芽期不同浓度草甘膦处理结果 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 第七章 结论和下一步工作设想 | 第75-77页 |
| ·结论 | 第75页 |
| ·下一步工作设想 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 作者简介 | 第89页 |
