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利用RNAi技术抑制籽粒PPO合成以改良小麦面粉白度的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 文献综述第9-27页
   ·小麦基因转导方法第9-12页
     ·基因枪法第10页
     ·农杆菌介导法第10-11页
     ·花粉管通道法第11-12页
     ·浸种法第12页
     ·其他方法第12页
   ·小麦品质改良的方向第12-19页
     ·改变磨粉品质第13-14页
     ·改良小麦加工品质第14-16页
     ·改良小麦营养品质第16-17页
     ·改良小麦淀粉品质第17-18页
     ·降低籽粒PPO活性,改良小麦面粉白度第18-19页
   ·小麦多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)第19-22页
     ·多酚氧化酶的种类第19页
     ·PPO在小麦体内的分布和变化第19页
     ·小麦PPO遗传及分子生物学研究第19-20页
     ·小麦籽粒PPO提取与活性测定第20-21页
     ·小麦籽粒PPO对品质的影响第21-22页
   ·RNAi技术第22-24页
     ·RNAi机制原理第22-23页
     ·RNA介导的基因沉默在植物基因工程中的应用第23-24页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第24-27页
     ·目的和意义第24-25页
     ·技术路线第25-27页
第二章 ppo基因克隆及高效RNAi载体构建第27-35页
   ·材料第27-28页
     ·基本材料第27-28页
     ·常用培养基第28页
     ·常用溶液第28页
   ·方法第28-30页
     ·载体构建基本方法第28-29页
     ·籽粒PPO编码基因的RNAi载体的构建第29-30页
   ·结果与分析第30-35页
第三章 小麦转基因植株的获得第35-41页
   ·材料和方法第35-38页
   ·结果与分析第38-39页
   ·讨论第39-41页
第四章 转基因植株的检测及筛选第41-64页
   ·材料与方法第41-51页
     ·材料与仪器设备第41页
     ·实验方法第41-51页
   ·结果与分析第51-64页
     ·转基因植株总DNA的提取第51页
     ·T_0和T_1代转基因植株的PCR检测第51-53页
     ·转基因植株的Southern杂交检测第53-54页
     ·T_1代转基因植株的PCR检测第54-55页
     ·T_1代转基因植株的半定量RT-PCR(Semi-Quantitative RT-PCR)检测第55-58页
     ·T_1代转基因植株的Northern杂交检测第58-60页
     ·PPO同工酶的非变性不连续PAGE第60页
     ·籽粒PPO同工酶的活性测定第60-64页
第五章 讨论第64-67页
   ·转基因植株分子检测第64-65页
     ·转基因植株在DNA水平上的分子检测第64页
     ·转基因植株在RNA水平上的分子检测第64-65页
     ·转基因植株在蛋白水平上的分子检测第65页
   ·RNAi技术第65-67页
第六章 结论第67-69页
参考文献第69-75页
致谢第75-77页
作者简介第77页

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