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Amycolatosis CGMCC No1149 P450酶对洛伐他汀羟基化的影响及P450酶基因部分克隆

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·HMG-CoA 还原酶抑制剂的作用机理第8-9页
   ·HMG-CoA 还原酶抑制剂研究进展第9-10页
   ·HMG-CoA 还原酶抑制剂的基本结构与分类第10-11页
   ·微生物对他汀类物质的转化第11-12页
     ·微生物对美伐他汀的转化第11页
     ·微生物对辛伐他汀的转化第11-12页
     ·微生物对洛伐他汀的转化第12页
   ·细胞色素P450第12-14页
     ·细胞色素P450 酶系简介第12-13页
     ·细胞色素P450 酶系的结构与功能第13页
     ·细胞色素P450 催化的反应类型第13页
     ·细胞色素P450 的催化循环机制第13-14页
     ·细胞色素P450 酶系的应用第14页
   ·本研究的立题背景和内容第14-16页
     ·立题背景第14-15页
     ·本论文的研究目的和内容第15-16页
第二章 材料与方法第16-21页
   ·材料第16-17页
     ·菌种和质粒第16页
     ·主要仪器第16页
     ·试剂第16-17页
     ·培养基第17页
   ·方法第17-21页
     ·实验方法第17页
     ·洛伐他汀转化率及产物的测定方法第17-18页
     ·待测酶液的制备第18页
     ·细胞色素P450 酶活力检测方法第18页
     ·PCR 引物第18页
     ·Amycolatopsis sp.ST2710 染色体DNA 的制备第18-19页
     ·PCR 扩增反应体系及反应条件第19页
     ·PCR 产物克隆第19页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第19页
     ·转化大肠杆菌第19页
     ·质粒DNA 的提取第19-21页
第三章 结果与讨论第21-38页
   ·酶活力测定体系第21-24页
     ·Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定方法的选择第21页
     ·缓冲体系对 Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定的影响第21-22页
     ·破壁方法对 Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定的影响第22-23页
     ·底物浓度对 Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定的影响第23页
     ·温度对 Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定的影响第23-24页
     ·pH 对 Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶测定的影响第24页
   ·Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶对洛伐他汀羟基化的影响第24-30页
     ·洛伐他汀羟基化过程中P450 酶活性对转化影响第24-25页
     ·洛伐他汀羟基化过程中温度对P450 酶活性及转化率的影响第25-26页
     ·洛伐他汀羟基化过程中底物浓度对P450 酶活性及转化率的影响第26页
     ·洛伐他汀羟基化过程中pH 度对P450 酶活性及转化率的影响第26-27页
     ·洛伐他汀羟基化过程中不同离子对P450 酶活性及转化率的影响第27-29页
     ·洛伐他汀羟基化过程中溶氧对P450 酶活性及转化率的影响第29-30页
   ·Amycolatosis CGMCC No1149 P450 酶部分基因克隆与序列分析第30-36页
     ·根据保守区序列克隆P450 基因部分序列第30-31页
     ·克隆基因的序列分析第31页
     ·所得序列的遗传密码分析第31-32页
     ·所得序列的同源性分析第32-36页
   ·结论与展望第36-38页
     ·主要结论第36-37页
     ·展望第37-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-44页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第44页

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