| 摘要 | 第3-5页 |
| Summary | 第5-7页 |
| 英文缩略词表 | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-39页 |
| 1.1 口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)的概况 | 第14-19页 |
| 1.1.1 口蹄疫病毒的结构 | 第14-16页 |
| 1.1.2 FMDV的流行趋势及致病性 | 第16-18页 |
| 1.1.3 FMDV的防控及疫苗 | 第18-19页 |
| 1.2 天然免疫系统 | 第19-36页 |
| 1.2.1 TLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第21-22页 |
| 1.2.2 RLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第22-25页 |
| 1.2.3 NLRs介导的抗病毒天然免疫 | 第25-26页 |
| 1.2.4 胞浆DNA受体介导的抗病毒天然免疫 | 第26-28页 |
| 1.2.5 泛素化修饰调控的抗病毒天然免疫 | 第28-35页 |
| 1.2.6 磷酸化修饰调控的抗病毒天然免疫 | 第35-36页 |
| 1.3 FMDV调控宿主抗病毒天然免疫的研究 | 第36-37页 |
| 1.4 本研究的目的意义及研究内容 | 第37-39页 |
| 第二章 RIP2 影响FMDV诱导的信号通路 | 第39-51页 |
| 2.1 材料与方法 | 第39-47页 |
| 2.1.1 细胞、病毒和工程菌 | 第39-40页 |
| 2.1.2 质粒和抗体 | 第40页 |
| 2.1.3 工具酶和主要试剂 | 第40页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.1.5 主要试剂的配置 | 第41页 |
| 2.1.6 质粒的转化 | 第41-42页 |
| 2.1.7 质粒的大量提取 | 第42页 |
| 2.1.8 真核表达质粒和RNA的转染 | 第42-43页 |
| 2.1.9 细胞RNA的提取及cDNA反转录 | 第43-44页 |
| 2.1.10 实时荧光定量PCR(quantitative polymerase chain reaction,qPCR) | 第44-45页 |
| 2.1.11 细胞的冻存和复苏 | 第45页 |
| 2.1.12 FMDV的增殖 | 第45页 |
| 2.1.13 FMDV感染 | 第45页 |
| 2.1.14 蛋白质免疫印迹(Western blot,WB) | 第45-46页 |
| 2.1.15 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP) | 第46页 |
| 2.1.16 双荧光素酶报告基因的检测 | 第46-47页 |
| 2.1.17 数据统计分析 | 第47页 |
| 2.2 结果 | 第47-50页 |
| 2.2.1 FMDV感染激活RIP2 介导的信号通路 | 第47-48页 |
| 2.2.2 RIP2 影响FMDV诱导的P65和IRF3 的磷酸化 | 第48-49页 |
| 2.2.3 RIP2 影响FMDV诱导的下游抗病毒基因的表达水平 | 第49-50页 |
| 2.3 讨论 | 第50-51页 |
| 第三章 RIP2对FMDV复制的影响 | 第51-56页 |
| 3.1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 3.1.1 细胞、病毒和工程菌 | 第51页 |
| 3.1.2 质粒和抗体 | 第51页 |
| 3.1.3 工具酶和主要试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第52页 |
| 3.1.5 主要试剂的配置 | 第52页 |
| 3.1.6 质粒的瞬时转染(Lipofectamine3000) | 第52-53页 |
| 3.1.7 病毒滴度 | 第53页 |
| 3.1.8 细胞RNA的提取及cDNA反转录 | 第53页 |
| 3.1.9 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第53页 |
| 3.1.10 数据统计分析 | 第53-54页 |
| 3.2 结果 | 第54-55页 |
| 3.2.1 过表达RIP2 抑制FMDV复制 | 第54页 |
| 3.2.2 小RNA干扰RIP2 蛋白表达水平后促进FMDV复制 | 第54-55页 |
| 3.3 讨论 | 第55-56页 |
| 第四章 FMDV感染降低RIP2 的蛋白表达水平 | 第56-64页 |
| 4.1 材料与方法 | 第56-58页 |
| 4.1.1 细胞与病毒 | 第56页 |
| 4.1.2 抗体 | 第56页 |
| 4.1.3 工具酶和主要试剂 | 第56-57页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第57页 |
| 4.1.5 细胞RNA提取及反转录 | 第57-58页 |
| 4.1.6 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第58页 |
| 4.1.7 蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB) | 第58页 |
| 4.1.8 数据统计分析 | 第58页 |
| 4.2 结果 | 第58-62页 |
| 4.2.1 FMDV感染上调RIP2 mRNA表达水平 | 第58-59页 |
| 4.2.2 FMDV感染降低RIP2 蛋白表达水平 | 第59-61页 |
| 4.2.3 FMDV感染降低RIP和 RIP3 蛋白表达水平 | 第61页 |
| 4.2.4 EV71感染降低RIP2蛋白表达水平 | 第61-62页 |
| 4.3 讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 FMDV降低RIP2 蛋白表达水平的机制 | 第64-77页 |
| 5.1 材料与方法 | 第64-67页 |
| 5.1.1 细胞与病毒 | 第64页 |
| 5.1.2 质粒与抗体 | 第64-65页 |
| 5.1.3 工具酶和主要试剂 | 第65页 |
| 5.1.4 主要仪器 | 第65页 |
| 5.1.5 细胞RNA提取及反转录 | 第65-66页 |
| 5.1.6 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第66页 |
| 5.1.7 MTS实验 | 第66-67页 |
| 5.1.8 主要试剂的配制 | 第67页 |
| 5.1.9 蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB) | 第67页 |
| 5.1.10 数据统计分析 | 第67页 |
| 5.2 结果 | 第67-75页 |
| 5.2.1 FMDV2B、2C、L~(pro)和3C~(pro)蛋白降低内源性RIP2 蛋白表达水平 | 第67-69页 |
| 5.2.2 FMDV2B、2C、L~(pro)和3C~(pro)不降低RIP2 mRNA水平 | 第69页 |
| 5.2.3 FMDV2B降低RIP2 蛋白表达水平的机制 | 第69-72页 |
| 5.2.4 FMDV2C降低RIP2 蛋白表达水平的机制 | 第72-74页 |
| 5.2.5 FMDV L~(pro)和3C~(pro)降低RIP2 蛋白表达水平的机制 | 第74-75页 |
| 5.3 讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 FMDV2C与 RIP2 相互作用 | 第77-82页 |
| 6.1 材料与方法 | 第77-79页 |
| 6.1.1 细胞、病毒和工程菌 | 第77页 |
| 6.1.2 质粒和抗体 | 第77-78页 |
| 6.1.3 工具酶和主要试剂 | 第78页 |
| 6.1.4 主要仪器 | 第78页 |
| 6.1.5 主要试剂的配置 | 第78页 |
| 6.1.6 免疫共沉淀实验 | 第78-79页 |
| 6.2 结果 | 第79-81页 |
| 6.2.1 FMDV2C与 RIP2 外源性互作 | 第79-80页 |
| 6.2.2 FMDV2C与 RIP2 内源性互作 | 第80页 |
| 6.2.3 FMDV2C与 RIP2 的互作位点 | 第80-81页 |
| 6.3 讨论 | 第81-82页 |
| 第七章 FMDV2C降低RIP2 蛋白表达水平的机制 | 第82-89页 |
| 7.1 材料与方法 | 第82-85页 |
| 7.1.1 细胞与病毒 | 第82页 |
| 7.1.2 质粒与抗体 | 第82-83页 |
| 7.1.3 工具酶和主要试剂 | 第83页 |
| 7.1.4 主要仪器 | 第83页 |
| 7.1.5 RNA的转染 | 第83-84页 |
| 7.1.6 细胞RNA提取及反转录 | 第84页 |
| 7.1.7 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第84-85页 |
| 7.1.8 蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB) | 第85页 |
| 7.1.9 数据统计分析 | 第85页 |
| 7.2 结果 | 第85-88页 |
| 7.2.1 FMDV2C降低PABPC1 的蛋白表达水平 | 第85-86页 |
| 7.2.2 FMDV2C降低PABPC1 蛋白表达水平的位点 | 第86-87页 |
| 7.2.3 PABPC1 蛋白干扰后抑制了RIP2 的蛋白表达水平 | 第87-88页 |
| 7.3 讨论 | 第88-89页 |
| 全文结论 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 作者简介 | 第116-117页 |
| 导师简介 | 第117-118页 |
