| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-29页 |
| ·核苷酸的性质及研究现状 | 第13-16页 |
| ·核苷酸的结构及性质 | 第13-14页 |
| ·核苷酸的应用状况 | 第14-15页 |
| ·核苷酸的制备技术及研究进展 | 第15-16页 |
| ·5'-磷酸二酯酶的研究现状 | 第16-23页 |
| ·从桔青霉(Penicillium citrinum)发酵制备5'-磷酸二酯酶 | 第16-20页 |
| ·从麦芽根中提取的5'-磷酸二酯酶 | 第20-22页 |
| ·从其它途径提取的5'-磷酸二酯酶 | 第22-23页 |
| ·磷酸二酯酶固定化技术的研究进展 | 第23-25页 |
| ·核酸酶P1的固定化 | 第23-25页 |
| ·麦芽根5'-磷酸二酯酶的固定化 | 第25页 |
| ·酶膜反应器中核酸酶水解RNA的研究进展 | 第25-26页 |
| ·本文研究内容及方案 | 第26-29页 |
| ·研究目标及意义 | 第26-27页 |
| ·主要研究内容 | 第27页 |
| ·研究方法 | 第27-28页 |
| ·拟解决的关键问题 | 第28-29页 |
| 第二章 5'-磷酸二酯酶的酶活测定 | 第29-43页 |
| ·实验部分 | 第29-32页 |
| ·色谱分析条件 | 第29-30页 |
| ·酶活的测定 | 第30-31页 |
| ·大麦的发芽及5'-磷酸二酯酶的提取 | 第31-32页 |
| ·粗酶的热击除杂酶 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-42页 |
| ·色谱分离条件的优化 | 第32-36页 |
| ·酶解产品中核苷酸的HPLC定量分析 | 第36-37页 |
| ·RNA-HPLC酶活测定方法的建立 | 第37-41页 |
| ·RNA-HPLC酶活测定法在热击提纯酶过程中的应用 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 5'-磷酸二酯酶的提取和纯化 | 第43-56页 |
| ·实验部分 | 第43-47页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第43-44页 |
| ·酶活的测定 | 第44页 |
| ·大麦的发芽及5'-磷酸二酯酶的浸取 | 第44页 |
| ·粗酶的热击除杂酶 | 第44页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第44-45页 |
| ·超滤浓缩粗酶液 | 第45页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第45页 |
| ·透析除盐 | 第45-46页 |
| ·Sephadex G-25凝胶层析 | 第46页 |
| ·Sephadex G-75凝胶柱层析 | 第46-47页 |
| ·酶液的冷冻干燥 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-55页 |
| ·粗酶浸取条件的优化 | 第47-48页 |
| ·凝胶层析分离 | 第48-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 5'-磷酸二酯酶的酶学特性及催化水解RNA的动力学研究 | 第56-75页 |
| ·引言 | 第56-57页 |
| ·实验部分 | 第57-59页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第57-58页 |
| ·色谱分析条件 | 第58页 |
| ·酶活的测定 | 第58页 |
| ·核苷酸标准品溶液的配制 | 第58页 |
| ·测定米氏常数及最大反应速度 | 第58页 |
| ·5'-磷酸二酯酶水解RNA | 第58-59页 |
| ·酶催化动力学基础分析 | 第59-61页 |
| ·5'-磷酸二酯酶的催化水解RNA的可能反应机理 | 第61-66页 |
| ·5'-磷酸二酯酶动力学及热力学实验 | 第66-73页 |
| ·pH对反应过程的影响及酶的最适pH值 | 第66-67页 |
| ·温度对反应过程的影响及酶的最适温度 | 第67-68页 |
| ·动力学常数的测定 | 第68-70页 |
| ·麦芽根5'-磷酸二酯酶的稳定性 | 第70-73页 |
| ·本章小结 | 第73-75页 |
| 第五章 麦芽根5'-磷酸二酯酶的固定化 | 第75-85页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·试验部分 | 第75-78页 |
| ·仪器与试剂 | 第75-76页 |
| ·HPLC分析条件 | 第76页 |
| ·5'-磷酸二酯酶的提取 | 第76页 |
| ·活性壳聚糖载体的制备 | 第76-77页 |
| ·活化载体固定5'-磷酸二酯酶 | 第77页 |
| ·酶活的测定 | 第77页 |
| ·回收率的测定 | 第77-78页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第78页 |
| ·结果与讨论 | 第78-84页 |
| ·壳聚糖载体活化条件的确定 | 第78-79页 |
| ·活化壳聚糖载体固定化酶的反应条件 | 第79-81页 |
| ·固定化5'-磷酸二酯酶的酶学性质 | 第81-84页 |
| ·本章小结 | 第84-85页 |
| 第六章 酶膜反应器中水解RNA的工艺研究 | 第85-103页 |
| ·前言 | 第85-86页 |
| ·实验部分 | 第86-89页 |
| ·主要仪器及设备 | 第86页 |
| ·主要试剂 | 第86页 |
| ·5'-核苷酸HPLC分析条件 | 第86页 |
| ·活性壳聚糖载体的制备 | 第86-87页 |
| ·活化载体固定5'-磷酸二酯酶 | 第87页 |
| ·酶活的测定 | 第87页 |
| ·回收率的测定 | 第87页 |
| ·膜通量的测定 | 第87页 |
| ·截留率的测定 | 第87-88页 |
| ·RNA酶解率的计算 | 第88页 |
| ·酶膜反应器生产能力的计算 | 第88页 |
| ·RNA含量测定 | 第88-89页 |
| ·结果与讨论 | 第89-101页 |
| ·膜材料的选择 | 第89-91页 |
| ·膜反应器中酶的固定及膜反应器的设计 | 第91-94页 |
| ·酶解RNA的CPFR反应操作条件的优化 | 第94-97页 |
| ·膜污染及其控制 | 第97-101页 |
| ·膜反应器连续酶解RNA的性能 | 第101页 |
| ·本章小结 | 第101-103页 |
| 第七章 错流萃取色谱模型的建立、理论分析及验证 | 第103-125页 |
| ·前言 | 第103-104页 |
| ·模型的建立 | 第104-108页 |
| ·模型的理论验证 | 第108-119页 |
| ·重相浓度变化曲线 | 第108-110页 |
| ·轻相浓度变化曲线 | 第110-112页 |
| ·组分的分离 | 第112-119页 |
| ·模型的实验验证 | 第119-123页 |
| ·实验部分 | 第120-121页 |
| ·数据处理 | 第121-123页 |
| ·本章结论 | 第123-125页 |
| 第八章 结论与展望 | 第125-129页 |
| ·主要结论及创新点 | 第125-127页 |
| ·展望及努力方向 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-141页 |
| 攻读博士学位期间撰写的文章 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
