| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第13-14页 |
| 第一章 阿帕替尼通过诱导细胞周期停滞和阻断VEGFR信号通路抑制获得性吉非替尼耐药的肺癌细胞增殖 | 第14-58页 |
| 1.1 前言 | 第14-16页 |
| 1.2 阿帕替尼抑制获得性吉非替尼耐药的肺癌细胞增殖作用及其机制 | 第16-53页 |
| 1.2.1 实验材料与试剂 | 第16-24页 |
| 1.2.1.1 实验用细胞系 | 第16页 |
| 1.2.1.2 主要用实验仪器 | 第16-17页 |
| 1.2.1.3 主要用实验试剂 | 第17-19页 |
| 1.2.1.4 常用细胞实验相关溶液的配置 | 第19-20页 |
| 1.2.1.5 常用Western blot相关实验溶液的配制 | 第20-23页 |
| 1.2.1.6 其他常用溶液的配置 | 第23-24页 |
| 1.2.2 实验方法 | 第24-33页 |
| 1.2.2.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 1.2.2.2 CCK8法检测药物对肺癌细胞的抑制率 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 CFDA-SE法检测阿帕替尼对肺癌细胞增殖抑制作用 | 第26页 |
| 1.2.2.4 细胞克隆形成实验 | 第26-27页 |
| 1.2.2.5 AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第27页 |
| 1.2.2.6 线粒体膜电位分析 | 第27-28页 |
| 1.2.2.7 细胞周期分布检测 | 第28页 |
| 1.2.2.8 RNA测序和数据分析 | 第28页 |
| 1.2.2.9 Western blot检测蛋白质的表达 | 第28-33页 |
| 1.2.2.10 小鼠异种移植模型中的体内抗肿瘤活性评估 | 第33页 |
| 1.2.2.11 统计分析 | 第33页 |
| 1.2.3 实验结果 | 第33-50页 |
| 1.2.3.1 PC9吉非替尼耐药细胞系的建立 | 第33-34页 |
| 1.2.3.2 8μM阿帕替尼强烈抑制PC9GR细胞的生长,但不抑制其他肺癌细胞的生长 | 第34-37页 |
| 1.2.3.3 阿帕替尼诱导PC9GR细胞周期停滞 | 第37-38页 |
| 1.2.3.4 阿帕替尼没有明显诱导PC9GR细胞凋亡 | 第38-40页 |
| 1.2.3.5 RNA测序提供了阿帕替尼对PC9GR细胞抑制作用的分子机制线索 | 第40-47页 |
| 1.2.3.6 阿帕替尼通过调节p57/细胞周期蛋白-E2/Rb信号传导途径阻滞PC9GR细胞周期 | 第47页 |
| 1.2.3.7 阿帕替尼抑制小鼠PC9GR细胞异种移植物的肿瘤生长 | 第47-50页 |
| 1.2.4 讨论 | 第50-52页 |
| 1.2.5 结论 | 第52-53页 |
| 1.3 本章节综述 | 第53-58页 |
| 1.3.1 肺癌在全球的现状 | 第53-54页 |
| 1.3.2 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI) | 第54-56页 |
| 1.3.3 阿帕替尼 | 第56-58页 |
| 第二章 阿帕替尼通过阻断ABCB1转运蛋白的功能逆转紫杉醇耐药的肺癌细胞 | 第58-83页 |
| 2.1 前言 | 第58-60页 |
| 2.2 阿帕替尼逆转肺癌细胞紫杉醇耐药的作用及其机制研究 | 第60-79页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第60页 |
| 2.2.1.1 实验用细胞系 | 第60页 |
| 2.2.1.2 主要用实验仪器 | 第60页 |
| 2.2.1.3 主要用实验试剂 | 第60页 |
| 2.2.1.4 常用细胞实验相关溶液的配置 | 第60页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第60-66页 |
| 2.2.2.1 细胞培养 | 第60页 |
| 2.2.2.2 药物对肺癌细胞抑制率的测定 | 第60-61页 |
| 2.2.2.3 AnnexinV-FITC/PI双染法细胞凋亡分析 | 第61-62页 |
| 2.2.2.4 通过碘化丙锭染色测定法进行细胞周期测定 | 第62页 |
| 2.2.2.5 细胞内活性氧的检测 | 第62-63页 |
| 2.2.2.6 罗丹明蓄积实验 | 第63页 |
| 2.2.2.7 紫杉醇积累试验 | 第63-64页 |
| 2.2.2.8 Western blot检测蛋白质的表达 | 第64-66页 |
| 2.2.2.9 统计分析 | 第66页 |
| 2.2.3 实验结果 | 第66-77页 |
| 2.2.3.1 A549/PTX细胞模型中紫杉醇耐药性的证明 | 第66-67页 |
| 2.2.3.2 阿帕替尼逆转A549/PTX细胞的紫杉醇耐药性 | 第67-68页 |
| 2.2.3.3 阿帕替尼显著增加紫杉醇在A549/PTX细胞中的蓄积 | 第68-70页 |
| 2.2.3.4 阿帕替尼增强罗丹明在A549/PTX细胞中的蓄积 | 第70页 |
| 2.2.3.5 阿帕替尼增强了A549/PTX细胞中紫杉醇诱导的细胞凋亡 | 第70-74页 |
| 2.2.3.6 阿帕替尼增强了A549/PTX细胞中紫杉醇诱导的细胞周期阻滞 | 第74页 |
| 2.2.3.7 阿帕替尼增强了A549/PTX细胞中紫杉醇诱导的活性氧生成 | 第74页 |
| 2.2.3.8 阿帕替尼-紫杉醇联合应用抑制AKT和 ERK信号通路 | 第74-77页 |
| 2.2.4 讨论 | 第77-78页 |
| 2.2.5 结论 | 第78-79页 |
| 2.3 本章节综述 | 第79-83页 |
| 2.3.1 紫杉醇在肺癌的应用 | 第79-81页 |
| 2.3.2 多药耐药与ABCB | 第81-82页 |
| 2.3.3 阿帕替尼 | 第82-83页 |
| 2.3.3.1 阿帕替尼概述 | 第82页 |
| 2.3.3.2 阿帕替尼与ABCB | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-97页 |
| 个人简历、在学期间学术成果 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
