电子垃圾重金属污染稻田土壤中反硝化微生物群落多样性分析
| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-26页 |
| 1.1 电子垃圾性质及危害 | 第10-12页 |
| 1.2 氮循环与反硝化过程 | 第12-15页 |
| 1.2.1 氮循环 | 第12-13页 |
| 1.2.2 反硝化作用 | 第13-14页 |
| 1.2.3 反硝化细菌 | 第14-15页 |
| 1.3 微生物多样性研究方法及其应用 | 第15-21页 |
| 1.3.1 土壤微生物功能多样性 | 第15-16页 |
| 1.3.2 土壤微生物结构多样性 | 第16页 |
| 1.3.3 土壤微生物遗传多样性 | 第16-21页 |
| 1.4 高通量测序在微生物群落组成的研究与应用 | 第21-24页 |
| 1.4.1 PCR 产物扩增序列 | 第21-22页 |
| 1.4.2 目标区域扩增引物选择 | 第22-23页 |
| 1.4.3 数据信息分析 | 第23页 |
| 1.4.4 高通量测序的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第24-25页 |
| 1.6 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 土壤样品采集与处理 | 第26页 |
| 2.2 实验试剂和仪器 | 第26-28页 |
| 2.3 土壤样品的基本理化性质 | 第28页 |
| 2.4 重金属元素总量分析 | 第28-29页 |
| 2.5 土壤样品 DNA 提取 | 第29页 |
| 2.6 16S rRNA 基因扩增（高通量测序） | 第29-30页 |
| 2.7 PCR 扩增引物及反应条件 | 第30-32页 |
| 2.8 目的基因的荧光定量 PCR 检测与分析 | 第32-34页 |
| 2.8.1 PCR 产物纯化 | 第32页 |
| 2.8.2 连接反应 | 第32-33页 |
| 2.8.3 转化反应 | 第33-34页 |
| 2.8.4 构建标准曲线 | 第34页 |
| 2.9 目的基因的克隆文库构建与分析 | 第34-35页 |
| 2.9.1 PCR 产物纯化 | 第34-35页 |
| 2.9.2 连接反应 | 第35页 |
| 2.9.3 重组体转化与克隆 | 第35页 |
| 2.10 目的基因的 T-RFLP 分析 | 第35-36页 |
| 2.10.1 目的片段的 PCR 扩增及纯化 | 第35页 |
| 2.10.2 目的片段限制性内切酶消化 | 第35-36页 |
| 2.10.3 T-RFLP 分析方法 | 第36页 |
| 2.11 数据处理及统计学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-64页 |
| 3.1 电子垃圾污染水稻土壤中重金属污染状况 | 第37-41页 |
| 3.2 重金属对微生物群落的影响 | 第41-54页 |
| 3.2.1 微生物多样性及物种组成 | 第41-49页 |
| 3.2.2 重金属与微生物群落的相关性 | 第49-54页 |
| 3.3 重金属对反硝化群落多样性的影响 | 第54-64页 |
| 3.3.1 实时定量 PCR 结果分析 | 第54-57页 |
| 3.3.2 克隆文库结果分析 | 第57-59页 |
| 3.3.3 T-RFLP 结果分析 | 第59-64页 |
| 第四章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 4.1 主要结论 | 第64-65页 |
| 4.2 创新点与展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 附录一 pGEM-T Easy Vector | 第73-74页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
