| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1 骨髓间充质干细胞及成骨细胞低温保存研究进展 | 第15-31页 |
| ·低温保存的概念 | 第15页 |
| ·低温保存方法及低温损伤 | 第15-21页 |
| ·慢速冻存法 | 第15-16页 |
| ·玻璃化冻存法 | 第16-17页 |
| ·低温保存的步骤 | 第17-18页 |
| ·慢速冻存过程中的细胞损伤 | 第18-20页 |
| ·玻璃化冻存过程中的细胞损伤及关键问题 | 第20-21页 |
| ·冷冻保护剂及其保护机理 | 第21-23页 |
| ·骨髓间充质干细胞及成骨细胞的低温保存 | 第23-29页 |
| ·干细胞及骨髓间充质干细胞 | 第23-26页 |
| ·骨髓间充质干细胞临床应用的关键问题 | 第26-27页 |
| ·骨髓间充质干细胞低温保存的研究现状及问题 | 第27-28页 |
| ·成骨细胞低温保存的发展现状 | 第28-29页 |
| ·本文的选题依据及研究内容 | 第29-31页 |
| 2 人骨髓间充质干细胞慢速冻存冷冻保护剂的研究 | 第31-51页 |
| ·引言 | 第31页 |
| ·实验仪器与材料 | 第31-34页 |
| ·实验仪器与设备 | 第31-32页 |
| ·药品与试剂 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·人骨髓间充质干细胞的体外培养 | 第34页 |
| ·人骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第34页 |
| ·冷冻保护剂的配制 | 第34-35页 |
| ·细胞慢速冻存及复温过程 | 第35-36页 |
| ·细胞活率及凋亡率检测 | 第36页 |
| ·细胞代谢及增殖活性测定 | 第36-37页 |
| ·细胞的形态、细胞内pH值及线粒体分布检测 | 第37-38页 |
| ·细胞多向分化潜能检测 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-48页 |
| ·人骨髓间充质干细胞的体外培养 | 第39-40页 |
| ·冷冻保护剂对人骨髓间充质干细胞活性及凋亡率的影响 | 第40-41页 |
| ·人骨髓间充质干细胞冻后代谢活性及增殖能力变化 | 第41-44页 |
| ·冷冻保护剂对人骨髓间充质干细胞形态、细胞内pH值及线粒体分布的影响 | 第44-45页 |
| ·冷冻保护剂对人骨髓间充质干细胞多向分化潜能的影响 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 3 不同种属来源的骨髓间充质干细胞慢速冻存研究 | 第51-63页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验仪器与材料 | 第51-52页 |
| ·实验仪器与设备 | 第51-52页 |
| ·药品与试剂 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-54页 |
| ·不同种属来源骨髓间充质干细胞的体外培养 | 第52-53页 |
| ·细胞的慢速冻存过程 | 第53页 |
| ·细胞成活率及增殖活性的测定 | 第53页 |
| ·细胞分化潜能的检测 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-61页 |
| ·不同种属来源骨髓间充质干细胞的体外培养比较 | 第54-56页 |
| ·冻存后细胞的成活率及增殖活性 | 第56-60页 |
| ·冻存后细胞的分化潜能 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 4 人骨髓间充质干细胞在不同基质材料上黏附后的低温保存 | 第63-82页 |
| ·引言 | 第63页 |
| ·实验仪器与材料 | 第63-64页 |
| ·实验仪器与设备 | 第63-64页 |
| ·药品与试剂 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-67页 |
| ·hMSCs在不同基质材料上的培养 | 第64-65页 |
| ·细胞活率及细胞骨架F-actin的检测 | 第65-66页 |
| ·黏附及悬浮hMSCs的低温保存方法 | 第66页 |
| ·冻存后hMSCs活性的测定 | 第66-67页 |
| ·统计学分析 | 第67页 |
| ·实验结果 | 第67-78页 |
| ·hMSCs在不同基质材料上的生长情况 | 第67-68页 |
| ·冷冻保护剂导入和洗脱对hMSCs活性及细胞骨架的影响 | 第68-70页 |
| ·降温速率对在不同基质材料上黏附的hMSCs活性的影响 | 第70页 |
| ·冷冻保护剂对在不同基质材料上黏附的hMSCs活性的影响 | 第70-71页 |
| ·不同基质材料表面对冻存后hMSCs活性的影响 | 第71-78页 |
| ·单层细胞与悬液细胞冻存效果的比较 | 第78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 5 悬浮与黏附成骨细胞的低温保存 | 第82-94页 |
| ·引言 | 第82页 |
| ·实验仪器与材料 | 第82-83页 |
| ·实验仪器与设备 | 第82-83页 |
| ·药品与试剂 | 第83页 |
| ·实验方法 | 第83-87页 |
| ·成骨细胞的分离、培养及鉴定 | 第83-84页 |
| ·悬浮与黏附成骨细胞对渗透压的耐受范围测定 | 第84-85页 |
| ·悬浮与黏附成骨细胞的慢速冻存 | 第85页 |
| ·悬浮与黏附成骨细胞慢速冻存后的活性检测 | 第85-86页 |
| ·统计学分析 | 第86-87页 |
| ·实验结果 | 第87-92页 |
| ·成骨细胞的体外培养 | 第87-88页 |
| ·悬浮与黏附成骨细胞对渗透压的耐受范围 | 第88-90页 |
| ·悬浮与黏附成骨细胞慢速冻存后的细胞活性 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 6 成骨细胞渗透参数测定及其在玻璃化保护剂导入过程中的应用 | 第94-110页 |
| ·引言 | 第94-95页 |
| ·实验仪器与材料 | 第95-96页 |
| ·实验仪器与设备 | 第95-96页 |
| ·药品与试剂 | 第96页 |
| ·实验方法 | 第96-100页 |
| ·细胞体积分析方法 | 第96-97页 |
| ·成骨细胞非渗透体积的测定 | 第97页 |
| ·成骨细胞膜渗透参数的测定 | 第97-98页 |
| ·成骨细胞玻璃化法低温保存导入过程的研究 | 第98-100页 |
| ·统计学分析 | 第100页 |
| ·实验结果 | 第100-108页 |
| ·成骨细胞的等渗体积 | 第100页 |
| ·成骨细胞在不同渗透压下的平衡体积 | 第100-101页 |
| ·成骨细胞非渗透体积 | 第101-102页 |
| ·成骨细胞对水分以及冷冻保护剂渗透参数 | 第102-103页 |
| ·玻璃化溶液的差式扫描量热(DSC)分析及低温冷台观察 | 第103-104页 |
| ·玻璃化法冻存成骨细胞降温和复温速率 | 第104-105页 |
| ·成骨细胞玻璃化保护剂导入过程的研究 | 第105-108页 |
| ·讨论 | 第108-109页 |
| ·小结 | 第109-110页 |
| 结论 | 第110-112页 |
| 工作展望 | 第112-113页 |
| 创新点摘要 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-130页 |
| 附录A 英文缩略词 | 第130-132页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第132-134页 |
| 致谢 | 第134-136页 |
| 作者简介 | 第136-138页 |
