摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-29页 |
1.1 粉红聚端孢引起的植物病害 | 第16页 |
1.2 苹果霉心病和心腐病 | 第16-21页 |
1.2.1 苹果霉心病和心腐病的发生与危害 | 第16-17页 |
1.2.2 苹果霉心病和心腐病的病原学研究 | 第17-18页 |
1.2.3 苹果霉心病和心腐病的侵染循环 | 第18-19页 |
1.2.4 果实结构对苹果霉心病和心腐病的影响 | 第19页 |
1.2.5 苹果霉心病和心腐病的防治概况 | 第19-21页 |
1.3 套袋苹果黑点病 | 第21-23页 |
1.3.1 果实套袋与黑点病发生关系 | 第21页 |
1.3.2 黑点病发生与危害 | 第21-22页 |
1.3.3 黑点病病原学研究 | 第22-23页 |
1.3.4 黑点病的发生规律 | 第23页 |
1.3.5 黑点病的防治 | 第23页 |
1.4 真菌毒素与对植物致病作用 | 第23-28页 |
1.4.1 毒素 | 第23-24页 |
1.4.2 毒素与植物致病关系 | 第24页 |
1.4.3 毒素在植物致病中的作用机理 | 第24-25页 |
1.4.4 单端孢烯族毒素 | 第25页 |
1.4.5 单端孢烯族毒素的危害 | 第25-26页 |
1.4.6 单端孢烯族毒素的合成基因和代谢通路 | 第26-27页 |
1.4.7 单端孢烯族毒素与真菌致病的关系 | 第27页 |
1.4.8 单端孢菌素 | 第27-28页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
第二章 粉红聚端孢的原生质体制备和荧光标记菌株构建 | 第29-39页 |
2.1 引言 | 第29-30页 |
2.2 试验材料 | 第30-31页 |
2.2.1 供试菌株 | 第30页 |
2.2.2 质粒 | 第30页 |
2.2.3 培养基和试剂 | 第30-31页 |
2.3 方法 | 第31-33页 |
2.3.1 PEG介导的遗传转化 | 第31-32页 |
2.3.2 转化子荧光观察 | 第32页 |
2.3.3 转化子PCR检测 | 第32页 |
2.3.4 转化子的生物学特性和致病力分析 | 第32-33页 |
2.3.5 组织学观察 | 第33页 |
2.3.6 统计学分析 | 第33页 |
2.4 结果与分析 | 第33-37页 |
2.4.1 粉红聚端孢的遗传转化、PCR验证和荧光信号观察 | 第33-35页 |
2.4.2 荧光标记转化子的生物学特性和致病力评价 | 第35-36页 |
2.4.3 组织学观察 | 第36-37页 |
2.5 结论与讨论 | 第37-39页 |
第三章 粉红聚端孢引起的苹果心腐病侵染特征研究 | 第39-53页 |
3.1 前言 | 第39页 |
3.2 试验材料 | 第39页 |
3.3 方法 | 第39-41页 |
3.3.1 离体花器接种 | 第39-40页 |
3.3.2 田间接种 | 第40-41页 |
3.3.3 透射电镜观察受侵染的果肉细胞 | 第41页 |
3.4 结果与分析 | 第41-51页 |
3.4.1 粉红聚端孢侵染花器组织观察 | 第41-43页 |
3.4.2 粉红聚端孢侵染花器残体及在萼筒中扩展观察 | 第43-44页 |
3.4.3 粉红聚端孢侵染花柱及在花柱中扩展 | 第44页 |
3.4.4 粉红聚端孢在苹果萼心间组织中扩展 | 第44-46页 |
3.4.5 粉红聚端孢侵染苹果心室过程 | 第46页 |
3.4.6 粉红聚端孢在苹果内部通道扩展原因分析 | 第46-48页 |
3.4.7 粉红聚端孢引起的苹果心腐症状发生于苹果成熟时期 | 第48-49页 |
3.4.8 粉红聚端孢的侵染时期研究 | 第49-50页 |
3.4.9 细胞学观察 | 第50-51页 |
3.5 结论与讨论 | 第51-53页 |
第四章 粉红聚端孢引起的苹果黑点病发生规律研究 | 第53-71页 |
4.1 引言 | 第53页 |
4.2 试验材料 | 第53页 |
4.3 方法 | 第53-55页 |
4.3.1 粉红聚端孢孢子悬浮液制备 | 第53页 |
4.3.2 苹果果肉提取液制备 | 第53页 |
4.3.3 离体条件下外源营养、湿度和光照对孢子萌发的影响 | 第53-54页 |
4.3.4 室内接种观察侵染点 | 第54页 |
4.3.5 扫描电子显微镜观察 | 第54-55页 |
4.3.6 透射电镜样品制备与观察 | 第55页 |
4.3.7 田间接种和荧光观察 | 第55页 |
4.3.8 数据分析 | 第55页 |
4.4 结果 | 第55-67页 |
4.4.1 外源营养、相对湿度和光照对粉红聚端孢孢子萌发的影响 | 第55-57页 |
4.4.2 粉红聚端孢在苹果表面上的侵染位点 | 第57页 |
4.4.3 粉红聚端孢在苹果表皮组织内的扩展特点 | 第57-63页 |
4.4.4 粉红聚端孢在田间的侵染时间和发病情况 | 第63-65页 |
4.4.5 田间不同生长期果实被侵染后产生的组织学变化 | 第65-67页 |
4.5 结论与讨论 | 第67-71页 |
第五章 单端孢菌素在粉红聚端孢致病中作用机制研究 | 第71-96页 |
5.1 引言 | 第71页 |
5.2 试验材料 | 第71页 |
5.3 方法 | 第71-77页 |
5.3.1 TrTri5 基因的敲除 | 第71-73页 |
5.3.2 ΔTrTri5 突变体的互补 | 第73页 |
5.3.3 ΔTrTri5 突变体的表型分析和对胁迫的反应 | 第73页 |
5.3.4 GC–MS检测腐烂果肉中的有机物 | 第73-74页 |
5.3.5 真菌培养液中单端孢菌素的测定 | 第74页 |
5.3.6 粉红聚端孢侵染后的腐烂果肉中单端孢菌素含量测定 | 第74-75页 |
5.3.7 致病力试验 | 第75-76页 |
5.3.8 单端孢菌素对粉红聚端孢野生型和ΔTrTri5 突变体孢子萌发的影响 | 第76页 |
5.3.9 野生型和ΔTrTri5 突变体培养滤液提取物对粉红聚端孢致病的影响 | 第76页 |
5.3.10 单端孢菌素对野生型和ΔTrTri5 突变体致病的影响 | 第76-77页 |
5.3.11 单端孢菌素对苹果组织和果肉细胞的影响 | 第77页 |
5.3.12 透射电镜样品制备与观察 | 第77页 |
5.3.13 数据统计与分析 | 第77页 |
5.4 结果与分析 | 第77-94页 |
5.4.1 苹果果实腐烂组织的单端孢菌素检测 | 第77-78页 |
5.4.2 粉红聚端孢编码单端孢烯合成酶TrTri5 基因的敲除和互补 | 第78-80页 |
5.4.3 TrTri5 基因缺失影响粉红聚端孢中单端孢菌素的合成 | 第80页 |
5.4.4 ΔTrTri5 突变体的培养滤液对丝状真菌生长的影响 | 第80页 |
5.4.5 单端孢菌素在腐烂果肉和周围无症状组织中的含量比较 | 第80-83页 |
5.4.6 ΔTrTri5 突变体的生长表型分析 | 第83页 |
5.4.7 粉红聚端孢TrTri5 基因在侵染苹果果实过程中作用 | 第83-87页 |
5.4.8 粉红聚端孢TrTri5 基因的表达和定位 | 第87-88页 |
5.4.9 野生型和ΔTrTri5 突变体培养滤液提取物对粉红聚端孢致病的影响 | 第88页 |
5.4.10 单端孢菌素对粉红聚端孢野生型和ΔTrTri5 突变体生长的影响 | 第88页 |
5.4.11 单端孢菌素能够促进野生型菌株的致病性 | 第88-89页 |
5.4.12 单端孢菌素能够回复ΔTrTri5 突变体的致病力 | 第89-91页 |
5.4.13 单端孢菌素对苹果果皮和果肉组织的影响 | 第91-94页 |
5.5 结论与讨论 | 第94-96页 |
第六章 全文总结 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
作者简介 | 第110页 |