| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-15页 |
| ·酿酒酵母NADH激酶 | 第8-10页 |
| ·NAD(H)和NAD(P)H的供应及功能 | 第8-9页 |
| ·pos5Δ的氧化胁迫敏感 | 第9页 |
| ·pos5Δ的呼吸缺陷 | 第9-10页 |
| ·pos5Δ的精氨基酸合成缺陷 | 第10页 |
| ·氧化胁迫与抗氧化防御体系 | 第10-12页 |
| ·氧化胁迫与活性氧 | 第10-11页 |
| ·抗氧化防御体系 | 第11-12页 |
| ·电子传递链 | 第12页 |
| ·立题背景与意义 | 第12-13页 |
| ·课题研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-23页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第15-16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·酶和主要试剂 | 第16页 |
| ·酿酒酵母醋酸锂转化法所用试剂 | 第16-17页 |
| ·酿酒酵母基因组提取试剂 | 第17页 |
| ·酿酒酵母线粒体制备试剂 | 第17页 |
| ·呼吸链酶复合体活性测定试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·菌株的培养及生长表型 | 第18页 |
| ·质粒的提取和验证 | 第18页 |
| ·敲除片段PCR扩增及纯化 | 第18-19页 |
| ·酿酒酵母醋酸锂转化法 | 第19页 |
| ·酿酒酵母基因组的提取 | 第19页 |
| ·酿酒酵母敲除体的验证 | 第19页 |
| ·细胞内活性氧水平的测定 | 第19-20页 |
| ·细胞内辅酶含量的测定 | 第20页 |
| ·酿酒酵母线粒体的制备 | 第20-21页 |
| ·呼吸链酶复合体活性测定 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-43页 |
| ·POS5Δ的氧化胁迫表型 | 第23-28页 |
| ·pos5Δ与抗氧化基因单缺失体的氧化胁迫表型 | 第23-24页 |
| ·抗氧化基因双缺失体sod2glr1Δ和trr2glr1Δ的构建及验证 | 第24-26页 |
| ·pos5Δ与抗氧化基因双缺失体的氧化胁迫表型 | 第26-28页 |
| ·阶段小结 | 第28页 |
| ·POS5Δ的细胞内活性氧水平 | 第28-31页 |
| ·pos5Δ的胞内活性氧浓度 | 第29-30页 |
| ·阶段小结 | 第30-31页 |
| ·POS5Δ的细胞内辅酶含量 | 第31-40页 |
| ·标样的分离 | 第32页 |
| ·正常环境下pos5Δ等突变菌株的胞内辅酶含量 | 第32-34页 |
| ·甲萘醌(VK_3)胁迫下pos5Δ的胞内辅酶含量 | 第34-35页 |
| ·过氧化氢(H_2O_2)胁迫下pos5Δ的胞内辅酶含量 | 第35-37页 |
| ·马来酸二乙酯(DEM)胁迫下pos5Δ的胞内辅酶含量 | 第37-38页 |
| ·SD中期与末期细胞内辅酶Ⅱ/Ⅰ比较 | 第38-39页 |
| ·阶段小结 | 第39-40页 |
| ·POS5Δ的线粒体呼吸链酶复合体活性 | 第40-43页 |
| ·pos5Δ的呼吸链酶复合体活性 | 第40-42页 |
| ·阶段小结 | 第42-43页 |
| 第四章 结论与展望 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第43页 |
| ·展望 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |
