| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| ·环糊精概述 | 第9-10页 |
| ·环糊精的组成与结构 | 第9-10页 |
| ·环糊精的功能与应用 | 第10页 |
| ·环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)概述 | 第10-13页 |
| ·CGT酶的三维结构 | 第10-11页 |
| ·CGT酶的功能 | 第11-12页 |
| ·CGT酶的应用 | 第12-13页 |
| ·CGT酶稳定性的国内外研究现状 | 第13页 |
| ·提高酶分子稳定性的研究概况 | 第13-14页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-23页 |
| ·质粒和菌株 | 第15页 |
| ·试剂与仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·培养方法 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·种子培养 | 第16页 |
| ·摇瓶发酵 | 第16页 |
| ·分子生物学操作 | 第16-19页 |
| ·突变体的构建与转化 | 第16-17页 |
| ·E. coli电转化感受态细胞的制备 | 第17-18页 |
| ·电击转化 | 第18页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第18页 |
| ·质粒DNA的酶切验证 | 第18页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
| ·分析方法 | 第19-23页 |
| ·α-CGT酶粗酶液的制备 | 第19页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第19页 |
| ·α-CGT酶环化活力的测定 | 第19页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物 | 第19-20页 |
| ·α-CGT酶的纯化 | 第20页 |
| ·不同来源的纯化α-CGT酶热稳定性比较 | 第20页 |
| ·α-CGT酶最适贮存浓度和pH的选择 | 第20页 |
| ·突变α-CGT酶的结构模拟 | 第20页 |
| ·α-CGT酶的化学修饰 | 第20-21页 |
| ·α-CGT酶保护剂的筛选及浓度优化 | 第21页 |
| ·α-CGT酶粗酶液长期贮存情况研究 | 第21页 |
| ·保护剂对α-CGT酶长期贮存保护效果的研究 | 第21页 |
| ·α-CGT酶的热稳定性与其结构变化的研究 | 第21-22页 |
| ·甘油提高α-CGT酶热稳定性机理的初步研究 | 第22-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-45页 |
| ·不同来源α-CGT酶稳定性研究 | 第23-27页 |
| ·不同来源α-CGT酶粗酶制剂的稳定性 | 第23-24页 |
| ·不同来源的α-CGT酶的纯化 | 第24-25页 |
| ·不同来源的纯化α-CGT酶的热稳定性比较 | 第25页 |
| ·pH和蛋白浓度对α-CGT粗酶制剂稳定性的影响 | 第25-26页 |
| ·温度对α-CGT酶粗酶制剂贮存稳定性的影响 | 第26-27页 |
| ·定点突变形成盐桥对重组α-CGT酶稳定性的影响 | 第27-31页 |
| ·重组α-CGT酶的定点突变 | 第28页 |
| ·重组α-CGT酶和突变α-CGT酶的表达 | 第28-29页 |
| ·重组和突变α-CGT酶的热稳定性比较 | 第29-30页 |
| ·盐桥与α-CGT酶热稳定性的相关性 | 第30-31页 |
| ·化学修饰对重组α-CGT酶稳定性的影响 | 第31-36页 |
| ·纯化重组α-CGT酶的戊二醛交联及其稳定性分析 | 第32-34页 |
| ·重组α-CGT酶粗酶液的戊二醛交联及其稳定性分析 | 第34-36页 |
| ·化学添加剂对重组α-CGT酶稳定性的影响 | 第36-45页 |
| ·化学添加剂的筛选 | 第36-37页 |
| ·化学添加剂对酶制剂贮存稳定性的影响 | 第37-40页 |
| ·α-CGT酶天然构象与热稳定性之间的相关性 | 第40-43页 |
| ·甘油提高α-CGT酶热稳定性的机理 | 第43-45页 |
| 第四章 结论与展望 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第45-46页 |
| ·展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |