| 摘要 | 第10-11页 |
| 英文摘要 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-19页 |
| 1.1 T.pyogenes概况 | 第13-14页 |
| 1.1.1 T.pyogenes生物学特性 | 第13页 |
| 1.1.2 T.pyogenes感染 | 第13-14页 |
| 1.1.3 T.pyogenes感染的防治 | 第14页 |
| 1.1.4 T.pyogenes的毒力因子 | 第14页 |
| 1.2 T.pyogenes溶血素 | 第14-16页 |
| 1.2.1 PLO在T.pyogenes感染中的重要性 | 第15页 |
| 1.2.2 PLO在预防T.pyogenes感染中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 CDCs与PLO | 第16-17页 |
| 1.4 细胞膜作为疫苗佐剂的研究概况 | 第17-18页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| 2.1 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2 试验动物、细胞 | 第20页 |
| 2.1.3 菌种、质粒及引物 | 第20页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.5 溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-34页 |
| 2.2.1 PLO D123截短蛋白的制备 | 第21-26页 |
| 2.2.2 PLO D123截短蛋白与不同动物抗rPLO多克隆抗体的反应性 | 第26-27页 |
| 2.2.3 PLO D123中B细胞线性抗原表位的筛选 | 第27页 |
| 2.2.4 其他截短肽与不同动物抗rPLO多克隆抗体的反应性分析 | 第27页 |
| 2.2.5 表位肽多克隆抗体的制备及抗溶血活性测定 | 第27-28页 |
| 2.2.6 疫苗重组抗原的制备 | 第28-31页 |
| 2.2.7 红细胞及红细胞膜的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.8 重组抗原细胞膜结合能力测定 | 第32页 |
| 2.2.9 重组抗原的细胞毒性检测 | 第32页 |
| 2.2.10 T.pyogenes感染小鼠LD50的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.11 疫苗的制备及免疫效果评价 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 PLO D123截短片段的制备 | 第34页 |
| 3.2 PLO D123截短蛋白与不同动物抗rPLO多克隆抗体的反应性 | 第34-36页 |
| 3.2.1 重组蛋白rPLO的表达及纯化 | 第34-35页 |
| 3.2.2 PLO D123截短蛋白与不同动物抗rPLO多克隆抗体的反应性 | 第35-36页 |
| 3.3 PLO D123中B细胞线性抗原表位的筛选 | 第36-37页 |
| 3.4 其他截短肽与不同动物抗rPLO多克隆抗体的反应性分析 | 第37-38页 |
| 3.5 表位肽多克隆抗体的鉴定及抗溶血活性分析 | 第38-42页 |
| 3.5.1 重组蛋白的表达及纯化 | 第38页 |
| 3.5.2 表位肽多克隆抗体滴度测定 | 第38-39页 |
| 3.5.3 表位肽多克隆抗体反应性分析 | 第39-40页 |
| 3.5.4 表位肽多克隆抗体抗溶血活性测定 | 第40-42页 |
| 3.6 疫苗重组抗原的制备 | 第42-43页 |
| 3.6.1 重组抗原原核表达质粒的构建 | 第42页 |
| 3.6.2 重组抗原的表达及纯化 | 第42-43页 |
| 3.7 重组抗原细胞膜结合能力测定 | 第43-44页 |
| 3.8 重组抗原细胞毒性检测 | 第44-45页 |
| 3.9 小鼠T.pyogenes感染LD50的测定 | 第45-46页 |
| 3.9.1 T.pyogenes的鉴定 | 第45页 |
| 3.9.2 T.pyogenes冻干菌的计数 | 第45页 |
| 3.9.3 小鼠感染T.pyogenes半数致死剂量的测定 | 第45-46页 |
| 3.10 疫苗免疫效果评价 | 第46-48页 |
| 3.10.1 免疫血清特异性抗体检测 | 第46-47页 |
| 3.10.2 免疫保护效果分析 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 PLO D123截短片段与不同动物抗rPLO多抗的反应性分析 | 第48-49页 |
| 4.2 表位肽多克隆抗体的特异性及抗溶血活性分析 | 第49-50页 |
| 4.3 疫苗重组抗原特性的分析 | 第50页 |
| 4.4 疫苗免疫效果评价 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
