| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-36页 |
| 1.1 植物GOX的研究进展 | 第13-31页 |
| 1.1.1 植物中的GOX | 第13-14页 |
| 1.1.2 GOX基因的克隆与表达调控 | 第14-15页 |
| 1.1.3 GOX的转运与组装 | 第15-19页 |
| 1.1.4 GOX的结构研究 | 第19-22页 |
| 1.1.5 GOX的功能研究 | 第22-23页 |
| 1.1.6 GOX聚集状态的多样性 | 第23-25页 |
| 1.1.7 GOX等电点多样性 | 第25-26页 |
| 1.1.8 GOX在农业生产中的研究 | 第26-31页 |
| 1.2 人源GOX的研究进展 | 第31-35页 |
| 1.2.1 人源GOX的结构研究 | 第31-33页 |
| 1.2.2 人源GOX在疾病治疗中的研究 | 第33-35页 |
| 1.3 研究内容及意义 | 第35-36页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第36-58页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第36-39页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第36页 |
| 2.1.2 实验载体 | 第36-37页 |
| 2.1.3 酶及化学试剂 | 第37页 |
| 2.1.4 层析介质 | 第37-38页 |
| 2.1.5 实验仪器及耗材 | 第38-39页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-58页 |
| 2.2.1 培养基和试剂的配制 | 第39-40页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第40-44页 |
| 2.2.3 重组蛋白的小量表达及表达条件优化 | 第44-45页 |
| 2.2.4 重组蛋白的表达及纯化 | 第45-49页 |
| 2.2.5 Protein Assay Kit测定蛋白浓度 | 第49-50页 |
| 2.2.6 蛋白晶体的筛选和优化 | 第50-54页 |
| 2.2.7 蛋白甲基化 | 第54页 |
| 2.2.8 蛋白晶体衍射数据收集和处理 | 第54页 |
| 2.2.9 晶体结构解析 | 第54-55页 |
| 2.2.10 小角X-射线散射实验 | 第55-56页 |
| 2.2.11 乙醇酸氧化酶体外活力实验 | 第56-58页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第58-93页 |
| 3.1 Holo-GOX的表达与纯化 | 第58-65页 |
| 3.1.1 针对表达菌株的优化 | 第58-59页 |
| 3.1.2 针对截短片段的优化 | 第59-61页 |
| 3.1.3 针对表达载体的优化 | 第61-62页 |
| 3.1.4 优化后的蛋白表达结果 | 第62-65页 |
| 3.2 Holo-GOX的晶体筛选与优化 | 第65-68页 |
| 3.2.1 晶体的筛选 | 第65-66页 |
| 3.2.2 晶体的优化 | 第66-67页 |
| 3.2.3 防冻液的优化 | 第67-68页 |
| 3.3 Holo-GOX的数据收集与结构解析 | 第68-71页 |
| 3.4 Apo-GOX的表达与纯化 | 第71-74页 |
| 3.5 Apo-GOX的晶体筛选与优化 | 第74-75页 |
| 3.6 Apo-GOX的数据收集与结构解析 | 第75-77页 |
| 3.7 Holo-GOX和Apo-GOX的结构分析与比较 | 第77-84页 |
| 3.7.1 Holo-GOX的结构概述 | 第77-79页 |
| 3.7.2 Apo-GOX的结构概述 | 第79-81页 |
| 3.7.3 Holo-GOX和Apo-GOX盖子结构的比较 | 第81-84页 |
| 3.8 GOX聚集状态分析 | 第84-91页 |
| 3.8.1 Holo-GOX和Apo-GOX的分子间相互作用分析 | 第84-86页 |
| 3.8.2 Holo-GOX和Apo-GOX在溶液中的聚集状态分析 | 第86-91页 |
| 3.9 Holo-GOX与Apo-GOX的酶活力分析 | 第91-93页 |
| 第四章 讨论 | 第93-101页 |
| 4.1 结构分析表明存在一个分子间pH传感器 | 第93-94页 |
| 4.2 分子间pH传感器与FMN的结合和解离 | 第94-96页 |
| 4.3 分子间pH传感器在不同物种中具有保守性 | 第96-101页 |
| 第五章 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-109页 |
| 致谢 | 第109-111页 |
| 作者简介 | 第111页 |
