| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1.前言 | 第12-18页 |
| 1.1 猪链球菌概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 猪链球菌流行病学 | 第12-13页 |
| 1.2 双组分信号转导系统研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 双组分信号转导系统 | 第13页 |
| 1.2.2 猪链球菌中双组分信号转导系统研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3 中性粒细胞与病原菌免疫逃避 | 第16-18页 |
| 2.研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 3.实验材料与方法 | 第19-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第19-26页 |
| 3.1.1 菌株、质粒和培养条件 | 第19页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 3.1.3 主要培养基以及试剂的配制 | 第20-21页 |
| 3.1.4 动物和细胞 | 第21页 |
| 3.1.5 主要实验器材 | 第21-22页 |
| 3.1.6 引物 | 第22-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 3.2.1 基因缺失株的构建与鉴定 | 第26-30页 |
| 3.2.2 互补菌株的筛选与鉴定 | 第30页 |
| 3.2.3 人血全血杀菌实验 | 第30页 |
| 3.2.4 猪链球菌2型野生株与中性粒细胞互作 | 第30-32页 |
| 3.2.5 细菌RNA的提取 | 第32页 |
| 3.2.6 cDNA模板制备 | 第32-33页 |
| 3.2.7 SYBR Green法荧光定量PCR | 第33-34页 |
| 3.2.8 突变株生长曲线的测定 | 第34页 |
| 3.2.9 革兰氏染色 | 第34页 |
| 3.2.10 透射电镜观察 | 第34-35页 |
| 3.2.11 细菌唾液酸提取和浓度检测 | 第35页 |
| 3.2.12 溶血活性检测 | 第35-36页 |
| 3.2.13 PMN杀菌实验 | 第36页 |
| 3.2.14 PMN吞噬实验 | 第36页 |
| 3.2.15 H2O2杀菌实验 | 第36-37页 |
| 3.2.16 溶菌酶杀菌实验 | 第37页 |
| 3.2.17 细胞黏附实验 | 第37-38页 |
| 3.2.18 小鼠存活与组织载菌量实验 | 第38-39页 |
| 3.2.19 炎症因子水平检测 | 第39页 |
| 3.2.20 统计学分析 | 第39-40页 |
| 4.结果与分析 | 第40-52页 |
| 4.1 双组分基因缺失突变株和互补菌株的鉴定 | 第40-41页 |
| 4.2 15个双组分基因缺失突变株全血杀菌实验 | 第41-42页 |
| 4.3 PMN刺激SC19后反应调控因子基因转录表达水平变化 | 第42页 |
| 4.4 VraSR的生物学特性研究 | 第42-52页 |
| 4.4.1 突变株ΔvraSR的生长特性 | 第42-43页 |
| 4.4.2 突变株ΔvraSR的革兰氏染色 | 第43页 |
| 4.4.3 突变株ΔvraSR的透射电镜观察 | 第43-44页 |
| 4.4.4 突变株ΔvraSR的荚膜唾液酸水平 | 第44-45页 |
| 4.4.5 突变株ΔvraSR的溶血活性 | 第45-46页 |
| 4.4.6 突变株ΔvraSR的全血杀菌实验 | 第46页 |
| 4.4.7 突变株ΔvraSR的PMN杀伤实验 | 第46-47页 |
| 4.4.8 突变株ΔvraSR的PMN吞噬实验 | 第47页 |
| 4.4.9 突变株ΔvraSR的H2O2杀菌实验 | 第47-48页 |
| 4.4.10 突变株ΔvraSR的溶菌酶杀菌实验 | 第48-49页 |
| 4.4.11 突变株ΔvraSR对HBMEC细胞的黏附实验 | 第49-50页 |
| 4.4.12 突变株ΔvraSR的对小鼠的存活曲线 | 第50页 |
| 4.4.13 突变株ΔvraSR感染后小鼠的组织载菌量 | 第50-51页 |
| 4.4.14 突变株ΔvraSR感染后小鼠炎症因子检测 | 第51-52页 |
| 5.讨论 | 第52-55页 |
| 5.1 多个双组分调控系统参与调控天然免疫逃避 | 第52-53页 |
| 5.2 VraSR逃避天然免疫的可能机制 | 第53页 |
| 5.3 VraSR与致病性 | 第53-55页 |
| 6.结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| Publications | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
