| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 前言综述 | 第10-26页 |
| 1.1 ZIKV | 第10-18页 |
| 1.1.1 ZIKV感染来源和传播的途径 | 第10页 |
| 1.1.2 ZIKV的流行病学特征 | 第10-12页 |
| 1.1.3 ZIKV的危害 | 第12-13页 |
| 1.1.4 致病机理 | 第13-17页 |
| 1.1.5 预防与治疗措施 | 第17-18页 |
| 1.2 ZIKV分子生物学研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 ZIKV的结构和理化性质 | 第18-19页 |
| 1.2.2 ZIKV基因组 | 第19-22页 |
| 1.3 寨卡感染T98G细胞途径相关蛋白介绍 | 第22-24页 |
| 1.3.1 网格蛋白 | 第22-23页 |
| 1.3.2 小窝蛋白 | 第23页 |
| 1.3.3 动力蛋白 | 第23页 |
| 1.3.4 微管微丝 | 第23-24页 |
| 1.4 立题依据与意义 | 第24-26页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第26-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-31页 |
| 2.1.1 质粒 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株 | 第26页 |
| 2.1.3 病毒 | 第26页 |
| 2.1.4 细胞系 | 第26页 |
| 2.1.5 细胞培养基 | 第26页 |
| 2.1.6 细菌培养基 | 第26-27页 |
| 2.1.7 抗体与小分子抑制剂 | 第27-28页 |
| 2.1.8 分子生物学试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.9 实验室常用溶液配置 | 第29-31页 |
| 2.2 实验仪器和耗材 | 第31-33页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第31-33页 |
| 2.2.2 实验耗材 | 第33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-46页 |
| 2.3.1 CaCl_2法大肠杆菌感受制备 | 第33-34页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.3.3 引物序列 | 第35页 |
| 2.3.4 mRNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.3.5 反转录体系 | 第36页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR检测(qRT-PCR) | 第36-37页 |
| 2.3.7 质粒的提取和转化 | 第37-38页 |
| 2.3.8 细胞冻存、复苏和培养 | 第38-39页 |
| 2.3.9 常规细胞转染方法 | 第39-40页 |
| 2.3.10 病毒的培养、浓缩和纯化 | 第40页 |
| 2.3.11 病毒滴度的测定 | 第40页 |
| 2.3.12 病毒感染 | 第40页 |
| 2.3.13 RNA干扰 | 第40页 |
| 2.3.14 流式检测细胞表面分子表达 | 第40-41页 |
| 2.3.15 蛋白样品的收集与制备 | 第41页 |
| 2.3.16 Westernblot实验 | 第41-42页 |
| 2.3.17 免疫共沉淀实验 | 第42-43页 |
| 2.3.18 免疫荧光实验 | 第43-44页 |
| 2.3.19 病毒吸附实验 | 第44页 |
| 2.3.20 MTT法检测化学试剂抑制剂对于T98G神经细胞的毒性 | 第44页 |
| 2.3.21 化学抑制剂对ZIKV感染实验 | 第44页 |
| 2.3.22 数据统计学分析 | 第44-46页 |
| 第3章 结果与分析 | 第46-66页 |
| 3.1 ZIKV感染人神经胶质瘤细胞T98G依赖网格蛋白介导的内吞途径 | 第46-52页 |
| 3.1.1 网格蛋白抑制剂Chlorpromazine影响ZIKV感染T98G细胞 | 第46页 |
| 3.1.2 过表达网格蛋白突变体EH29影响ZIKV的感染 | 第46-47页 |
| 3.1.3 下调网格蛋白的表达影响ZIKV感染T98G细胞 | 第47-49页 |
| 3.1.4 ZIKV感染人神经胶质瘤T98G细胞依赖Rab5和Rab7 | 第49-52页 |
| 3.2 .ZIKV感染人神经胶质瘤细胞T98G依赖动力蛋白 | 第52-55页 |
| 3.2.1 动力蛋白化学抑制剂Dynasore能抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第52页 |
| 3.2.2 过表达DynaminII显性抑制突变体能抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第52-54页 |
| 3.2.3 干扰DynaminII的表达能抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第54-55页 |
| 3.3 ZIKV感染人神经胶质瘤细胞T98G依赖微管、微丝 | 第55-57页 |
| 3.4 ZIKV感染人神经胶质瘤细胞T98G依赖小窝蛋白 | 第57-63页 |
| 3.4.1 ZIKV感染T98G细胞并与Caveolin1分子共定位 | 第57-58页 |
| 3.4.2 干扰Caveolin1的表达或过表达Caveolin1的突变体可抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第58-60页 |
| 3.4.3 胆固醇化学抑制剂MβCD和Filipin可抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第60-63页 |
| 3.5 ZIKV感染人神经胶质瘤细胞T98G依赖pH酸化条件 | 第63-66页 |
| 3.5.1 内体酸化抑制剂Chloroquine和NH4Cl可抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第63-64页 |
| 3.5.2 干扰V-ATPase可抑制ZIKV感染T98G细胞 | 第64-66页 |
| 第4章 总结与讨论 | 第66-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 作者简历 | 第78-79页 |
