摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-22页 |
1.1 乙型肝炎病毒概述 | 第10-17页 |
1.1.1 乙型肝炎病毒 | 第10-13页 |
1.1.2 乙型肝炎流行现状 | 第13-14页 |
1.1.3 抗HBV药物的现状及前景 | 第14-17页 |
1.2 TRIM蛋白概述 | 第17-20页 |
1.2.1 TRIM蛋白的结构和基本功能 | 第17-18页 |
1.2.2 TRIM蛋白与细胞因子信号通路 | 第18-19页 |
1.2.3 TRIM28蛋白结构及主要功能 | 第19-20页 |
1.3 课题研究目的及方案 | 第20-22页 |
第2章 TRIM28促进HBV的复制 | 第22-36页 |
2.1 前言 | 第22-23页 |
2.2 实验材料 | 第23-24页 |
2.2.1 实验试剂与耗材 | 第23页 |
2.2.2 仪器设备 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-30页 |
2.3.1 HBV感染方法 | 第24页 |
2.3.2 TRIM28过表达载体质粒的制备 | 第24-27页 |
2.3.3 TRIM28沉默载体质粒的构建 | 第27页 |
2.3.4 基因组DNA的提取(基因组DNA提取试剂盒) | 第27-28页 |
2.3.5 RNA的提取 | 第28页 |
2.3.6 RNA逆转录(TakaRa逆转录试剂盒) | 第28-29页 |
2.3.7 荧光定量PCR | 第29页 |
2.3.8 统计学分析 | 第29-30页 |
2.4 实验结果 | 第30-34页 |
2.4.1 TRIM28过表达质粒的构建与鉴定 | 第30-31页 |
2.4.2 TRIM28沉默质粒的构建与鉴定 | 第31-32页 |
2.4.3 TRIM28促进HBV的复制 | 第32-34页 |
2.5 小结与讨论 | 第34-36页 |
第3章 TRIM28促进HBV复制机制 | 第36-45页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 实验材料 | 第36-37页 |
3.2.1 实验试剂与耗材 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-41页 |
3.3.1 RNA提取 | 第37页 |
3.3.2 RNA逆转录 | 第37页 |
3.3.3 荧光定量PCR | 第37页 |
3.3.4 蛋白质提取 | 第37-38页 |
3.3.5 蛋白质浓度测定(BCA蛋白定量测定试剂盒) | 第38页 |
3.3.6 Western Blot实验 | 第38-40页 |
3.3.7 双荧光素酶报告基因(Promega试剂盒) | 第40页 |
3.3.8 乙肝病人肝组织检测 | 第40-41页 |
3.3.9 统计学分析 | 第41页 |
3.4 实验结果 | 第41-44页 |
3.4.1 TRIM28抑制干扰素活化的JAK-STAT信号通路 | 第41-43页 |
3.4.2 TRIM28在乙肝病人肝组织和HBV感染细胞内高表达 | 第43-44页 |
3.5 小结与讨论 | 第44-45页 |
结论与展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
附录 攻读硕士学位期间参与发表论文和专利 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |