| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-12页 |
| 1.1 前言 | 第7页 |
| 1.2 非结核分枝杆菌实验室检测方法 | 第7-8页 |
| 1.2.1 细菌学鉴定分枝杆菌 | 第7页 |
| 1.2.2 分子生物学鉴定分枝杆菌 | 第7-8页 |
| 1.3 黏附素 | 第8-9页 |
| 1.3.1 肝素结合血凝素 | 第8页 |
| 1.3.2 HBHA结构与功能 | 第8-9页 |
| 1.4 HBHA研究进展 | 第9-10页 |
| 1.5 酶联免疫吸附法 | 第10-11页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第11-12页 |
| 第二章 胞内分枝杆菌HBHA原核表达及蛋白纯化 | 第12-22页 |
| 2.1 试验材料 | 第12-16页 |
| 2.1.1 仪器及药品 | 第12-13页 |
| 2.1.2 主要试剂配制 | 第13-16页 |
| 2.2 试验内容 | 第16-19页 |
| 2.2.1 菌体的活化 | 第16页 |
| 2.2.2 pET-32a-HBHA质粒转化 | 第16-17页 |
| 2.2.3 菌体扩大诱导 | 第17页 |
| 2.2.4 HBHA蛋白纯化及浓度测定 | 第17-19页 |
| 2.3 试验结果 | 第19-21页 |
| 2.3.1 胞内分枝杆菌HBHA蛋白纯化 | 第19-20页 |
| 2.3.2 胞内分枝杆菌HBHA蛋白浓度测定 | 第20-21页 |
| 2.4 小结 | 第21-22页 |
| 第三章 胞内分枝杆菌HBHA单克隆抗体的制备 | 第22-31页 |
| 3.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 仪器及药品 | 第22页 |
| 3.1.2 试剂 | 第22-23页 |
| 3.2 试验方法 | 第23-28页 |
| 3.2.1 BaLB/C鼠免疫 | 第23-24页 |
| 3.2.2 骨髓瘤细胞的准备 | 第24页 |
| 3.2.3 饲养细胞的准备 | 第24-25页 |
| 3.2.4 杂交瘤细胞融合 | 第25页 |
| 3.2.5 杂交瘤细胞株筛选 | 第25-26页 |
| 3.2.6 杂交瘤细胞的克隆化培养 | 第26-27页 |
| 3.2.7 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第27页 |
| 3.2.8 单克隆抗体大量制备 | 第27-28页 |
| 3.2.9 单克隆抗体效价测定 | 第28页 |
| 3.3 试验结果 | 第28-30页 |
| 3.3.1 小鼠免疫 | 第28页 |
| 3.3.2 杂交瘤细胞株建立 | 第28-30页 |
| 3.4 小结 | 第30-31页 |
| 第四章 胞内分枝杆菌抗鼠全血清的制备 | 第31-34页 |
| 4.1 试验材料 | 第31页 |
| 4.2 试验方法 | 第31-33页 |
| 4.2.1 胞内分枝杆菌的复苏 | 第31页 |
| 4.2.2 胞内分枝杆菌抗血清的制备 | 第31-33页 |
| 4.3 试验结果 | 第33页 |
| 4.3.1 胞内分枝杆菌抗鼠血清的制备 | 第33页 |
| 4.4 小结 | 第33-34页 |
| 第五章 胞内分枝杆菌ELISA检测方法的建立及初步应用 | 第34-41页 |
| 5.1 试验材料 | 第34页 |
| 5.1.1 仪器及药品 | 第34页 |
| 5.1.2 试剂 | 第34页 |
| 5.2 试验方法 | 第34-36页 |
| 5.2.1 胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第34-35页 |
| 5.2.2 检测条件优化 | 第35页 |
| 5.2.3 特异性试验 | 第35页 |
| 5.2.4 敏感性试验 | 第35-36页 |
| 5.2.5 准确度试验 | 第36页 |
| 5.3 试验结果 | 第36-40页 |
| 5.3.1 胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测方法的建立 | 第36页 |
| 5.3.2 单克隆抗体包被最佳浓度与抗鼠血清最佳浓度的确定 | 第36-37页 |
| 5.3.3 最佳封闭液的确定 | 第37页 |
| 5.3.4 特异性试验 | 第37页 |
| 5.3.5 敏感性试验 | 第37-38页 |
| 5.3.6 准确度检测 | 第38-39页 |
| 5.3.7 待测样品检测 | 第39-40页 |
| 5.4 小结 | 第40-41页 |
| 第六章 胞内分枝杆菌ELISA检测试剂盒的组装 | 第41-44页 |
| 6.1 试剂盒特点 | 第41页 |
| 6.2 胞内分枝杆菌ELISA检测试剂盒使用说明书 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 附录 | 第49页 |
