| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 前言 | 第11页 |
| 1.1 海藻糖合成的相关酶以及调控途径 | 第11-13页 |
| 1.1.1 海藻糖合成途径 | 第11-12页 |
| 1.1.2 海藻糖合成酶活性位点及调控途径 | 第12-13页 |
| 1.2 海藻糖生产应用研究 | 第13-14页 |
| 1.2.1 海藻糖生产方法 | 第13页 |
| 1.2.2 海藻糖相关菌株筛选与改良 | 第13-14页 |
| 1.3 海藻糖对生物细胞保护作用机理 | 第14-15页 |
| 1.4 海藻糖的应用 | 第15-16页 |
| 1.4.1 在食品工业中的应用 | 第15页 |
| 1.4.2 医学领域中的应用 | 第15页 |
| 1.4.3 农业方面的应用 | 第15-16页 |
| 1.5 本论文研究意义与内容 | 第16-18页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16页 |
| 1.5.3 本论文创新点 | 第16-17页 |
| 1.5.4 技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 产海藻糖谷氨酸棒状杆菌诱变优化 | 第18-25页 |
| 前言 | 第18页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第18-21页 |
| 2.1.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1.1 菌种以及培养基 | 第18页 |
| 2.1.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.1.3 主要仪器 | 第19页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.1.2.1 培养条件 | 第19页 |
| 2.1.2.2 单细胞悬浮液的制备 | 第19-20页 |
| 2.1.2.3 海藻糖的分析方法 | 第20页 |
| 2.1.2.4 突变致死率的测定 | 第20页 |
| 2.1.2.5 紫外诱变 | 第20页 |
| 2.1.2.6 IPTG诱变处理 | 第20-21页 |
| 2.2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.2.1 紫外线照射剂量的确定 | 第21页 |
| 2.2.2 IPTG诱变 | 第21-22页 |
| 2.2.3 紫外线-IPTG复合处理 | 第22页 |
| 2.2.4 海藻糖高产菌株的筛选 | 第22-23页 |
| 2.2.4.1 初筛结果 | 第22页 |
| 2.2.4.2 复筛结果 | 第22-23页 |
| 2.2.5 遗传稳定性试验 | 第23-24页 |
| 2.3 讨论与小结 | 第24-25页 |
| 2.3.1 讨论 | 第24页 |
| 2.3.2 小结 | 第24-25页 |
| 第三章 海藻糖合成酶分离纯化及酶性质分析 | 第25-45页 |
| 前言 | 第25页 |
| 3.1 材料与方法 | 第25-31页 |
| 3.1.1 菌株与培养条件 | 第25页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.4 酶的分离纯化 | 第26-29页 |
| 3.1.4.1 TreS的分离纯化 | 第26-27页 |
| 3.1.4.2 MTSase酶的分离纯化 | 第27-28页 |
| 3.1.4.3 MTHase酶的分离纯化 | 第28页 |
| 3.1.4.4 TPS酶的分离纯化 | 第28-29页 |
| 3.1.4.5 TPP酶的分离纯化 | 第29页 |
| 3.1.5 酶性质分析 | 第29-30页 |
| 3.1.5.1 酶活性的测定 | 第29-30页 |
| 3.1.5.2 酶底物特异性检测 | 第30页 |
| 3.1.5.3 外界条件对酶活性的影响 | 第30页 |
| 3.1.6 海藻糖合酶催化反应条件优化 | 第30-31页 |
| 3.2 结果与分析 | 第31-43页 |
| 3.2.1 酶分离纯化 | 第31-33页 |
| 3.2.1.1 海藻糖合酶的分离纯化 | 第31页 |
| 3.2.1.2 MTSase与MTHase酶的分离纯化 | 第31-33页 |
| 3.2.1.3 TPS与TPP酶分离纯化 | 第33页 |
| 3.2.2 酶底物特异性 | 第33-35页 |
| 3.2.2.1 海藻糖合酶的底物特异性 | 第33-34页 |
| 3.2.2.2 MTSase酶底物特异性 | 第34-35页 |
| 3.2.3 pH对酶活性的影响 | 第35-36页 |
| 3.2.4 温度对酶活性的影响 | 第36-38页 |
| 3.2.5 金属离子对酶活性的影响 | 第38-40页 |
| 3.2.6 酶反应动力学 | 第40-41页 |
| 3.2.7 海藻糖合酶最适反应条件的确定 | 第41-43页 |
| 3.2.7.1 正交试验 | 第41-42页 |
| 3.2.7.2 试验验证 | 第42-43页 |
| 3.3 讨论与小结 | 第43-45页 |
| 3.3.1 讨论 | 第43页 |
| 3.3.2 小结 | 第43-45页 |
| 第四章 产海藻糖合酶谷氨酸棒状杆菌培养基组分优化 | 第45-56页 |
| 前言 | 第45页 |
| 4.1 材料和方法 | 第45-47页 |
| 4.1.1 菌株以及培养环境 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
| 4.1.4 酶活性测定 | 第46页 |
| 4.1.5 试验设计 | 第46-47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-55页 |
| 4.2.1 FFD设计优化 | 第47-49页 |
| 4.2.2 CCD设计优化培养基成分 | 第49-50页 |
| 4.2.3 实验验证 | 第50-55页 |
| 4.3 讨论与小结 | 第55-56页 |
| 4.3.1 讨论 | 第55页 |
| 4.3.2 小结 | 第55-56页 |
| 第五章 产海藻糖合酶谷氨酸棒状杆菌发酵条件优化 | 第56-64页 |
| 前言 | 第56页 |
| 5.1 材料和方法 | 第56-58页 |
| 5.1.1 菌种及培养条件 | 第56页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第56-57页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第57页 |
| 5.1.4 海藻糖合酶活性测定 | 第57页 |
| 5.1.5 外界环境对发酵的影响 | 第57-58页 |
| 5.1.5.1 初始pH的影响 | 第57页 |
| 5.1.5.2 温度的影响 | 第57页 |
| 5.1.5.3 摇床转速的影响 | 第57-58页 |
| 5.1.5.4 培养基装液量的影响 | 第58页 |
| 5.1.5.5 接种量的影响 | 第58页 |
| 5.1.5.6 种龄的影响 | 第58页 |
| 5.2 结果与分析 | 第58-63页 |
| 5.2.1 初始pH的影响 | 第58-61页 |
| 5.2.2 温度的影响 | 第61页 |
| 5.2.3 摇床转速的影响 | 第61页 |
| 5.2.4 装液量的影响 | 第61-62页 |
| 5.2.5 接种量的影响 | 第62-63页 |
| 5.2.6 种龄的影响 | 第63页 |
| 5.3 讨论与小结 | 第63-64页 |
| 5.3.1 讨论 | 第63页 |
| 5.3.2 小结 | 第63-64页 |
| 第六章 结论与展望 | 第64-67页 |
| 前言 | 第64页 |
| 6.1 结论 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |