| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第1章 构建稳定表达目的基因的Huh-7 细胞系 | 第9-21页 |
| 1.1 实验材料 | 第9-11页 |
| 1.1.1 主要仪器和设备 | 第9页 |
| 1.1.2 主要试剂和器材 | 第9-11页 |
| 1.2 实验方法 | 第11-21页 |
| 1.2.1 Huh-7 细胞的培养 | 第11-12页 |
| 1.2.2 目的基因过表达慢病毒的构建 | 第12-15页 |
| 1.2.3 慢病毒载体构建 | 第15-17页 |
| 1.2.4 慢病毒包装 | 第17-18页 |
| 1.2.5 慢病毒转染Huh-7 细胞 | 第18-19页 |
| 1.2.6 验证目的基因的表达 | 第19-21页 |
| 1.2.6.1 Western Blot验证PNPLA3蛋白的表达 | 第19-20页 |
| 1.2.6.2 荧光定量PCR验证PNPLA3基因mRNA的表达 | 第20-21页 |
| 第2章 PNPLA3基因I148M多态性对Huh-7 细胞周期的影响 | 第21-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 细胞周期的测定 | 第22页 |
| 2.2.2 Western Blot测定周期相关蛋白的表达 | 第22页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR测定周期相关蛋白mRNA的表达 | 第22-24页 |
| 第3章 结果 | 第24-33页 |
| 3.1 载体质粒构建成功 | 第24-28页 |
| 3.2 慢病毒载体构建成功 | 第28-29页 |
| 3.3 慢病毒成功感染Huh-7 细胞 | 第29-30页 |
| 3.4 PNPLA3成功过表达 | 第30-31页 |
| 3.5 PNPLA3基因I148M多态性影响Huh-7 细胞的细胞周期 | 第31-32页 |
| 3.6 Western blot检测p53，cyclin D1蛋白的表达 | 第32页 |
| 3.7 荧光定量PCR检测P53，cyclin D1 mRNA相对表达 | 第32-33页 |
| 第4章 讨论 | 第33-34页 |
| 第5章 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-39页 |
| 综述 | 第39-50页 |
| 综述参考文献 | 第43-50页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
| 缩略词 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
