摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第6-9页 |
第一章 实验材料 | 第9-16页 |
1.1 主要实验器材 | 第9页 |
1.2 主要实验试剂 | 第9-11页 |
1.3 用于转染的小分子RNA | 第11-12页 |
1.4 引物 | 第12-13页 |
1.5 主要试剂配制方法 | 第13-14页 |
1.6 细胞株和实验组 | 第14页 |
1.6.1 细胞株 | 第14页 |
1.6.2 实验分组 | 第14页 |
1.7 常用软件及数据库库 | 第14-16页 |
第二章 实验方法 | 第16-23页 |
2.1 HepG2细胞培养 | 第16页 |
2.2 细胞转染 | 第16-17页 |
2.3 RT-qPCR法检测HepG2细胞中MAEL和CDH1基因的相对表达量 | 第17-19页 |
2.3.1 细胞总RNA的制备 | 第17-18页 |
2.3.2 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第18页 |
2.3.3 实时荧光定量PCR检测样本中MAEL和CDH1的相对表达量 | 第18-19页 |
2.4 蛋白质免疫印迹法检测样本中各蛋白的表达情况 | 第19-21页 |
2.4.1 细胞浆蛋白质样本制备 | 第19-20页 |
2.4.2 蛋白质免疫印迹分析 | 第20-21页 |
2.5 MTT法检测HepG2细胞增殖 | 第21页 |
2.6 划痕实验检测HepG2细胞迁移 | 第21-22页 |
2.7 Transwell法检测HepG2细胞侵袭能力 | 第22页 |
2.8 统计分析 | 第22-23页 |
第三章 实验结果 | 第23-28页 |
3.1 靶向MAEL基因的siRNA的初筛结果 | 第23页 |
3.2 siRNA-778和saRNA-215分别下调MAEL基因和上调CDH1基因mRNA的表达 | 第23-24页 |
3.3 蛋白质免疫印迹结果 | 第24-25页 |
3.4 小分子RNA抑制HepG2细胞的增值 | 第25-26页 |
3.5 小分子RNA抑制HepG2细胞的迁移 | 第26-27页 |
3.6 小分子RNA抑制HepG2细胞的侵袭 | 第27-28页 |
第四章 讨论 | 第28-30页 |
结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-36页 |
综述 | 第36-57页 |
综述参考文献 | 第49-57页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |