摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
符号说明 | 第9-11页 |
综述 胞自噬与凋亡的关系 | 第11-15页 |
1. 材料 | 第15-17页 |
1.1 毒株 | 第15-16页 |
1.2 细胞、鸡胚 | 第16页 |
1.3 主要试剂 | 第16页 |
1.4 主要溶液 | 第16-17页 |
1.5 主要仪器设备 | 第17页 |
2. 方法 | 第17-22页 |
2.1 MTT法检测细胞存活率 | 第17页 |
2.2 病毒滴度测定(TCID50法) | 第17-18页 |
2.3 细胞处理 | 第18页 |
2.4 流式细胞术检测凋亡 | 第18页 |
2.5 实验鸡胚分组与处理 | 第18-19页 |
2.5.1 蛋白检测 | 第18-19页 |
2.5.2 绘制生存率曲线 | 第19页 |
2.6 Western blot检测 | 第19-21页 |
2.6.1 蛋白样品制备 | 第19页 |
2.6.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第19-20页 |
2.6.3 转印 | 第20页 |
2.6.4 封闭 | 第20页 |
2.6.5 一抗孵育 | 第20-21页 |
2.6.6 二抗孵育 | 第21页 |
2.6.7 显影 | 第21页 |
2.7 数据统计分析 | 第21-22页 |
3. 结果 | 第22-31页 |
3.1 ARV可诱导DF1细胞自噬与凋亡 | 第22-23页 |
3.2. ARV核衣壳蛋白σ C检测 | 第23页 |
3.3 自噬抑制剂对DF1细胞生长及病毒复制的作用 | 第23-24页 |
3.4 自噬抑制剂可显著减少ARV诱导的细胞病变 | 第24-25页 |
3.5 流式细胞术检测自噬抑制剂对ARV诱导的DF1细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
3.6 western blot检测自噬抑制剂对感染ARV的DF1 caspase3活化影响 | 第26-28页 |
3.7 自噬抑制剂对ARV在DF1细胞中复制的影响 | 第28页 |
3.8 自噬抑制剂CQ或E64d+pepstatin A显著抑制ARV诱导的鸡胚死亡 | 第28-31页 |
3.8.1 自噬抑制剂可显著降低ARV在鸡胚的复制水平 | 第28-29页 |
3.8.2 自噬抑制剂显著降低ARV诱导的鸡胚死亡率 | 第29-30页 |
3.8.3 自噬抑制剂显著减弱鸡胚组织器官细胞凋亡 | 第30-31页 |
4. 讨论 | 第31-34页 |
参考文献 | 第34-41页 |
致谢 | 第41-42页 |