| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 前言 | 第10-14页 |
| 1.1 HDACs分类 | 第11页 |
| 1.2 HDAC4结构和功能 | 第11-12页 |
| 1.3 细胞周期负性调控因子——p27kip | 第12-13页 |
| 1.3.1 p27kip1的生物学功能 | 第12页 |
| 1.3.2 p27kip1磷酸化蛋白的生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.4 实验的研究意义 | 第13页 |
| 1.5 实验技术路线 | 第13-14页 |
| 第2章 材料与方法 | 第14-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-19页 |
| 2.1.1 质粒和细胞 | 第14页 |
| 2.1.2 抗体 | 第14页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第14-15页 |
| 2.1.4 实验试剂及耗材 | 第15-17页 |
| 2.1.5 试剂及其配制一览表 | 第17-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 质粒的转化 | 第19页 |
| 2.2.2 质粒的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第20-21页 |
| 2.2.3.1 细胞复苏 | 第20页 |
| 2.2.3.2 细胞传代 | 第20页 |
| 2.2.3.3 细胞冻存 | 第20-21页 |
| 2.2.3.4 瞬时转染 | 第21页 |
| 2.2.4 RNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.5 cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.2.6 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第23-24页 |
| 2.2.6.1 荧光定量qRT-PCR | 第23页 |
| 2.2.6.2 半定量RT-PCR | 第23-24页 |
| 2.2.7 蛋白的提取 | 第24-26页 |
| 2.2.7.1 总蛋白的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.7.2 细胞核和细胞浆蛋白的提取 | 第25页 |
| 2.2.7.3 BCA蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
| 2.2.8 聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳(Western Blot,WB) | 第26-28页 |
| 2.2.9 CCK-8细胞活力实验 | 第28-29页 |
| 第3章 实验结果 | 第29-36页 |
| 3.1 热量限制对p27kip1的影响 | 第29-30页 |
| 3.2 HDAC4过表达对p27kip1的影响 | 第30-35页 |
| 3.2.1 HDAC4过表达对p27kip1mRNA表达的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.2 HDAC4过表达对p27kip1蛋白表达的影响 | 第31页 |
| 3.2.3 HDAC4过表达对p27kip1磷酸化蛋白表达的影响 | 第31-35页 |
| 3.3 HDAC4过表达对细胞活力的影响 | 第35-36页 |
| 第4章 讨论 | 第36-38页 |
| 第5章 结论 | 第38-39页 |
| 中英符号对照表 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
