中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
中英文缩略词 | 第8-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-27页 |
1.1 植物14-3-3蛋白的研究进展 | 第12-17页 |
1.1.1 14-3-3蛋白的结构 | 第12-13页 |
1.1.2 植物14-3-3蛋白的功能 | 第13-16页 |
1.1.3 14-3-3蛋白的调控机制 | 第16-17页 |
1.2 植物中MYB转录因子的研究进展 | 第17-25页 |
1.2.1 MYB转录因子的结构及分类 | 第17-18页 |
1.2.2 植物MYB转录因子的生物学功能 | 第18-25页 |
1.3 14-3-3蛋白与MYB转录因子 | 第25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第2章 与大豆14-3-3蛋白相互作用的MYB转录因子的鉴定及生物信息学分析 | 第27-43页 |
2.1 试验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 菌株及载体 | 第27页 |
2.1.3 主要试剂 | 第27页 |
2.1.4 引物 | 第27-28页 |
2.2 试验方法 | 第28-32页 |
2.2.1 酵母双杂交实验 | 第28-29页 |
2.2.2 双分子荧光互补实验 | 第29-31页 |
2.2.3 生物信息学分析 | 第31-32页 |
2.3 结果 | 第32-41页 |
2.3.1 酵母双杂交实验鉴定SGF141与MYB转录因子间的互作关系 | 第32-33页 |
2.3.2 烟草瞬时表达进一步验证互作关系 | 第33-37页 |
2.3.3 生物信息学分析 | 第37-41页 |
2.4 讨论 | 第41-42页 |
2.5 小结 | 第42-43页 |
第3章 GmMYB133和GmMYB138a在大豆各组织中及不同非生物胁迫下的表达模式分析 | 第43-52页 |
3.1 试验材料 | 第43-44页 |
3.1.1 植物材料 | 第43页 |
3.1.2 主要试剂 | 第43页 |
3.1.3 实时定量PCR引物 | 第43-44页 |
3.2 试验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 实时定量分析 | 第44-45页 |
3.2.2 异黄酮提取及含量测定 | 第45-46页 |
3.3 结果 | 第46-50页 |
3.3.1 GmMYB133和GmMYB138a在大豆各组织中的表达分析及不同时期胚中异黄酮含量测定 | 第46-48页 |
3.3.2 GmMYB133和GmMYB138a在不同非生物胁迫下的表达模式分析 | 第48-50页 |
3.4 讨论 | 第50-51页 |
3.5 小结 | 第51-52页 |
第4章 GmMYB133过表达毛根中异黄酮合成关键酶基因表达量及异黄酮含量测定分析 | 第52-66页 |
4.1 试验材料 | 第52-53页 |
4.1.1 植物材料 | 第52页 |
4.1.2 菌株及载体 | 第52页 |
4.1.3 主要试剂及实验材料 | 第52-53页 |
4.1.4 引物 | 第53页 |
4.2 试验方法 | 第53-60页 |
4.2.1 大豆毛根的获得 | 第53-56页 |
4.2.2 大豆毛根RNA提取及基因表达分析 | 第56-57页 |
4.2.3 大豆毛根异黄酮提取及含量测定 | 第57页 |
4.2.4 ChIP-qPCR分析 | 第57-60页 |
4.3 结果 | 第60-64页 |
4.3.1 载体构建 | 第60页 |
4.3.2 荧光显微镜下观察大豆毛根中荧光蛋白的发光情况 | 第60-61页 |
4.3.3 大豆毛根RNA提取及异黄酮合成关键酶基因表达量分析 | 第61-62页 |
4.3.4 GmMYB133过表达对毛根中异黄酮含量的影响 | 第62-63页 |
4.3.5 GmMYB133不能识别GmMYB176在CHS8启动子区域的结合位点 | 第63-64页 |
4.4 讨论 | 第64-65页 |
4.5 小结 | 第65-66页 |
第5章 GmMYB133在拟南芥中的异源过表达分析 | 第66-82页 |
5.1 试验材料 | 第66页 |
5.1.1 植物材料 | 第66页 |
5.1.2 菌株及载体 | 第66页 |
5.1.3 主要试剂 | 第66页 |
5.2 试验方法 | 第66-71页 |
5.2.1 拟南芥遗传转化 | 第66-68页 |
5.2.2 转化植株筛选鉴定及表型分析 | 第68页 |
5.2.3 转录组测序 | 第68-69页 |
5.2.4 花青苷及木质素含量测定 | 第69-70页 |
5.2.5 ChIP-qPCR分析 | 第70-71页 |
5.3 结果与分析 | 第71-79页 |
5.3.1 pEarleyGate101-GmMYB133过表达载体的转化 | 第71-72页 |
5.3.2 GmMYB133在拟南芥中的异源过表达 | 第72-74页 |
5.3.3 GmMYB133过表达引起次生代谢相关基因的上调 | 第74-77页 |
5.3.4 GmMYB133过表达促进了幼苗中花青苷及木质素的积累 | 第77-79页 |
5.3.5 ChIP-qPCR探究GmMYB133在拟南芥中的靶标基因 | 第79页 |
5.4 讨论 | 第79-81页 |
5.5 小结 | 第81-82页 |
第6章 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-95页 |
作者简介 | 第95-96页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第96-97页 |
致谢 | 第97页 |