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与大豆14-3-3蛋白相互作用的MYB转录因子的鉴定及在次生代谢中的功能分析

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
中英文缩略词第8-12页
第1章 文献综述第12-27页
    1.1 植物14-3-3蛋白的研究进展第12-17页
        1.1.1 14-3-3蛋白的结构第12-13页
        1.1.2 植物14-3-3蛋白的功能第13-16页
        1.1.3 14-3-3蛋白的调控机制第16-17页
    1.2 植物中MYB转录因子的研究进展第17-25页
        1.2.1 MYB转录因子的结构及分类第17-18页
        1.2.2 植物MYB转录因子的生物学功能第18-25页
    1.3 14-3-3蛋白与MYB转录因子第25页
    1.4 本研究的目的和意义第25-27页
第2章 与大豆14-3-3蛋白相互作用的MYB转录因子的鉴定及生物信息学分析第27-43页
    2.1 试验材料第27-28页
        2.1.1 植物材料第27页
        2.1.2 菌株及载体第27页
        2.1.3 主要试剂第27页
        2.1.4 引物第27-28页
    2.2 试验方法第28-32页
        2.2.1 酵母双杂交实验第28-29页
        2.2.2 双分子荧光互补实验第29-31页
        2.2.3 生物信息学分析第31-32页
    2.3 结果第32-41页
        2.3.1 酵母双杂交实验鉴定SGF141与MYB转录因子间的互作关系第32-33页
        2.3.2 烟草瞬时表达进一步验证互作关系第33-37页
        2.3.3 生物信息学分析第37-41页
    2.4 讨论第41-42页
    2.5 小结第42-43页
第3章 GmMYB133和GmMYB138a在大豆各组织中及不同非生物胁迫下的表达模式分析第43-52页
    3.1 试验材料第43-44页
        3.1.1 植物材料第43页
        3.1.2 主要试剂第43页
        3.1.3 实时定量PCR引物第43-44页
    3.2 试验方法第44-46页
        3.2.1 实时定量分析第44-45页
        3.2.2 异黄酮提取及含量测定第45-46页
    3.3 结果第46-50页
        3.3.1 GmMYB133和GmMYB138a在大豆各组织中的表达分析及不同时期胚中异黄酮含量测定第46-48页
        3.3.2 GmMYB133和GmMYB138a在不同非生物胁迫下的表达模式分析第48-50页
    3.4 讨论第50-51页
    3.5 小结第51-52页
第4章 GmMYB133过表达毛根中异黄酮合成关键酶基因表达量及异黄酮含量测定分析第52-66页
    4.1 试验材料第52-53页
        4.1.1 植物材料第52页
        4.1.2 菌株及载体第52页
        4.1.3 主要试剂及实验材料第52-53页
        4.1.4 引物第53页
    4.2 试验方法第53-60页
        4.2.1 大豆毛根的获得第53-56页
        4.2.2 大豆毛根RNA提取及基因表达分析第56-57页
        4.2.3 大豆毛根异黄酮提取及含量测定第57页
        4.2.4 ChIP-qPCR分析第57-60页
    4.3 结果第60-64页
        4.3.1 载体构建第60页
        4.3.2 荧光显微镜下观察大豆毛根中荧光蛋白的发光情况第60-61页
        4.3.3 大豆毛根RNA提取及异黄酮合成关键酶基因表达量分析第61-62页
        4.3.4 GmMYB133过表达对毛根中异黄酮含量的影响第62-63页
        4.3.5 GmMYB133不能识别GmMYB176在CHS8启动子区域的结合位点第63-64页
    4.4 讨论第64-65页
    4.5 小结第65-66页
第5章 GmMYB133在拟南芥中的异源过表达分析第66-82页
    5.1 试验材料第66页
        5.1.1 植物材料第66页
        5.1.2 菌株及载体第66页
        5.1.3 主要试剂第66页
    5.2 试验方法第66-71页
        5.2.1 拟南芥遗传转化第66-68页
        5.2.2 转化植株筛选鉴定及表型分析第68页
        5.2.3 转录组测序第68-69页
        5.2.4 花青苷及木质素含量测定第69-70页
        5.2.5 ChIP-qPCR分析第70-71页
    5.3 结果与分析第71-79页
        5.3.1 pEarleyGate101-GmMYB133过表达载体的转化第71-72页
        5.3.2 GmMYB133在拟南芥中的异源过表达第72-74页
        5.3.3 GmMYB133过表达引起次生代谢相关基因的上调第74-77页
        5.3.4 GmMYB133过表达促进了幼苗中花青苷及木质素的积累第77-79页
        5.3.5 ChIP-qPCR探究GmMYB133在拟南芥中的靶标基因第79页
    5.4 讨论第79-81页
    5.5 小结第81-82页
第6章 结论第82-83页
参考文献第83-95页
作者简介第95-96页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第96-97页
致谢第97页

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