摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 调控毛囊生长发育信号通路研究进展 | 第11-24页 |
1.1 前言 | 第11-12页 |
1.2 毛囊生理学 | 第12-13页 |
1.3 调控毛囊发育相关通路研究进展 | 第13-22页 |
1.3.1 Wnt/β-catenin 信号通路 | 第13-20页 |
1.3.2 BMP 信号通路 | 第20-21页 |
1.3.3 SHH 信号通路 | 第21页 |
1.3.4 Notch 信号通路 | 第21-22页 |
1.4 研究问题的提出及拟解决的问题 | 第22-24页 |
1.4.1 研究问题的提出 | 第22页 |
1.4.2 本文拟研究的问题 | 第22-24页 |
第二章 Wnt3 基因 CDS 区克隆、生物信息分析及原核表达 | 第24-41页 |
2.1 材料与试剂 | 第24页 |
2.1.1 试验材料 | 第24页 |
2.1.2 实验试剂与菌株 | 第24页 |
2.1.3 主要实验仪器 | 第24页 |
2.2 Wnt3 基因 CDS 区克隆 | 第24-28页 |
2.2.1 皮肤组织 RNA 的提取及质量、浓度检测 | 第24页 |
2.2.2 第一链 cDNA 的合成 | 第24页 |
2.2.3 Wnt3 基因 CDS 区克隆引物设计 | 第24-25页 |
2.2.4 RT-PCR 扩增绒山羊 Wnt3 基因 CDS 区 | 第25-26页 |
2.2.5 绒山羊 Wnt3 基因 CDS 区的电泳检测 | 第26页 |
2.2.6 绒山羊 Wnt3 基因 CDS 区克隆及测序 | 第26-27页 |
2.2.7 Wnt3 基因 CDS 区及编码蛋白质生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.3 绒山羊 Wnt3 基因编码蛋白的原核表达 | 第28-29页 |
2.3.1 Wnt3 原核表达引物的设计 | 第28页 |
2.3.2 重组质粒的构建 | 第28-29页 |
2.3.3 绒山羊 Wnt3 基因编码蛋白的诱导原核表达及检测 | 第29页 |
2.4 结果与分析 | 第29-38页 |
2.4.1 皮肤组织总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
2.4.2 Wnt3 基因 CDS 区的克隆 | 第30-31页 |
2.4.3 绒山羊 Wnt3 基因及其编码氨基酸生物信息学分析 | 第31-37页 |
2.4.4 Wnt3 基因的原核表达 | 第37-38页 |
2.5 讨论 | 第38-40页 |
2.6 小结 | 第40-41页 |
第三章 Wnt/β-catenin 信号通路上游基因在绒毛周期性再生及着色过程中表达分析 | 第41-47页 |
3.1 材料和方法 | 第41-43页 |
3.1.1 样品采集 | 第41页 |
3.1.2 主要试剂与仪器 | 第41页 |
3.1.3 皮肤组织总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成 | 第41-42页 |
3.1.4 Wnt/β-catenin 通路上游基因在不同月份绒山羊皮肤组织中的表达 | 第42页 |
3.1.5 Wnt/β-catenin 通路上游基因在不同毛色绒山羊皮肤组织中的表达 | 第42页 |
3.1.6 数据统计分析 | 第42-43页 |
3.2 结果与分析 | 第43-44页 |
3.2.1 Wnt/β-catenin 信号通路上游基因在不同月份绒山羊皮肤中的表达 | 第43页 |
3.2.2 Wnt/β-catenin 信号通路上游基因在不同毛色绒山羊皮肤中的表达 | 第43-44页 |
3.3 讨论 | 第44-46页 |
3.3.1 Wnt/β-catenin 信号通路在绒山羊绒毛周期性再生的作用 | 第44-45页 |
3.3.2 Wnt/β-catenin 信号通路在绒山羊绒毛着色过程中的作用 | 第45-46页 |
3.4 小结 | 第46-47页 |
第四章 MITF、ASIP 及 TYR 家族基因在黑色和白色绒山羊皮肤组织中的表达 | 第47-53页 |
4.1 材料和方法 | 第47-48页 |
4.1.1 试验材料 | 第47-48页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第48页 |
4.1.3 皮肤组织总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成 | 第48页 |
4.1.4 MITF、ASIP 及 TYR 家族等基因在不同毛色绒山羊皮肤组织中的表达 | 第48页 |
4.1.5 数据统计分析 | 第48页 |
4.2 结果与分析 | 第48-49页 |
4.2.1 皮肤组织 RNA 的提取 | 第48-49页 |
4.2.2 MITF、ASIP 及 TYR 家族基因在不同毛色绒山羊皮肤组织中的表达 | 第49页 |
4.3 讨论 | 第49-52页 |
4.3.1 MITF 基因 mRNA 表达量与绒毛颜色关系 | 第49-50页 |
4.3.2 ASIP 基因 mRNA 表达量与绒毛颜色关系 | 第50-51页 |
4.3.3 TYR 家族基因 mRNA 表达与绒毛颜色关系 | 第51-52页 |
4.4 小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
5.1 结论 | 第53页 |
5.2 需要进一步研究的问题 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录 | 第60-65页 |
附录 1 皮肤组织 RNA 的提取 | 第60页 |
附录 2 cDNA 第一链合成 | 第60-61页 |
附录 3 凝胶回收 | 第61-62页 |
附录 4 感受态细胞制备 | 第62页 |
附录 5 TA 克隆 | 第62页 |
附录 6 质粒提取 | 第62-63页 |
附录 7 诱导原核表达 | 第63-64页 |
附录 8 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |