| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 综述 | 第14-32页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征综述 | 第14-25页 |
| 1.1.1 病原学 | 第14-15页 |
| 1.1.2 基因组结构与功能 | 第15-17页 |
| 1.1.3 基因多样性及变异性 | 第17-18页 |
| 1.1.4 PRRSV的致病性特点 | 第18-20页 |
| 1.1.5 PRRSV检测技术及其研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2 猪瘟概述 | 第25-30页 |
| 1.2.1 病原学 | 第25页 |
| 1.2.2 病毒基因组结构 | 第25-27页 |
| 1.2.3 CSFV检测方法 | 第27-30页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第30-31页 |
| 1.4 技术路线 | 第31-32页 |
| 第二章 同时检测美洲型、欧洲型PRRSV多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及应用 | 第32-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 病毒 | 第32-33页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-39页 |
| 2.2.1 引物和探针的设计 | 第33-34页 |
| 2.2.2 重组质粒标准品的构建 | 第34-37页 |
| 2.2.3 TaqMan荧光定量PCR条件最优化 | 第37-38页 |
| 2.2.4 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第38页 |
| 2.2.5 TaqMan荧光定量PCR特异性试验 | 第38页 |
| 2.2.6 TaqMan荧光定量PCR敏感性试验 | 第38页 |
| 2.2.7 TaqMan荧光定量PCR重复性试验 | 第38页 |
| 2.2.8 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第38-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-45页 |
| 2.3.1 重组质粒标准品的制备 | 第39页 |
| 2.3.2 TaqMan荧光定量PCR最佳反应条件确定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第40-41页 |
| 2.3.4 TaqMan荧光定量PCR特异性分析 | 第41-42页 |
| 2.3.5 TaqMan荧光定量PCR敏感性分析 | 第42-44页 |
| 2.3.6 TaqMan荧光定量PCR重复性分析 | 第44-45页 |
| 2.3.7 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 同时检测PRRSV美洲型经典株、变异株和TJM-F92疫苗株的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及应用 | 第48-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第49页 |
| 3.1.1 病毒 | 第49页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第49页 |
| 3.1.3 主要实验仪器 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-51页 |
| 3.2.1 引物和探针的设计 | 第49-50页 |
| 3.2.2 重组质粒标准品的构建 | 第50页 |
| 3.2.3 TaqMan荧光定量PCR条件最优化 | 第50页 |
| 3.2.4 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第50-51页 |
| 3.2.5 TaqMan荧光定量PCR特异性试验 | 第51页 |
| 3.2.6 TaqMan荧光定量PCR敏感性试验 | 第51页 |
| 3.2.7 TaqMan荧光定量PCR重复性试验 | 第51页 |
| 3.2.8 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第51页 |
| 3.3 结果 | 第51-59页 |
| 3.3.1 重组质粒标准品的制备 | 第51-52页 |
| 3.3.2 TaqMan荧光定量PCR最佳反应条件确定 | 第52页 |
| 3.3.3 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第52-54页 |
| 3.3.4 TaqMan荧光定量PCR特异性分析 | 第54-55页 |
| 3.3.5 TaqMan荧光定量PCR敏感性分析 | 第55-57页 |
| 3.3.6 TaqMan荧光定量PCR重复性分析 | 第57-58页 |
| 3.3.7 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第58-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 第四章 同时检测美洲型、欧洲型PRRSV以及CSFV多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及应用 | 第61-74页 |
| 4.1 实验材料 | 第61-62页 |
| 4.1.1 病毒 | 第61页 |
| 4.1.2 主要实验试剂 | 第61页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第61-62页 |
| 4.2 实验方法 | 第62-64页 |
| 4.2.1 引物和探针的设计 | 第62页 |
| 4.2.2 重组质粒标准品的构建 | 第62-63页 |
| 4.2.3 TaqMan荧光定量PCR条件最优化 | 第63页 |
| 4.2.4 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第63页 |
| 4.2.5 TaqMan荧光定量PCR特异性试验 | 第63页 |
| 4.2.6 TaqMan荧光定量PCR敏感性试验 | 第63页 |
| 4.2.7 TaqMan荧光定量PCR重复性试验 | 第63页 |
| 4.2.8 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第63-64页 |
| 4.3 结果 | 第64-72页 |
| 4.3.1 重组质粒标准品的制备 | 第64页 |
| 4.3.2 TaqMan荧光定量PCR最佳反应条件确定 | 第64-65页 |
| 4.3.3 TaqMan荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第65-66页 |
| 4.3.4 TaqMan荧光定量PCR特异性分析 | 第66-68页 |
| 4.3.5 TaqMan荧光定量PCR敏感性分析 | 第68-69页 |
| 4.3.6 TaqMan荧光定量PCR重复性分析 | 第69-71页 |
| 4.3.7 多重TaqMan荧光定量PCR的应用 | 第71-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及专利情况 | 第88-89页 |
