摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
第一部分 :长链非编码RNALoc554202在结直肠癌组织中高表达与奥沙利铂化疗不良预后相关 | 第15-32页 |
1 前言 | 第15页 |
2 材料与方法 | 第15-22页 |
2.1 伦理审查 | 第15-16页 |
2.2 实验材料 | 第16-18页 |
2.2.1 样本筛选 | 第16页 |
2.2.2 临床病理参数及随访 | 第16-17页 |
2.2.3 主要试剂 | 第17页 |
2.2.4 主要仪器 | 第17-18页 |
2.3 实验方法 | 第18-21页 |
2.3.1 原位杂交相关试剂配制 | 第18页 |
2.3.2 组织样本获取和保存 | 第18-19页 |
2.3.3 HE染色 | 第19页 |
2.3.4 组织芯片(TMA) | 第19页 |
2.3.5 原位杂交(ISH) | 第19-20页 |
2.3.6 H-score评分 | 第20-21页 |
2.4 统计分析 | 第21-22页 |
3 结果 | 第22-30页 |
3.1 结直肠癌样本病理特征描述 | 第22-25页 |
3.2 ROC曲线法描述Loc554202在结直肠癌组织中的表达水平 | 第25-26页 |
3.3 Loc554202表达水平与DFS和OS存在关联性 | 第26-28页 |
3.4 Loc554202表达水平与生存期存在关联性 | 第28-30页 |
4 讨论 | 第30-31页 |
5 结论 | 第31-32页 |
第二部分 :宿主基因长链非编码RNALoc554202调控miR-31上调结直肠癌细胞对奥沙利铂的耐药性 | 第32-46页 |
1 前言 | 第32页 |
2 材料与方法 | 第32-39页 |
2.1 实验材料 | 第32-36页 |
2.1.1 细胞选择 | 第33页 |
2.1.2 主要试剂 | 第33-35页 |
2.1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-39页 |
2.2.1 相关试剂配制 | 第36-37页 |
2.2.2 细胞培养、冻存与复苏 | 第37页 |
2.2.3 转染 | 第37-38页 |
2.2.4 RNA提取 | 第38页 |
2.2.5 qRT-PCR | 第38页 |
2.2.6 CCK-8 | 第38-39页 |
2.3 统计分析 | 第39页 |
3 结果 | 第39-43页 |
3.1 Loc554202和miR-31在耐药细胞株中相对高表达 | 第39-40页 |
3.2 Loc554202可调控miR-31的表达水平 | 第40-42页 |
3.2.1 构建Loc554202和miR-31的过表达/沉默细胞模型 | 第40-41页 |
3.2.2 Loc554202过表达/沉默可以促进/抑制miR-31的表达 | 第41-42页 |
3.3 Loc554202过表达/沉默可以增加/减少结直肠癌细胞对奥沙利铂耐药性 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
第三部分 :宿主基因Loc554202通过调控miR-31降解下调ABCB9促进结直肠癌细胞耐药性 | 第46-58页 |
1 前言 | 第46-47页 |
2 材料与方法 | 第47-50页 |
2.2 实验材料 | 第47页 |
2.2.1 细胞选择 | 第47页 |
2.2.2 主要试剂 | 第47页 |
2.2.3 主要仪器 | 第47页 |
2.3 实验方法 | 第47-50页 |
2.3.1 相关试剂配制 | 第47页 |
2.3.2 细胞培养、冻存与复苏 | 第47页 |
2.3.3 转染 | 第47页 |
2.3.4 RNA提取 | 第47-48页 |
2.3.5 qRT-PCR | 第48页 |
2.3.6 WesternBlot | 第48-49页 |
2.3.7 Lucifer萤光素酶报告实验 | 第49-50页 |
2.4 统计分析 | 第50页 |
3 结果 | 第50-56页 |
3.1 Loc554202过表达/沉默导致ABCB9表达水平下调/上调 | 第50-52页 |
3.2 miR-31过表达/沉默导致ABCB9表达水平下调/上调 | 第52-54页 |
3.3 miR-31与ABCB9在3’-UTR区存在剪切结合 | 第54-55页 |
3.4 Loc554202通过miR-31的表达改变调节ABCB9的表达水平 | 第55-56页 |
4 讨论 | 第56-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
本研究创新性的自我评价 | 第65-66页 |
综述 | 第66-77页 |
参考文献 | 第71-77页 |
攻读学位期间取得的科研成果 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简历 | 第79页 |