| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 铅污染概述 | 第10-14页 |
| 1.1.1 铅污染的来源与危害 | 第10-12页 |
| 1.1.2 铅离子的检测 | 第12-14页 |
| 1.2 生物法检测重金属 | 第14-17页 |
| 1.2.1 生物传感器 | 第14-15页 |
| 1.2.2 全细胞生物传感器 | 第15-16页 |
| 1.2.3 全细胞生物探针检测重金属离子 | 第16-17页 |
| 1.3 金属铅离子的检测机制 | 第17-21页 |
| 1.3.1 特异性金属结合蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.2 PbrR蛋白及pbr操纵子 | 第18-19页 |
| 1.3.3 铅离子细胞生物传感器 | 第19-21页 |
| 1.4 本课题主要研究内容及研究意义 | 第21-24页 |
| 第2章 传感器的基因挖掘与电路设计 | 第24-34页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料与方法 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验质粒与菌株 | 第24页 |
| 2.2.2 溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.2.3 培养条件 | 第25-26页 |
| 2.3 主要仪器与试剂 | 第26-27页 |
| 2.3.1 主要仪器 | 第26页 |
| 2.3.2 主要试剂 | 第26-27页 |
| 2.4 基因挖掘与模块组装设计 | 第27-29页 |
| 2.4.1 核心基因模块挖掘 | 第27-29页 |
| 2.4.2 基因元件组装设计 | 第29页 |
| 2.4.3 传感器基因电路设计 | 第29页 |
| 2.5 基因模块合成与引物设计 | 第29-30页 |
| 2.5.1 基因模块设计与合成 | 第29页 |
| 2.5.2 基因组装设计与引物合成 | 第29-30页 |
| 2.6 结果与讨论 | 第30-33页 |
| 2.6.1 铅离子生物传感器基因电路设计 | 第30页 |
| 2.6.2 铅离子生物传感器基因序列设计 | 第30-31页 |
| 2.6.3 铅离子生物传感器的引物设计 | 第31-33页 |
| 2.7 小结 | 第33-34页 |
| 第3章 铅离子生物传感器的组装与构建 | 第34-50页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 材料与方法 | 第34页 |
| 3.2.1 质粒与菌株 | 第34页 |
| 3.2.2 溶液配制 | 第34页 |
| 3.2.3 培养条件 | 第34页 |
| 3.3 主要仪器与试剂 | 第34-37页 |
| 3.3.1 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3.3.2 主要试剂 | 第35-37页 |
| 3.4 基因模块扩增与组装 | 第37-44页 |
| 3.4.1 基因模块扩增与纯化回收 | 第37-40页 |
| 3.4.2 SOEPCR组装 | 第40-41页 |
| 3.4.3 双酶切处理及纯化 | 第41-42页 |
| 3.4.4 质粒的连接转化 | 第42-44页 |
| 3.5 铅离子生物传感器的构建 | 第44-46页 |
| 3.5.1 重组子验证及测序 | 第44-45页 |
| 3.5.2 双酶切连接构建人工质粒 | 第45页 |
| 3.5.3 人工质粒导入底盘细胞 | 第45-46页 |
| 3.6 结果与讨论 | 第46-48页 |
| 3.6.1 铅离子生物传感器基因电路组装 | 第46页 |
| 3.6.2 铅离子生物传感器人工质粒构建 | 第46-48页 |
| 3.6.3 铅离子生物传感器底盘构建 | 第48页 |
| 3.7 小结 | 第48-50页 |
| 第4章 铅离子生物传感器的性能测试 | 第50-68页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 生物传感器底盘细胞 | 第50页 |
| 4.2.2 溶液配制 | 第50-51页 |
| 4.2.3 培养条件 | 第51页 |
| 4.3 主要仪器与试剂 | 第51-53页 |
| 4.3.1 主要仪器 | 第51-52页 |
| 4.3.2 主要试剂 | 第52-53页 |
| 4.4 荧光显微镜检验底盘细胞 | 第53-54页 |
| 4.4.1 底盘细胞活化与培养 | 第53页 |
| 4.4.2 取样及玻片制备 | 第53页 |
| 4.4.3 荧光显微镜性能验证 | 第53-54页 |
| 4.5 金属铅离子生物传感器的灵敏度测定 | 第54-57页 |
| 4.5.1 生物传感器底盘细胞铅离子生长抑制情况测定 | 第54页 |
| 4.5.2 铅离子生物传感器荧光响应时间测定 | 第54-56页 |
| 4.5.3 铅离子最低及最高检测限的测定 | 第56页 |
| 4.5.4 铅离子生物传感器铅离子浓度-荧光响应测定 | 第56-57页 |
| 4.6 结果与讨论 | 第57-66页 |
| 4.6.1 铅离子生物传感器的显微镜响应鉴定 | 第57-58页 |
| 4.6.2 生物传感器底盘细胞铅离子生长抑制情况测定 | 第58-60页 |
| 4.6.3 铅离子生物传感器荧光响应时间测定 | 第60-61页 |
| 4.6.4 铅离子最低及最高检测限的测定 | 第61-64页 |
| 4.6.5 铅离子生物传感器的铅离子浓度-荧光响应测定 | 第64-66页 |
| 4.7 小结 | 第66-68页 |
| 第5章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 5.1 结论 | 第68-69页 |
| 5.2 展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
