| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 螺旋霉素 | 第10-11页 |
| 1.1.1 螺旋霉素的结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 螺旋霉素的抑菌机理和作用 | 第11页 |
| 1.2 螺旋霉素的生物合成 | 第11-14页 |
| 1.2.1 代谢方面的研究 | 第11页 |
| 1.2.2 基因方面的研究 | 第11-14页 |
| 1.2.3 螺旋霉素生物合成过程中的主要代谢产物及有关杂质 | 第14页 |
| 1.3 影响螺旋霉素合成的因素 | 第14-18页 |
| 1.3.1 菌种特性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 碳源的影响 | 第15-16页 |
| 1.3.3 氮源的影响 | 第16-17页 |
| 1.3.4 前体的影响 | 第17页 |
| 1.3.5 其他因素的影响 | 第17-18页 |
| 1.4 课题立项依据与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第20页 |
| 2.2 培养方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 摇瓶发酵 | 第20-21页 |
| 2.2.2 15L罐放大培养 | 第21页 |
| 2.3 实验结果的测定 | 第21-31页 |
| 2.3.1 杯碟法测定螺旋霉素的生物效价 | 第21-22页 |
| 2.3.2 高效液相色谱(HPLC)法测定发酵液组分 | 第22-23页 |
| 2.3.3 高效液相色谱(HPLC)法测定发酵液中有机酸含量 | 第23-25页 |
| 2.3.4 胞内ATP的测定 | 第25-26页 |
| 2.3.5 发酵液中糖含量的测定 | 第26-27页 |
| 2.3.6 发酵液中氨氮含量的测定 | 第27页 |
| 2.3.7 菌浓的测定 | 第27页 |
| 2.3.8 菌体的处理与保存 | 第27页 |
| 2.3.9 RNA样品的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.10 RNA抽提结果的检测 | 第28-29页 |
| 2.3.11 反转录反应 | 第29页 |
| 2.3.12 荧光定量PCR | 第29-31页 |
| 第三章 不同工艺对螺旋霉素发酵的影响 | 第31-47页 |
| 3.1 不同工艺对螺旋霉素生物合成的影响 | 第31-33页 |
| 3.2 丙三醇添加时间和添加浓度的优化 | 第33-36页 |
| 3.2.1 种龄对螺旋霉素生物合成的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.2 丙三醇添加时间的优化 | 第34-35页 |
| 3.2.3 丙三醇添加浓度的优化 | 第35页 |
| 3.2.4 最优添加浓度和添加时间下丙三醇对螺旋霉素合成的影响 | 第35-36页 |
| 3.3 发酵罐放大实验 | 第36-43页 |
| 3.3.1 不同添加时间对15L发酵罐放大结果的影响 | 第36-38页 |
| 3.3.2 添加丙三醇对发酵过程的影响 | 第38-41页 |
| 3.3.3 丙三醇对发酵过程杂质组分的影响 | 第41-43页 |
| 3.4 丙三醇对发酵过程有机酸的影响 | 第43-45页 |
| 3.5 小结 | 第45-47页 |
| 第四章 硝酸铵对螺旋霉素发酵的影响 | 第47-60页 |
| 4.1 硝酸铵浓度对螺旋霉素发酵的影响 | 第47-49页 |
| 4.2 过量NH_4~+和NO_3~-对发酵结果的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 硝酸铵对发酵过程的影响 | 第50-51页 |
| 4.4 硝酸铵对糖耗速率和氨氮耗速的影响 | 第51-53页 |
| 4.5 硝酸铵对发酵过程ATP的影响 | 第53页 |
| 4.6 硝酸铵对发酵过程杂质组分的影响 | 第53-55页 |
| 4.7 硝酸铵对发酵过程有机酸的影响 | 第55-57页 |
| 4.8 添加丙三醇对异常代谢的影响 | 第57-58页 |
| 4.9 小结 | 第58-60页 |
| 第五章 糊精对螺旋霉素发酵的影响 | 第60-71页 |
| 5.1 糊精对螺旋霉素发酵的影响 | 第60-61页 |
| 5.2 糊精对发酵过程的影响 | 第61-62页 |
| 5.3 糊精对糖耗速率和还原糖/总糖的影响 | 第62-63页 |
| 5.4 糊精对发酵过程胞内ATP的影响 | 第63页 |
| 5.5 糊精对发酵过程杂质组分的影响 | 第63-65页 |
| 5.6 糊精对发酵过程有机酸的影响 | 第65-67页 |
| 5.7 两种糊精的组成分析 | 第67-69页 |
| 5.7.1 两种糊精水溶部分的分析 | 第67-68页 |
| 5.7.2 两种糊精酶溶部分的分析 | 第68-69页 |
| 5.8 小结 | 第69-71页 |
| 第六章 糊精对有关基因表达的影响 | 第71-79页 |
| 6.1 合成培养基中糊精对发酵过程的影响 | 第71-73页 |
| 6.2 电泳结果 | 第73页 |
| 6.3 荧光定量PCR引物设计 | 第73-74页 |
| 6.4 两种糊精对生二素链霉菌部分基因转录水平的差异分析 | 第74-78页 |
| 6.4.1 srm10的基因表达 | 第74-75页 |
| 6.4.2 srm19的基因表达 | 第75页 |
| 6.4.3 srm7和srm21的基因表达 | 第75-77页 |
| 6.4.4 srm20/srm33的对比 | 第77-78页 |
| 6.5 小结 | 第78-79页 |
| 第七章 结论与展望 | 第79-81页 |
| 7.1 结论 | 第79-80页 |
| 7.2 展望 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
