| 目录 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-14页 |
| Abstract | 第14-19页 |
| 缩略语表 | 第20-22页 |
| 1 前言 | 第22-30页 |
| 1.1 立题依据 | 第22-24页 |
| 1.2 弯曲杆菌大环内酯耐药性和适应性研究进展 | 第24-28页 |
| 1.3 研究内容和目标 | 第28-30页 |
| 2 实时荧光定量PCR方法检测弯曲杆菌大环内酯耐药突变 | 第30-44页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 材料方法 | 第31-37页 |
| 2.2.1 药品与试剂 | 第31页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2.3 菌株、培养基和培养条件 | 第32-33页 |
| 2.2.4 弯曲杆菌的药物敏感性测定 | 第33页 |
| 2.2.5 细菌基因组提取 | 第33-34页 |
| 2.2.6 弯曲杆菌耐药相关突变点的测序鉴定 | 第34页 |
| 2.2.7 标准质粒的构建与确证 | 第34-36页 |
| 2.2.8 TaqMan real-time PCR方法的建立 | 第36页 |
| 2.2.9 TaqMan real-time PCR的特异性考查 | 第36-37页 |
| 2.2.10 TaqMan real-time PCR的灵敏性考查 | 第37页 |
| 2.2.11 弯曲杆菌分离株的突变分析 | 第37页 |
| 2.3 结果 | 第37-42页 |
| 2.3.1 标准质粒的序列确证 | 第37-38页 |
| 2.3.2 TaqMan real-time PCR的特异性 | 第38-40页 |
| 2.3.3 TaqMan real-time PCR的灵敏性 | 第40-42页 |
| 2.3.4 弯曲杆菌分离株的耐药突变特性 | 第42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 3 高水平大环内酯耐药弯曲杆菌的体外获取和适应性分析 | 第44-56页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料方法 | 第44-47页 |
| 3.2.1 药物 | 第44-45页 |
| 3.2.2 主要仪器设备 | 第45页 |
| 3.2.3 菌种和培养条件 | 第45页 |
| 3.2.4 弯曲杆菌对泰乐菌素的MIC、MPC和MSW的测定 | 第45页 |
| 3.2.5 固定浓度诱导实验和稳定性考察 | 第45-46页 |
| 3.2.6 耐药相关突变分析 | 第46页 |
| 3.2.7 耐药菌体外适应性分析 | 第46-47页 |
| 3.3 结果 | 第47-53页 |
| 3.3.1 两株敏感菌对泰乐菌素的MIC、MPC和MSW值 | 第47页 |
| 3.3.2 体外诱导耐药菌的表型和基因突变类型 | 第47-51页 |
| 3.3.3 高水平耐药菌的体外相对适应性 | 第51-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-56页 |
| 4 大环内酯耐药弯曲杆菌的逐步产生过程及其适应性变化 | 第56-72页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 材料方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 药物 | 第56页 |
| 4.2.2 主要仪器设备 | 第56-57页 |
| 4.2.3 菌种和培养条件 | 第57页 |
| 4.2.4 弯曲杆菌对红霉素和泰乐菌素的MIC、MPC和MSW的测定 | 第57页 |
| 4.2.5 体外诱导实验 | 第57页 |
| 4.2.6 耐药相关突变分析 | 第57-58页 |
| 4.2.7 耐药菌体外适应性分析 | 第58-59页 |
| 4.3 结果 | 第59-68页 |
| 4.3.1 两株敏感菌对红霉素和泰乐菌素的MIC、MPC和MSW值 | 第59页 |
| 4.3.2 体外诱导过程中耐药菌的MIC和靶基因突变类型 | 第59-65页 |
| 4.3.3 耐药菌的体外相对适应性结果 | 第65-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-72页 |
| 5 大环内酯耐药空肠弯曲杆菌的基因表达差异分析 | 第72-140页 |
| 5.1 引言 | 第72-73页 |
| 5.2 材料方法 | 第73-82页 |
| 5.2.1 实验相关试剂 | 第73-75页 |
| 5.2.2 主要仪器设备 | 第75页 |
| 5.2.3 菌株和背景 | 第75-76页 |
| 5.2.4 细菌总RNA提取和纯化 | 第76-77页 |
| 5.2.5 差异表达基因的检测(基因芯片) | 第77-79页 |
| 5.2.6 差异表达基因的数据分析(基因芯片) | 第79-81页 |
| 5.2.7 部分差异基因的确证(Real-time RT-PCR、Western-blot) | 第81-82页 |
| 5.3 结果 | 第82-134页 |
| 5.3.1 细菌总RNA的质量和纯度鉴定 | 第82-84页 |
| 5.3.2 基因芯片的质量和数据处理的可靠性 | 第84-85页 |
| 5.3.3 68E3系列中耐药菌的基因表达差异 | 第85-105页 |
| 5.3.4 76E6系列中耐药菌的基因表达差异 | 第105-126页 |
| 5.3.5 68E3和76E6系列中差异基因的比较分析 | 第126-134页 |
| 5.4 讨论 | 第134-140页 |
| 5.4.1 弯曲杆菌对大环内酯类药物的耐药新机制 | 第135-137页 |
| 5.4.2 弯曲杆菌大环内酯类耐药相关适应性机制 | 第137-140页 |
| 6 全文创新性总结 | 第140-142页 |
| 7 弯曲杆菌对抗生素耐药性和适应性研究进展(综述) | 第142-164页 |
| 7.1 弯曲杆菌对重要抗生素的耐药性流行情况 | 第142-144页 |
| 7.2 弯曲杆菌对重要抗生素的耐药性产生和耐药机制 | 第144-157页 |
| 7.2.1 弯曲杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性产生和耐药机制 | 第144-148页 |
| 7.2.2 弯曲杆菌对大环内酯类药物的耐药性产生和耐药机制 | 第148-150页 |
| 7.2.3 弯曲杆菌对四环素类药物的耐药性产生和耐药机制 | 第150-152页 |
| 7.2.4 弯曲杆菌的多重耐药机制 | 第152-157页 |
| 7.3 耐药弯曲杆菌的适应性研究 | 第157-162页 |
| 7.3.1 氟喹诺酮类耐药弯曲杆菌的适应性 | 第158-159页 |
| 7.3.2 大环内酯类耐药弯曲杆菌的适应性 | 第159-161页 |
| 7.3.3 四环素类耐药弯曲杆菌的适应性 | 第161-162页 |
| 7.4 结论 | 第162-164页 |
| 参考文献 | 第164-182页 |
| 致谢 | 第182-183页 |
| 作者简介 | 第183-185页 |
| 答辩主要问题及回答 | 第185-189页 |
