摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-19页 |
1.1 研究问题的由来 | 第11-12页 |
1.2 文献综述 | 第12-18页 |
1.2.1 鸡胚性别鉴定及意义 | 第12页 |
1.2.2 鸟类性别决定研究进展 | 第12-14页 |
1.2.3 性腺处理及性反转 | 第14-15页 |
1.2.4 Sox9基因简介 | 第15-16页 |
1.2.5 P450arom基因简介 | 第16-18页 |
1.3 研究目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料和方法 | 第19-32页 |
2.1 实验材料 | 第19-25页 |
2.1.1 样品 | 第19-21页 |
2.1.1.1 鸡胚样品 | 第19页 |
2.1.1.2 引物设计 | 第19-21页 |
2.1.2 所用试剂和试剂盒 | 第21-24页 |
2.1.2.1 主要的试剂与试剂盒 | 第21页 |
2.1.2.2 主要试剂的配制 | 第21-24页 |
2.1.3 引物设计软件和鸡胚分析相关的软件 | 第24页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-32页 |
2.2.1 鸡胚性腺RNA提取及反转录、DNA的提取及性别鉴定 | 第25-27页 |
2.2.1.1 DNA的提取及性别鉴定 | 第25-26页 |
2.2.1.2 鸡胚性腺RNA的提取及反转录 | 第26-27页 |
2.2.2 时间表达谱分析 | 第27页 |
2.2.2.1 Sox9和P450arom基因引物的设计及扩增 | 第27页 |
2.2.2.2 Sox9和P450arom基因RT-PCR | 第27页 |
2.2.3 空间表达谱分析 | 第27-32页 |
2.2.3.1 整体原位杂交中Sox9和P450arom探针的合成 | 第27-31页 |
2.2.3.2 整体原位杂交步骤 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-41页 |
3.1 RNA提取以及鸡胚性别鉴定 | 第32-33页 |
3.1.1 鸡胚性别的鉴定 | 第32页 |
3.1.2 鸡胚性腺RNA提取 | 第32-33页 |
3.2 时间表达谱分析 | 第33-35页 |
3.2.1 Sox9基因在正常鸡胚中的半定量结果 | 第33-34页 |
3.2.2 P450arom基因在正常鸡胚中的半定量结果 | 第34-35页 |
3.3 空间表达模式分析 | 第35-41页 |
3.3.1 P450arom基因在正常鸡胚性腺中的表达 | 第35-38页 |
3.3.2 P450arom基因在处理(超表达Smarce1基因)鸡胚性腺中的表达 | 第38页 |
3.3.3 Sox9基因在正常鸡胚性腺中的表达 | 第38页 |
3.3.4 Sox9基因在处理(超表达Smarce1基因)鸡胚性腺中的表达 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-44页 |
4.1 P450AROM可作为鉴定早期鸡胚性腺发育的细胞标记 | 第41-42页 |
4.2 Sox9可作为鉴定早期鸡胚性腺发育的细胞标记 | 第42-43页 |
4.3 SMARCE1基因 | 第43-44页 |
5 小结 | 第44-45页 |
5.1 本研究所取得的结果 | 第44页 |
5.2 本研究创新之处 | 第44页 |
5.3 下一步需要研究的问题 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
在读期间发表的论文 | 第52页 |