| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 氧化应激与自由基 | 第14-17页 |
| 1.2.1 氧化应激的概念 | 第14页 |
| 1.2.2 自由基的概念 | 第14-15页 |
| 1.2.3 自由基的产生 | 第15页 |
| 1.2.4 生物体内存在的自由基分类 | 第15-16页 |
| 1.2.5 机体内氧化还原水平的检测 | 第16-17页 |
| 1.3 奶牛氧化应激产生的相关因素 | 第17-20页 |
| 1.3.1 疾病 | 第17页 |
| 1.3.2 生理代谢 | 第17-18页 |
| 1.3.3 环境因素 | 第18-19页 |
| 1.3.4 日粮因素损伤 | 第19-20页 |
| 1.4 氧化应激的危害 | 第20-23页 |
| 1.4.1 氧化应激与DNA损伤 | 第20-21页 |
| 1.4.2 氧化应激与细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.4.3 氧化应激与动物的繁殖性状 | 第21-22页 |
| 1.4.4 氧化应激与动物性产品的品质的影响 | 第22-23页 |
| 1.4.5 氧化应激与乳房炎 | 第23页 |
| 1.5 NOS基因的介绍 | 第23-24页 |
| 1.6 分子标记的发展简介 | 第24-26页 |
| 1.6.1 PCR-RFLP标记 | 第24-25页 |
| 1.6.2 SSCP标记 | 第25-26页 |
| 第二章 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第27-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 血液样品 | 第27页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 3.1.3 常用试剂 | 第28页 |
| 3.1.4 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| 3.2 试验方法 | 第29-37页 |
| 3.2.1 奶牛血液中提取DNA的方法一(经典氯仿异戊醇法) | 第29-30页 |
| 3.2.2 PCR扩增的引物的设计 | 第30-31页 |
| 3.2.3 PCR所采用的体系和程序 | 第31-32页 |
| 3.2.4 PCR产物的检验 | 第32页 |
| 3.2.5 SSCP(聚丙烯酰胺凝胶电泳实验) | 第32-33页 |
| 3.2.6 疑似突变样本的PCR产物的回收 | 第33-34页 |
| 3.2.7 序列测定 | 第34页 |
| 3.2.8 数据统计分析 | 第34-37页 |
| 第四章:结果与分析 | 第37-56页 |
| 4.1 NOS1外显子的PCR-SSCP检测和PCR-RLFP分析 | 第37-44页 |
| 4.1.1 NOS1外显子的PCR实验引物设计 | 第37页 |
| 4.1.2 NOS1基因目的片段PCR反应所采用的体系:总体系20ul | 第37-38页 |
| 4.1.3 NOS1基因目的片段PCR反应所采用的程序 | 第38页 |
| 4.1.4 NOS1 exon1第一段目的片段PCR—SSCP检测 | 第38-39页 |
| 4.1.5 NOS1 exon1第二段目的片段PCR—SSCP | 第39-41页 |
| 4.1.6 NOS1 exon1第一个突变位点的PCR-RFLP实验 | 第41-42页 |
| 4.1.7 NOS1 exon1第二个突变位点的PCR-RFLP实验 | 第42-43页 |
| 4.1.8 NOS1 exon1第三段段目的片段的SSCP检测 | 第43-44页 |
| 4.1.9 NOS1 exon1第四段目的片段的SSCP检测 | 第44页 |
| 4.2 NOS2 EXON27的PCR-SSCP检测 | 第44页 |
| 4.3 NOS3 EXON26的PCR-SSCP检测 | 第44-45页 |
| 4.4 统计分析 | 第45-52页 |
| 4.4.1 荷斯坦奶牛NOS1 exon1-HaeⅢ多态性位点在牛群中的基因型频率和等位基因频率及遗传相关分析 | 第45-46页 |
| 4.4.2 奶牛不同胎次之间生产性能的部分DHI指标的比较 | 第46-48页 |
| 4.4.3 NOS1 exon1-HaeⅢ不同基因型与季节性热应激的SCS变化之间的联系性 | 第48-49页 |
| 4.4.4 NOS1 exon1-Alu Ⅰ突变位点在牛群中的基因型频率和等位基因频率的结果如下 | 第49-50页 |
| 4.4.5 NOS1 exon1-Alu Ⅰ突变位点的不同基因型与生产性状指标之间的关联分析 | 第50-51页 |
| 4.4.6 NOS1 exon1-Alu Ⅰ不同基因型与季节性气温差异导致的SCS变化之间的联系性 | 第51-52页 |
| 4.5 讨论 | 第52-56页 |
| 4.5.1 试验的准备阶段工作对试验的影响 | 第52-53页 |
| 4.5.2 试验方法对试验结果的影响 | 第53页 |
| 4.5.3 NOS基因家族本身的性质 | 第53-54页 |
| 4.5.4 奶牛生产性能受多种因素影响 | 第54-55页 |
| 4.4.5 奶牛氧化应激模型的建立 | 第55-56页 |
| 第五章 影响奶牛生产寿命因素的初步研究 | 第56-62页 |
| 5.1 背景介绍 | 第56-58页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第58-59页 |
| 5.3 统计与分析 | 第59-60页 |
| 5.3.1 奶牛第一胎的的产犊状况对奶牛生产寿命的统计分析结果 | 第59页 |
| 5.3.2 奶牛的第一胎产犊的季节对奶牛生产寿命的影响 | 第59-60页 |
| 5.4 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 全文总结 | 第62-64页 |
| 6.1 主要的研究成果 | 第62页 |
| 6.2 主要创新点 | 第62页 |
| 6.3 后续的工作 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
