| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 黄瓜基因组学研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 植物的氮素营养 | 第12-13页 |
| 1.2.1 氮是重要的生命元素 | 第12页 |
| 1.2.2 植物响应低氮胁迫的生理与分子机制 | 第12-13页 |
| 1.3 植物丙二烯氧化物环化酶的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 AOC基因的克隆 | 第14页 |
| 1.3.2 丙二烯氧化物环化酶的分布 | 第14页 |
| 1.3.3 AOC基因的植物抗逆性 | 第14-15页 |
| 1.3.4 丙二烯氧化物环化酶的结构及作用机制 | 第15-16页 |
| 1.4 研究的目的及意义 | 第16页 |
| 1.5 试验主要技术路线 | 第16页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 菌株、质粒和试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1 低氮处理 | 第18页 |
| 2.2.2 黄瓜RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第19页 |
| 2.2.4 引物的设计合成 | 第19-20页 |
| 2.2.5 黄瓜CsAOC3基因全长克隆 | 第20-21页 |
| 2.2.6 质粒的提取 | 第21页 |
| 2.2.7 基因生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.8 CsAOC3基因的表达分析 | 第21页 |
| 2.2.9 过表达载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.10 拟南芥遗传转化及抗性植株筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.11 转基因拟南芥分子鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.12 对转基因拟南芥和野生型拟南芥功能分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-34页 |
| 3.1 CsAOC3基因的克隆 | 第26页 |
| 3.2 序列分析 | 第26-27页 |
| 3.3 CsAOC3系统进化分析 | 第27-28页 |
| 3.4 CsAOC3在低氮胁迫条件下的表达分析 | 第28页 |
| 3.5 CsAOC3的过量表达载体构建 | 第28-31页 |
| 3.5.1 目的基因的连接 | 第29页 |
| 3.5.2 菌落PCR验证 | 第29-30页 |
| 3.5.3 质粒双酶切验证 | 第30页 |
| 3.5.4 重组质粒导入根癌农杆菌 | 第30-31页 |
| 3.5.5 转基因拟南芥的获得 | 第31页 |
| 3.6 转CsAOC3基因拟南芥在不同程度氮胁迫下功能分析 | 第31-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 4.1 黄瓜响应低氮胁迫基因的序列结构 | 第34页 |
| 4.2 基因功能的初步探索 | 第34-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-44页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第44页 |