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南极寡营养细菌AT82脂多糖的提取纯化及其对三疣梭子蟹非特异性免疫的影响

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
英文缩写略表第13-14页
第一章 文献综述第14-23页
    1 脂多糖的结构第14-15页
    2 脂多糖中多糖结构研究方法的进展第15页
    3 细菌脂多糖和全疫苗对水产动物免疫保护的研究进展第15-17页
        3.1 细菌脂多糖对水产动物免疫保护的研究进展第15-16页
        3.2 全疫苗对水产动物免疫保护的研究进展第16-17页
            3.2.1 灭活疫苗第16页
            3.2.2 活疫苗第16-17页
    4 免疫增强剂提高蟹类抗病力的机制第17-20页
        4.1 三疣梭子蟹简介第17页
        4.2 蟹类的免疫特点第17-18页
        4.3 免疫增强剂的作用机制第18-19页
            4.3.1 增强氧化性杀菌机制第18页
            4.3.2 酚氧化酶原激活机制第18-19页
            4.3.3 增强血细胞吞噬作用机制第19页
        4.4 免疫增强剂在海洋经济蟹类养殖应用中存在的问题第19-20页
            4.4.1 免疫增强剂的局限性第19页
            4.4.2 免疫增强剂的使用方法第19-20页
            4.4.3 免疫增强剂的使用时间和剂量第20页
    5 研究的目的与意义第20-21页
        5.1 问题的提出第20页
        5.2 研究意义第20-21页
    6 主要研究内容与技术路线图第21-23页
        6.1 主要研究内容第21-22页
        6.2 技术路线图第22-23页
第二章 南极细菌AT82的液体培养与脂多糖的制备第23-30页
    1 前言第23页
    2 材料与方法第23-26页
        2.1 材料与仪器第23-24页
            2.1.1 菌株第23页
            2.1.2 基础培养基第23页
            2.1.3 试剂和仪器第23-24页
        2.2 试验方法第24-26页
            2.2.1 脂多糖的提取第24页
            2.2.2 脂多糖中多糖含量和蛋白质含量的测定第24页
            2.2.3 南极细菌AT82液体培养条件的优化第24-25页
            2.2.4 改良酚水法制备的粗脂多糖得率及蛋白质和糖含量的计算第25-26页
    3 结果与分析第26-29页
        3.1 测定蛋白质含量和多糖含量的回归方程第26页
        3.2 不同培养条件对AT82菌株生长量和脂多糖提取液中多糖含量的影响第26-27页
        3.3 正交试验第27-29页
        3.4 改良酚水法制备的粗脂多糖得率及其蛋白质和糖含量的测定第29页
    4 讨论第29页
    5 小结第29-30页
第三章 南极细菌AT82灭活疫苗及其粗脂多糖对三疣梭子蟹非特异性免疫的影响第30-44页
    1 前言第30-31页
    2 材料与方法第31-34页
        2.1 试验材料第31-32页
            2.1.1 样品与试剂第31页
            2.1.2 主要仪器第31页
            2.1.3 试验蟹分组与管理第31-32页
            2.1.4 免疫及血清样本的制备第32页
        2.2 梭子蟹血清中非特异性免疫指标的测定方法第32-34页
            2.2.1 抗菌活力的测定第32页
            2.2.2 溶菌酶活力的测定第32页
            2.2.3 酚氧化酶活力的测定第32页
            2.2.4 过氧化物酶相对活力的测定第32-33页
            2.2.5 超氧化物歧化酶活力的测定第33页
            2.2.6 酸性磷酸酶活力的测定第33页
            2.2.7 碱性磷酸酶活力的测定第33页
            2.2.8 血细胞吞噬活力的测定第33-34页
        2.3 数据处理第34页
    3 结果与分析第34-41页
        3.1 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清抗菌活力的影响第34-35页
        3.2 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清溶菌酶活力的影响第35-36页
        3.3 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清酚氧化酶活力的影响第36-37页
        3.4 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清过氧化物酶相对活力的影响第37页
        3.5 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清超氧化物歧化酶活力的影响第37-38页
        3.6 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清酸性磷酸酶活力的影响第38-39页
        3.7 脂多糖和灭活疫苗对梭子蟹血清碱性磷酸酶活力的影响第39页
        3.8 脂多糖和灭活疫苗对血细胞吞噬活力的影响第39-41页
    4 讨论第41-43页
    5 小结第43-44页
第四章 南极细菌AT82脂多糖的结构初探第44-59页
    1 前言第44页
    2 材料和方法第44-49页
        2.1 试剂和仪器第44-45页
            2.1.1 材料及试剂第44-45页
            2.1.2 主要仪器第45页
        2.2 试验方法第45-49页
            2.2.1 Cellulose DEAE-52离子交换柱层析分离AT82粗脂多糖第45-46页
            2.2.2 Sephadex G-100凝胶柱层析的进一步纯化第46-47页
            2.2.3 脂多糖纯化组分的理化特性第47页
            2.2.4 脂多糖纯化组分的凝胶渗透色谱分析第47页
            2.2.5 脂多糖纯化组分的紫外光谱分析第47页
            2.2.6 脂多糖纯化组分的红外光谱分析第47-48页
            2.2.7 糖肽键连接方式分析第48页
            2.2.8 刚果红试验第48页
            2.2.9 脂多糖纯化组分的单糖组成分析第48-49页
    3 结果与分析第49-56页
        3.1 Cellulose DEAE-52离子交换层析洗脱曲线第49页
        3.2 Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析进一步纯化第49-50页
        3.3 脂多糖纯化组分的理化特性分析第50-51页
        3.4 脂多糖纯化组分的凝胶渗透色谱分析第51-52页
            3.4.1 标准曲线的建立第51页
            3.4.2 LPS1a和LPS2a的凝胶渗透色谱分析第51-52页
        3.5 脂多糖纯化组分的紫外光谱分析第52页
        3.6 脂多糖纯化组分的红外光谱分析第52-53页
        3.7 糖肽键连接方式分析第53页
        3.8 刚果红试验第53-54页
        3.9 脂多糖纯化组分的单糖组成分析第54-56页
    4 讨论第56-57页
    5 小结第57-59页
第五章 南极细菌AT82粗脂多糖及其纯化组分的抗氧化活性研究第59-70页
    1 前言第59页
    2 材料和方法第59-63页
        2.1 试剂和仪器第59-60页
            2.1.1 试验样品第59页
            2.1.2 试验动物第59页
            2.1.3 主要试剂和仪器第59-60页
        2.2 试验方法第60-63页
            2.2.1 粗脂多糖及其纯化组分体外抗氧化活性的测定第60-61页
            2.2.2 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响第61-62页
            2.2.3 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝线粒体脂质过氧化的抑制作用第62页
            2.2.4 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响第62-63页
    3 结果与分析第63-68页
        3.1 粗脂多糖及其纯化组分清除DPPH自由基的测定第63-64页
        3.2 粗脂多糖及其纯化组分清除羟自由基的测定第64页
        3.3 粗脂多糖及其纯化组分清除超氧阴离子自由基的测定第64-65页
        3.4 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响第65-66页
        3.5 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠肝线粒体脂质过氧化的抑制作用第66-67页
        3.6 粗脂多糖及其纯化组分对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响第67-68页
    4 讨论第68-69页
    5 小结第69-70页
第六章 结论与展望第70-72页
    1 结论第70-71页
    2 展望第71-72页
参考文献第72-79页
致谢第79页

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