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双歧杆菌对便秘的影响及其作用机理研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中英文缩写词对照表第7-13页
第一章 绪论第13-23页
    1.1 便秘概述第13-16页
        1.1.1 便秘的病因第13页
        1.1.2 便秘的分类第13-14页
        1.1.3 便秘的危害第14页
        1.1.4 便秘的形成机制第14-15页
        1.1.5 便秘的治疗第15-16页
    1.2 双歧杆菌对便秘的影响第16-18页
        1.2.1 益生菌简介第16-17页
        1.2.2 双歧杆菌的生物学特性第17页
        1.2.3 目前应用双歧杆菌缓解便秘的研究进展第17-18页
    1.3 双歧杆菌缓解便秘机制简介第18-21页
        1.3.1 双歧杆菌对肠道菌群的影响第18-20页
        1.3.2 双歧杆菌对免疫系统的调节作用第20页
        1.3.3 双歧杆菌对肠神经系统的调节作用第20-21页
    1.4 论文立题背景及意义第21-22页
        1.4.1 课题研究的目的及依据第21-22页
    1.5 论文的主要研究内容第22-23页
第二章 双歧杆菌生理特性差异性分析及对便秘影响的差异研究第23-47页
    2.1 前言第23页
    2.2 试验材料与设备第23-25页
        2.2.1 主要试剂第23-24页
        2.2.2 菌株第24页
        2.2.3 培养基第24页
        2.2.4 主要仪器和设备第24-25页
    2.3 实验方法第25-31页
        2.3.1 实验用菌株的制备第25页
        2.3.2 不同双歧杆菌的生长特性研究第25页
        2.3.3 不同双歧杆菌对HT-29 细胞的粘附能力研究第25页
        2.3.4 实验用灌胃菌株的制备第25-26页
        2.3.5 便秘动物实验设计第26-28页
            2.3.5.1 便秘模型的建立第26页
            2.3.5.2 动物实验设计第26-28页
        2.3.6 便秘相关检测指标——粪便含水量的测定第28页
        2.3.7 便秘相关检测指标——首粒排黑便时间的测定第28页
        2.3.8 便秘相关检测指标——小肠推进率的测定第28-29页
        2.3.9 便秘前后小鼠粪便菌群的测定第29-30页
            2.3.9.1 小鼠粪便样品中总DNA的提取第29页
            2.3.9.2 小鼠粪便样品细菌 16S rDNA可变区(V4区)扩增第29页
            2.3.9.3 PCR产物切胶回收第29-30页
            2.3.9.4 混样、构建文库以及Illumina Miseq平台测序第30页
            2.3.9.5 生物信息学分析第30页
        2.3.10 便秘前后小鼠粪便SCFAs的测定第30页
            2.3.10.1 小鼠粪便中SCFAs的抽提第30页
            2.3.10.2 小鼠粪便中SCFAs的检测第30页
        2.3.11 便秘前后小鼠血清中胃肠调节肽的测定第30页
        2.3.12 数据分析第30-31页
    2.4 结果和讨论第31-45页
        2.4.1 不同双歧杆菌的生长特性第31页
        2.4.2 不同双歧杆菌对肠上皮细胞HT-29 粘附能力的研究第31-32页
        2.4.3 不同双歧杆菌在改善便秘小鼠健康指标以及粪便含水量方面的差异第32-34页
        2.4.4 不同双歧杆菌在改善便秘小鼠肠道转运时间方面的差异第34-37页
        2.4.5 不同双歧杆菌在调节便秘小鼠粪便菌群方面的差异第37-40页
        2.4.6 不同双歧杆菌在调节便秘小鼠粪便中SCFAs方面的差异第40-43页
        2.4.7 不同双歧杆菌在调节便秘小鼠血清中胃肠调节肽方面的差异第43-45页
    2.5 本章小结第45-47页
第三章 双歧杆菌细胞粘附特性对便秘干预作用的影响第47-58页
    3.1 前言第47页
    3.2 试验材料与设备第47-48页
        3.2.1 主要试剂第47页
        3.2.2 菌株第47页
        3.2.3 培养基第47-48页
        3.2.4 主要仪器和设备第48页
    3.3 实验方法第48-49页
        3.3.1 实验用双歧杆菌菌株的培养及灌胃菌株的制备第48页
        3.3.2 便秘动物实验设计第48-49页
        3.3.3 便秘相关检测指标——粪便含水量的测定第49页
        3.3.4 便秘相关检测指标——小肠推进率的测定第49页
        3.3.5 便秘相关检测指标——首粒排黑便时间的测定第49页
        3.3.6 便秘前后小鼠粪便菌群的测定第49页
        3.3.7 便秘前后小鼠粪便SCFAs的测定第49页
        3.3.8 便秘前后小鼠血清中胃肠调节肽的测定第49页
        3.3.9 数据分析第49页
    3.4 结果与讨论第49-56页
        3.4.1 不同粘附特性双歧杆菌对便秘小鼠粪便含水量的影响第49-50页
        3.4.2 不同粘附特性双歧杆菌对便秘小鼠肠道转运时间的影响第50-51页
        3.4.3 不同粘附特性双歧杆菌对便秘小鼠粪便SCFAs的影响第51-52页
        3.4.4 不同粘附特性双歧杆菌对便秘小鼠粪便菌群的影响第52-55页
        3.4.5 不同粘附特性双歧杆菌对便秘小鼠血清中胃肠调节肽的影响第55-56页
    3.5 本章小结第56-58页
第四章 双歧杆菌可利用的低聚糖对便秘小鼠肠道菌群及SCFAs的影响第58-81页
    4.1 前言第58页
    4.2 试验材料与设备第58-59页
        4.2.1 主要试剂第58页
        4.2.2 菌株第58-59页
        4.2.3 培养基第59页
        4.2.4 主要仪器和设备第59页
    4.3 实验方法第59-60页
        4.3.1 不同双歧杆菌对低聚糖的利用情况研究第59页
        4.3.2 低聚糖剂量的选择及动物实验的设计第59页
        4.3.3 便秘相关检测指标的测定——粪便含水量的测定第59页
        4.3.4 便秘相关检测指标的测定——小肠推进率第59页
        4.3.5 便秘相关检测指标的测定——首粒排黑便时间第59页
        4.3.6 不同低聚糖处理后小鼠粪便及其盲肠内容物菌群的测定第59-60页
        4.3.7 不同低聚糖处理后小鼠粪便SCFAs的测定第60页
        4.3.8 不同低聚糖处理后小鼠血清中胃肠调节肽的测定第60页
        4.3.9 数据分析第60页
    4.4 结果与讨论第60-79页
        4.4.1 双歧杆菌对不同低聚糖的利用情况第60页
        4.4.2 不同低聚糖对便秘小鼠粪便含水量的影响第60-61页
        4.4.3 不同低聚糖对便秘小鼠肠道转运时间的影响第61-62页
        4.4.4 不同低聚糖对便秘小鼠粪便SCFAs的影响第62-64页
        4.4.5 不同低聚糖对便秘小鼠粪便菌群的影响第64-69页
        4.4.6 不同低聚糖对便秘小鼠盲肠内容物菌群的影响第69-78页
        4.4.7 不同低聚糖对便秘小鼠血清中胃肠调节肽的影响第78-79页
    4.5 本章小结第79-81页
第五章 双歧杆菌缓解便秘机制解析第81-111页
    5.1 前言第81-82页
    5.2 试验材料与设备第82页
        5.2.1 主要试剂第82页
        5.2.2 菌株第82页
        5.2.3 培养基第82页
        5.2.4 主要仪器和设备第82页
    5.3 实验方法第82-87页
        5.3.1 实验用双歧杆菌菌株的培养及灌胃菌株、SCFAs的制备第82-83页
        5.3.2 不同粘附特性双歧杆菌处理组动物实验设计第83页
        5.3.3 SCFAs处理组动物实验设计第83页
        5.3.4 便秘前后不同双歧杆菌处理组小鼠粪便SCFAs的测定第83页
        5.3.5 便秘前后不同SCFAs处理组小鼠粪便SCFAs的测定第83-84页
        5.3.6 便秘前后不同双歧杆菌处理组小鼠粪便菌群的检测第84-86页
            5.3.6.1 小鼠粪便中总DNA的提取第84-85页
            5.3.6.2 小鼠粪便样品细菌 16S rDNA可变区(V3V4区)扩增第85-86页
        5.3.7 便秘前后不同SCFAs处理组小鼠粪便菌群的检测第86页
        5.3.8 便秘前后不同双歧杆菌处理组小鼠Treg细胞百分含量的检测第86-87页
            5.3.8.1 小鼠脾脏中淋巴细胞的分离及Treg细胞染色第86-87页
            5.3.8.2 流式细胞术检测Treg细胞的比例第87页
        5.3.9 便秘前后不同SCFAs处理组小鼠Treg细胞百分含量的检测第87页
        5.3.10 便秘前后不同双歧杆菌处理组小鼠血清中细胞因子的检测第87页
        5.3.11 便秘前后不同SCFAs处理组小鼠血清中细胞因子的检测第87页
        5.3.12 数据分析第87页
    5.4 结果与讨论第87-110页
        5.4.1 双歧杆菌对便秘小鼠肠道SCFAs的影响第87-88页
        5.4.2 双歧杆菌对便秘小鼠肠道菌群的影响第88-94页
        5.4.3 双歧杆菌对便秘小鼠血清中 5-HT的影响第94-95页
        5.4.4 双歧杆菌对便秘小鼠Treg细胞及相关因子的影响第95-101页
        5.4.5 总SCFAs及单个SCFAs对便秘相关检测指标的影响第101页
        5.4.6 总SCFAs及单个SCFA对便秘小鼠肠道SCFAs的影响第101页
        5.4.7 总SCFAs及单个SCFA对便秘小鼠肠道菌群的影响第101-106页
        5.4.8 总SCFAs及单个SCFA对便秘小鼠血清中 5-HT的影响第106-107页
        5.4.9 总SCFAs及单个SCFA对便秘小鼠Treg细胞及相关因子的影响第107-110页
    5.5 本章小结第110-111页
主要结论与展望第111-113页
    主要结论第111页
    展望第111-113页
论文创新点第113-114页
致谢第114-116页
参考文献第116-127页
附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文第127页

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