| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| 1.1 前言 | 第12页 |
| 1.2 乳腺癌概述 | 第12-13页 |
| 1.3 糖基化修饰概述 | 第13-20页 |
| 1.3.1 蛋白质糖基化分类 | 第13-19页 |
| 1.3.2 糖链的研究策略 | 第19-20页 |
| 1.4 上皮间质转化过程（EMT）概述 | 第20-23页 |
| 1.4.1 EMT过程 | 第21页 |
| 1.4.2 EMT相关信号通路 | 第21-22页 |
| 1.4.3 EMT与肿瘤的关系 | 第22-23页 |
| 1.5 miRNA | 第23-25页 |
| 1.5.1 miRNA概述 | 第23-24页 |
| 1.5.2 miRNA与癌症 | 第24-25页 |
| 1.6 本课题的立题依据及主要研究内容 | 第25-28页 |
| 1.6.1 立题依据及研究意义 | 第25页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第25-28页 |
| 第二章 上皮间质转化过程中多聚唾液酸转移酶PST的分子调控机制研究 | 第28-42页 |
| 2.1 前言 | 第28页 |
| 2.2 材料与方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.3 细胞及细胞培养 | 第30页 |
| 2.2.4 细胞总蛋白和细胞核蛋白的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.5 蛋白免疫印迹 | 第31页 |
| 2.2.6 载体构建 | 第31-32页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR | 第32页 |
| 2.2.8 细胞转染及RNA干扰 | 第32-33页 |
| 2.2.9 凝胶迁移滞留试验（EMSA） | 第33-34页 |
| 2.2.10 双荧光素酶报告实验 | 第34页 |
| 2.2.11 细胞免疫染色 | 第34页 |
| 2.2.12 细胞划痕实验 | 第34页 |
| 2.2.13 细胞增殖实验（MTT法） | 第34页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第34-35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-41页 |
| 2.3.1 NMuMG细胞发生EMT前后STX、PST及Pax3的表达变化 | 第35-36页 |
| 2.3.2 Pax3对小鼠乳腺上皮细胞STX和PST的表达影响 | 第36-38页 |
| 2.3.3 Pax3调控PST分子机制的研究 | 第38-39页 |
| 2.3.4 Pax3对NMuMG细胞NCAM及PSA-NCAM的表达影响 | 第39-40页 |
| 2.3.5 Pax3对NMuMG细胞迁移和增殖的影响 | 第40-41页 |
| 2.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 miR-10b对MCF10A细胞表达N-糖链及O-糖链的影响 | 第42-58页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 材料与方法 | 第42-47页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第43页 |
| 3.2.3 细胞 | 第43页 |
| 3.2.4 细胞转染 | 第43-44页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR | 第44页 |
| 3.2.6 蛋白免疫印迹 | 第44-45页 |
| 3.2.7 凝集素免疫印迹 | 第45页 |
| 3.2.8 N-糖链的质谱检测 | 第45-46页 |
| 3.2.9 O-糖链的质谱检测 | 第46-47页 |
| 3.2.10 统计分析 | 第47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-56页 |
| 3.3.1 MCF10A细胞转染miR-10b后糖基因芯片结果 | 第47-49页 |
| 3.3.2 转染miR-10b的MCF10A细胞中N-糖链的质谱分析 | 第49-52页 |
| 3.3.3 转染miR-10b的MCF10A细胞中O-糖链的质谱分析 | 第52-56页 |
| 3.3.4 转染miR-10b的MCF10A细胞中关键糖基转移酶的蛋白及凝集素免疫印迹验证 | 第56页 |
| 3.4 本章小节 | 第56-58页 |
| 第四章 miR-10b通过FUT8/AKT通路增强乳腺癌细胞的运动和增殖能力 | 第58-74页 |
| 4.1 前言 | 第58页 |
| 4.2 材料与方法 | 第58-62页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第58-59页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第59页 |
| 4.2.3 细胞 | 第59页 |
| 4.2.4 载体构建 | 第59-60页 |
| 4.2.5 细胞株构建 | 第60页 |
| 4.2.6 RNA干扰 | 第60-61页 |
| 4.2.7 实时荧光定量PCR | 第61页 |
| 4.2.8 蛋白免疫印迹 | 第61页 |
| 4.2.9 细胞划痕实验 | 第61页 |
| 4.2.10 Transwell迁移实验 | 第61-62页 |
| 4.2.11 细胞增殖实验（MTT法） | 第62页 |
| 4.2.12 统计分析 | 第62页 |
| 4.3 实验结果 | 第62-72页 |
| 4.3.1 miR-10b通过p-Akt影响细胞的运动和增殖能力 | 第62-64页 |
| 4.3.2 miR-10b对MDA-MB-231 细胞运动和增殖能力的影响 | 第64-66页 |
| 4.3.3 FUT8对MCF10A细胞运动和增殖能力的影响 | 第66-69页 |
| 4.3.4 miR-10b影响Twist过表达及TGF-β 处理的MCF10A细胞运动和增殖 | 第69-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-74页 |
| 第五章 miR-10b通过miR-10b/TFAP2C/STAT3通路调控乳腺癌细胞FUT8的表达 | 第74-94页 |
| 5.1 前言 | 第74页 |
| 5.2 材料与方法 | 第74-80页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第74-75页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第75页 |
| 5.2.3 细胞 | 第75页 |
| 5.2.4 实时荧光定量PCR | 第75-76页 |
| 5.2.5 蛋白免疫印迹 | 第76页 |
| 5.2.6 载体构建 | 第76页 |
| 5.2.7 细胞株构建 | 第76页 |
| 5.2.8 RNA干扰 | 第76-77页 |
| 5.2.9 凝集素免疫印迹 | 第77页 |
| 5.2.10 凝集素细胞染色 | 第77页 |
| 5.2.11 人乳腺癌组织芯片（Tissue microarray，TMA）免疫染色 | 第77-78页 |
| 5.2.12 乳腺癌病理切片免疫组化 | 第78页 |
| 5.2.13 双荧光素酶报告实验 | 第78-79页 |
| 5.2.14 统计分析 | 第79-80页 |
| 5.3 实验结果 | 第80-92页 |
| 5.3.1 乳腺癌细胞及乳腺癌组织中FUT8异常表达分析 | 第80-85页 |
| 5.3.2 乳腺癌中TFAP2C与FUT8表达的相关性分析 | 第85-89页 |
| 5.3.3 乳腺癌细胞中TFAP2C通过STAT3调控FUT8的表达 | 第89-90页 |
| 5.3.4 miR-10b负调控TFAP2C的表达 | 第90-92页 |
| 5.4 本章小结 | 第92-94页 |
| 主要结论与展望 | 第94-96页 |
| 论文主要创新点 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-117页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第117页 |
