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表达鸡传染性支气管炎病毒S1和N蛋白重组腺病毒构建及免疫特性研究

摘要第1-7页
 Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-28页
   ·IBV 分子生物学研究进展第13-23页
     ·冠状病毒概述第13-15页
     ·IBV 分子病原学第15页
     ·流行病学第15-16页
     ·基因组结构及转录机制第16-17页
     ·基因组编码蛋白及功能第17-21页
     ·IBV 遗传与变异第21-22页
     ·IBV 分离与鉴定第22-23页
   ·IBV 基因工程疫苗研究进展第23-28页
     ·核酸疫苗第24页
     ·重组活载体疫苗第24-28页
第二章 表达鸡传染性支气管炎病毒51 和N 蛋白重组腺病毒构建与鉴定第28-37页
   ·材料和方法第28-31页
     ·病毒基因组的提取第28页
     ·RT-PCR第28-29页
     ·S1 和 N 片段与pMD18T-simlpe 载体的连接、克隆及测序第29页
     ·S1 和 N 片段与pShuttle-CMV 穿梭载体的连接第29页
     ·重组穿梭质粒共转化大肠杆菌BJ5183第29-30页
     ·重组腺病毒质粒转染HEK293 细胞第30-31页
     ·重组腺病毒的传代培养第31页
     ·重组腺病毒的遗传稳定性第31页
     ·重组腺病毒滴度测定及生长曲线分析第31页
   ·S1 和 N 蛋白在重组腺病毒中的表达第31-32页
     ·间接免疫荧光试验第31页
     ·Western blot 试验第31-32页
   ·结果第32-35页
     ·重组腺病毒质粒的构建第32页
     ·重组穿梭载体的构建第32-33页
     ·重组腺病毒质粒获得第33页
     ·重组腺病毒的遗传稳定性第33-34页
     ·重组腺病毒一步生长曲线第34页
     ·重组腺病毒S1 基因、N 基因在HEK293 细胞中的表达第34-35页
   ·讨论第35-37页
第三章 表达IBV S1 和N 蛋白重组腺病毒在鸡体内免疫特性研究第37-44页
   ·材料和方法第37-38页
     ·细胞、疫苗和动物第37页
     ·试剂和仪器第37页
     ·动物分组及免疫程序第37页
     ·免疫程序第37页
     ·样品采集第37-38页
     ·Western blot 抗体检测第38页
     ·攻毒保护试验第38页
   ·结果第38-42页
     ·ELISA 抗体检测第38-39页
     ·Western blot 检测结果第39-40页
     ·攻毒保护试验第40-42页
   ·讨论第42-44页
第四章 全文结论第44-45页
参考文献第45-54页
致谢第54-55页
作者简历第55页
攻读硕士期间发表的学术论文第55页

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