| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-23页 |
| ·马流行性感冒（Equine influenza，EI）概述 | 第16-17页 |
| ·EI 的流行病学 | 第16-17页 |
| ·EIV 的变异 | 第17页 |
| ·EIV 核蛋白（Nucleoprotein，NP）的研究进展 | 第17-20页 |
| ·EIV 核蛋白的结构与功能 | 第17-18页 |
| ·NP 在诊断方面的研究 | 第18-20页 |
| ·EIV 病原学诊断方法及其应用 | 第20-22页 |
| ·病毒分离 | 第20页 |
| ·RT-PCR | 第20-21页 |
| ·免疫荧光试验（IFA） | 第21页 |
| ·荧光定量PCR | 第21页 |
| ·基因芯片技术 | 第21页 |
| ·抗原捕捉ELISA | 第21-22页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 马流感病毒核蛋白基因的原核表达及其抗原性分析 | 第23-30页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·病毒株、质粒、菌株及血清 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要溶液和培养基的配制 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-27页 |
| ·病毒RNA 的提取 | 第24页 |
| ·NP 基因的RT-PCR 克隆 | 第24-25页 |
| ·NP 基因质粒克隆与转化 | 第25页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第25-26页 |
| ·NP 基因的原核表达与SDS-PAGE 分析 | 第26页 |
| ·原核表达重组NP 的纯化 | 第26-27页 |
| ·原核表达重组蛋白NP 的抗原性分析 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-29页 |
| ·NP 基因的PCR 扩增 | 第27页 |
| ·重组质粒pET30a-NP 的鉴定 | 第27-28页 |
| ·表达产物及其纯化产物的SDS-PAGE 分析 | 第28页 |
| ·表达产物的Western-blot 检测 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 马流感病毒核蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第30-39页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·病毒株、细胞与试验动物 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要溶液的配制 | 第30-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-35页 |
| ·动物免疫 | 第31页 |
| ·EIV XJ 株的纯化 | 第31页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第31-32页 |
| ·细胞融合 | 第32-33页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选、克隆、冻存及复苏 | 第33页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备及其纯化 | 第33页 |
| ·单克隆抗体特性鉴定 | 第33-35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第35页 |
| ·腹水效价的测定及其纯化 | 第35页 |
| ·单克隆抗体特性鉴定 | 第35-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 马流感病毒抗原捕捉ELISA 检测方法的建立及初步应用 | 第39-64页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·病毒株与试验动物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要溶液的配制 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第39-40页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法的建立-1 | 第40-42页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法的建立-2 | 第42-43页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法的建立-3 | 第43页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法的建立-4 | 第43页 |
| ·实验室感染 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-62页 |
| ·纯化后多抗的纯度、浓度及反应性确定 | 第43页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法-1 反应条件的确定 | 第43-48页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法-2 反应条件的确定 | 第48-53页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法-3 反应条件的确定 | 第53-57页 |
| ·抗原捕捉ELISA 方法-4 反应条件的确定 | 第57-62页 |
| ·攻毒试验结果 | 第62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第五章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71页 |
