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北京地区犬细小病毒病的分子流行病学调查研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 绪论第14-24页
   ·犬细小病毒的病原学研究进展第14-19页
     ·犬细小病毒的发现第14-15页
     ·CPV 的生物学特性第15-16页
     ·CPV 的基因组结构及编码蛋白质第16-19页
   ·犬细小病毒病的研究进展第19-23页
     ·流行病学第19-20页
     ·致病机理与症状第20-21页
     ·CPV 的检测技术第21-23页
     ·防制措施第23页
   ·小结与展望第23-24页
第二章 犬细小病毒病 PCR 检测方法的建立与应用第24-32页
   ·材料第24-25页
     ·引物第24页
     ·毒株与细胞第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·临床样品第25页
     ·主要仪器第25页
   ·方法第25-27页
     ·细胞培养的病毒 DNA 模板制备第25页
     ·病料中病毒 DNA 的模板制备第25-26页
     ·PCR 反应体系第26页
     ·PCR 检测的特异性第26页
     ·PCR 检测的敏感性第26页
     ·临床病料的 PCR 检测第26-27页
     ·PCR 反应产物的回收与纯化第27页
   ·结果与分析第27-30页
     ·PCR 检测的特异性第27页
     ·PCR 检测的敏感性第27-28页
     ·临床样品 CPV 的 PCR 检测方法的应用与比较第28-30页
   ·讨论第30-32页
     ·PCR 检测方法的应用与比较第30页
     ·宠物临床样品的统计与分析第30-32页
第三章 VP2 全基因的克隆与分子流行病学分析第32-49页
   ·材料第32-34页
     ·引物第32-33页
     ·主要试剂第33页
     ·试验所用溶液及配制第33页
     ·主要仪器设备第33-34页
   ·方法第34-37页
     ·VP2 全基因组 PCR 反应体系第34页
     ·DNA 片段的胶回收第34页
     ·VP2 基因连接到pEASY-T1 载体第34-35页
     ·转化第35页
     ·碱裂解法提取质粒第35页
     ·试剂盒提取阳性质粒第35-36页
     ·阳性质粒的酶切鉴定第36页
     ·测序分析第36-37页
   ·结果与分析第37-47页
     ·PCR 扩增 VP2 全基因第37页
     ·阳性重组质粒的双酶切鉴定第37-38页
     ·样品 VP2 全基因分子流行病学调查第38-47页
   ·讨论第47-49页
第四章 犬细小病毒北京株的分离与鉴定第49-60页
   ·材料第49-50页
     ·发病宠物病料第49页
     ·血清、细胞及培养基第49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要溶液的配置第49-50页
     ·主要器材及仪器第50页
   ·方法第50-52页
     ·病料的处理第50-51页
     ·CPV 毒株的分离第51页
     ·CPV 毒株的 PCR 鉴定第51页
     ·重组质粒的构建第51-52页
     ·重组质粒的测序及序列分析第52页
     ·间接免疫荧光试验第52页
     ·分离病毒的毒价测定第52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·病毒的分离第52-53页
     ·北京分离株的 PCR 鉴定第53页
     ·VP2 全长基因的 PCR 扩增第53-54页
     ·重组质粒的酶切鉴定第54页
     ·毒株 VP2 序列分析第54-57页
     ·间接免疫荧光检测第57页
     ·分离毒的 TCID50 测定第57-58页
   ·讨论第58-60页
第五章 全文总结第60-61页
参考文献第61-66页
致谢第66-67页
作者简历第67页

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