摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
·犬细小病毒的病原学研究进展 | 第14-19页 |
·犬细小病毒的发现 | 第14-15页 |
·CPV 的生物学特性 | 第15-16页 |
·CPV 的基因组结构及编码蛋白质 | 第16-19页 |
·犬细小病毒病的研究进展 | 第19-23页 |
·流行病学 | 第19-20页 |
·致病机理与症状 | 第20-21页 |
·CPV 的检测技术 | 第21-23页 |
·防制措施 | 第23页 |
·小结与展望 | 第23-24页 |
第二章 犬细小病毒病 PCR 检测方法的建立与应用 | 第24-32页 |
·材料 | 第24-25页 |
·引物 | 第24页 |
·毒株与细胞 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·临床样品 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·方法 | 第25-27页 |
·细胞培养的病毒 DNA 模板制备 | 第25页 |
·病料中病毒 DNA 的模板制备 | 第25-26页 |
·PCR 反应体系 | 第26页 |
·PCR 检测的特异性 | 第26页 |
·PCR 检测的敏感性 | 第26页 |
·临床病料的 PCR 检测 | 第26-27页 |
·PCR 反应产物的回收与纯化 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-30页 |
·PCR 检测的特异性 | 第27页 |
·PCR 检测的敏感性 | 第27-28页 |
·临床样品 CPV 的 PCR 检测方法的应用与比较 | 第28-30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
·PCR 检测方法的应用与比较 | 第30页 |
·宠物临床样品的统计与分析 | 第30-32页 |
第三章 VP2 全基因的克隆与分子流行病学分析 | 第32-49页 |
·材料 | 第32-34页 |
·引物 | 第32-33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·试验所用溶液及配制 | 第33页 |
·主要仪器设备 | 第33-34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·VP2 全基因组 PCR 反应体系 | 第34页 |
·DNA 片段的胶回收 | 第34页 |
·VP2 基因连接到pEASY-T1 载体 | 第34-35页 |
·转化 | 第35页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第35页 |
·试剂盒提取阳性质粒 | 第35-36页 |
·阳性质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
·测序分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-47页 |
·PCR 扩增 VP2 全基因 | 第37页 |
·阳性重组质粒的双酶切鉴定 | 第37-38页 |
·样品 VP2 全基因分子流行病学调查 | 第38-47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
第四章 犬细小病毒北京株的分离与鉴定 | 第49-60页 |
·材料 | 第49-50页 |
·发病宠物病料 | 第49页 |
·血清、细胞及培养基 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49页 |
·主要溶液的配置 | 第49-50页 |
·主要器材及仪器 | 第50页 |
·方法 | 第50-52页 |
·病料的处理 | 第50-51页 |
·CPV 毒株的分离 | 第51页 |
·CPV 毒株的 PCR 鉴定 | 第51页 |
·重组质粒的构建 | 第51-52页 |
·重组质粒的测序及序列分析 | 第52页 |
·间接免疫荧光试验 | 第52页 |
·分离病毒的毒价测定 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·病毒的分离 | 第52-53页 |
·北京分离株的 PCR 鉴定 | 第53页 |
·VP2 全长基因的 PCR 扩增 | 第53-54页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第54页 |
·毒株 VP2 序列分析 | 第54-57页 |
·间接免疫荧光检测 | 第57页 |
·分离毒的 TCID50 测定 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第五章 全文总结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |